Diapositive 1

Nouvelles approches pour l'étude
des cellules endothéliales en
microscopie
Ceci n’est pas un poulpe!
CHATELAIS Mathias
Ingénieur Hospitalier
INSERM U1064 Nantes
Dir : ANEGON Ignacio
Le 29-03-12

La Cellule endothéliale :
Rôle de barrière cellulaire / activités de contrôle
 De l’inflammation
 De Réponse immune innée et adaptative
 De l’Homéostasie vasculaire
CD31 / α-actine / Dapi
Cellule
Endothéliale
Cellules endothéliales
La Migration cellulaire permet :
 D’étudier le remodelage vasculaire
 Les mécanismes impliqués dans la formation des adhésions focales
 De trouver des molécules régulant la migration
Introduction

Inconvénients :
 Tracking difficile
perte cellule dans champ
perte de la cellule
présence de débris cellulaire
 Vélocité difficile à mesurer
 Résultats en % de recouvrement (biais)
Nombreuse interactions cell/cell
Division cellulaire/étalement
Effet de détassement (migration?)
Avantages :
 Peu coûteux
 Rapide
Tapis cellulaire endothélial, induction mécanique
Zone de recouvrement
La migration cellulaire 2D

Migration sur rail 10µm
Technologie CYTOO :
Migration 1D sur rail de fibronectine
Lame de verre
Surface cytophobe
Fibronectine Cellule
Milieu
1 puce CYTOO motility :
 4 tailles de rails différentes
 4 conditions simultanées
 n=200cellules/condition
 Vélocité, Immunofluorescence
La migration cellulaire 1D
Migration 1D sur rail 10µm

Cellules isolées sur rails de fibronectine Avantages :
Tracking facile
Cellule en permanence dans le champ
Multitracking possible
Absence de débris cellulaire
 Vélocité facile à mesurer (µm/h)
 Nombreuses cellules analysées
 Peu d’interaction cell/cell
 Division/étalement contrôlé
 Pas d’effet de détassement
 Nécessite peu de cellules (5000 par puits)
Inconvénients :
 Plus coûteux
 Analyse plus longue
La migration cellulaire 1D
Zone de migration