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ECOLE NATIONALE VETERINAIRE D’ALFORT
Année 2004
BASES MOLECULAIRES DES INTERACTIONS
DES ADENOVIRUS AVEC LA MUQUEUSE
INTESTINALE
THESE
Pour le
DOCTORAT VETERINAIRE
Présentée et soutenue publiquement devant
LA FACULTE DE MEDECINE DE CRETEIL
Le 2 décembre 2004
par
LECOLLINET Sylvie Carine Florence
Née le 26 février 1979 à Charenton le Pont (Val de Marne)
JURY
Président : M.
Professeur à la Faculté de Médecine de CRETEIL
Membres
Directeur : M. ELOIT Marc
Professeur à l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort
Assesseur : M. BELLIER Sylvain
Maître de conférences à l’Ecole Nationale Vétérinaire d’Alfort
Invitée : Mme RICHARDSON Jennifer

LISTE DES MEMBRES DU CORPS ENSEIGNANT
Directeur : M. le Professeur COTARD Jean-Pierre
Directeurs honoraires : MM. les Professeurs PARODI André-Laurent, PILET Charles
Professeurs honoraires: MM. BORDET Roger,BUSSIERAS Jean,LE BARS Henri, MILHAUD Guy,ROZIER Jacques,THERET Marcel,VUILLAUME Robert
DEPARTEMENT DES SCIENCES BIOLOGIQUES ET PHARMACEUTIQUES (DSBP)
Chef du département : M. BOULOUIS Henri-Jean, Professeur - Adjoint : M. DEGUEURCE Christophe, Professeur
-UNITE D’ANATOMIE DES ANIMAUX DOMESTIQUES
Mme CREVIER-DENOIX Nathalie, Professeur*
M. DEGUEURCE Christophe, Professeur
Mlle ROBERT Céline, Maître de conférences
M. CHATEAU Henri, AERC
-UNITE DE PATHOLOGIE GENERALE , MICROBIOLOGIE,
IMMUNOLOGIE
Mme QUINTIN-COLONNA Françoise, Professeur*
M. BOULOUIS Henri-Jean, Professeur
Mme VIALE Anne-Claire, Maître de conférences
-UNITE DE PHYSIOLOGIE ET THERAPEUTIQUE
M. BRUGERE Henri, Professeur *
Mme COMBRISSON Hélène, Professeur
M. TIRET Laurent, Maître de conférences
-UNITE DE PHARMACIE ET TOXICOLOGIE
Mme ENRIQUEZ Brigitte, Professeur *
Mme HUYNH-DELERME, Maître de conférences contractuel
M. TISSIER Renaud, Maître de conférences
- UNITE D’HISTOLOGIE , ANATOMIE PATHOLOGIQUE
M. CRESPEAU François, Professeur *
M. FONTAINE Jean-Jacques, Professeur
Mme BERNEX Florence, Maître de conférences
Mme CORDONNIER-LEFORT Nathalie, Maître de conférences
-UNITE DE BIOCHIMIE
M. BELLIER Sylvain, Maître de conférences*
M. MICHAUX Jean-Michel, Maître de conférences
- UNITE DE VIROLOGIE
M. ELOIT Marc, Professeur *
Mme ALCON Sophie, Maître de conférences contractuel
-DISCIPLINE : PHYSIQUE ET CHIMIE BIOLOGIQUES ET
MEDICALES
M. MOUTHON Gilbert, Professeur
-DISCIPLINE : BIOLOGIE MOLECULAIRE
Melle ABITBOL Marie, Maître de conférences contractuel
-DISCIPLINE : ETHOLOGIE
M. DEPUTTE Bertrand, Professeur
DEPARTEMENT D’ELEVAGE ET DE PATHOLOGIE DES EQUIDES ET DES CARNIVORES (DEPEC)
Chef du département : M. FAYOLLE Pascal, Professeur - Adjointe : Mme BEGON Dominique , Professeur
-UNITE DE MEDECINE
M. POUCHELON Jean-Louis, Professeur*
M. CLERC Bernard, Professeur
Mme CHETBOUL Valérie, Professeur
M. MORAILLON Robert, Professeur
M. BLOT Stéphane, Maître de conférences
M. ROSENBERG Charles, Maître de conférences contractuel
Melle MAUREY Christelle, Maître de conférences contractuel
- UNITE DE CLINIQUE EQUINE
M. DENOIX Jean-Marie, Professeur *
M. TNIBAR Mohamed, Maître de conférences contractuel
M. AUDIGIE Fabrice, Maître de conférences
Mme DESJARDINS-PESSON Isabelle, Maître de confér..contractuel
-UNITE DE REPRODUCTION ANIMALE
M. MIALOT Jean-Paul, Professeur * (rattaché au DPASP)
M. NUDELMANN Nicolas, Maître de conférences
Mme CHASTANT-MAILLARD Sylvie, Maître de conférences
(rattachée au DPASP )
M. FONTBONNE Alain, Maître de conférences
M. REMY Dominique, Maître de conférences (rattaché au DPASP)
Melle CONSTANT Fabienne, AERC (rattachée au DPASP)
- UNITE DE PATHOLOGIE CHIRURGICALE
M. FAYOLLE Pascal, Professeur *
M. MAILHAC Jean-Marie, Maître de conférences
M. MOISSONNIER Pierre, Professeur
Mme VIATEAU-DUVAL Véronique, Maître de conférences
M. DESBOIS Christophe, Maître de conférences
Mlle RAVARY Bérangère, AERC (rattachée au DPASP)
M. ZILBERSTEIN Luca, Maître de Conférences contractuel
M. HIDALGO Antoine, Maître de Conférences contractuel
- UNITE DE RADIOLOGIE
Mme BEGON Dominique, Professeur*
M. RUEL Yannick, AERC
- UNITE DE PARASITOLOGIE ET MALADIES PARASITAIRES
M. CHERMETTE René, Professeur *
M. POLACK Bruno, Maître de conférences
M. GUILLOT Jacques, Professeur
Melle MARIGNAC Geneviève, Maître de conférences contractuel
M. PARAGON Bernard, Professeur (rattaché au DEPEC)
M. GRANDJEAN Dominique, Professeur (rattaché au DEPEC)
DEPARTEMENT DES PRODUCTIONS ANIMALES ET DE LA SANTE PUBLIQUE (DPASP)
Chef du département : M. CERF Olivier, Professeur - Adjoint : M. BOSSE Philippe, Professeur
-UNITE DES MALADIES CONTAGIEUSES
M. TOMA Bernard, Professeur
M. BENET Jean-Jacques, Professeur*
Mme HADDAD H0ANG XUAN Nadia, Maître de confér.contractuel
M. SANAA Moez, Maître de conférences
-UNITE D’HYGIENE ET INDUSTRIE DES ALIMENTS
D’ORIGINE ANIMALE
M. BOLNOT François, Maître de conférences *
M. CARLIER Vincent, Professeur
M. CERF Olivier, Professeur
Mme COLMIN Catherine, Maître de conférences
M. AUGUSTIN Jean-Christophe, Maître de conférences
- UNITE DE ZOOTECHNIE, ECONOMIE RURALE
M. BOSSE Philippe, Professeur
M. COURREAU Jean-François, Professeur*
Mme GRIMARD-BALLIF Bénédicte, Maître de conférences
Mme LEROY Isabelle, Maître de conférences
M. ARNE Pascal, Maître de conférences
M. PONTER Andrew, Maître de conférences
- UNITE DE PATHOLOGIE MEDICALE DU BETAIL ET DES
ANIMAUX DE BASSE-COUR
Mme BRUGERE-PICOUX Jeanne, Professeur
M.MAILLARD Renaud, Maître de conférences associé
M. MILLEMANN Yves, Maître de conférences*
M. ADJOU Karim, Maître de conférences
Ingénieurs Professeurs agrégés certifiés (IPAC) : * Responsable de l’Unité
Mme CONAN Muriel, Professeur d’Anglais
Mme CALAGUE, Professeur d’Education Physique AERC : Assistant d’Enseignement et de Recherche Contractuel

Remerciements
Je remercie très chaleureusement l’ensemble des membres du jury, M. le Président, M.
Marc Eloit et M. Sylvain Bellier, pour s’être plongés dans cette thèse vétérinaire. Merci à
Sylvain Bellier pour ses précieux conseils et son soutien permanent. Merci beaucoup à Marc
Eloit de m’avoir acceptée au sein de son laboratoire et laissée m’investir dans ce long travail
de thèse.
Je voudrais adresser tous mes remerciements aux membres de l’UMR 1161 de
virologie de l’Ecole Vétérinaire d’Alfort, pour leur soutien et leur aide de tous les jours : à
Kenza, Martine, Stéphanie, Micheline, Annie, les deux Sophie, Rodolphe, Muriel, Sébastien,
Daniel, Matthieu, Nathalie, Bernard et surtout à celles qui m’accompagnent quotidiennement
dans ma thèse et qui m’offrent leur confiance et patience, Jennifer Richardson et Françoise
Gavard. Merci aussi aux stagiaires qui se sont investies dans ce travail, Mélanie, Sophie,
Maeva et Hélène.
Ce travail ne pourrait pas exister sans nos partenaires de la société CRUCELL
(Leiden, Pays-Bas). Merci donc à Menzo Havenga, à Angélique Laemckert, pour ses trucs et
astuces sur la production adénovirale et à tant d’autres.
Je suis aussi reconnaissante envers Philippes Fontanges, responsable de la plateforme
de microscopie confocale de l’hôpital Tenon, pour sa gentillesse et sa compétence, Annie
Alliot (AFSSA Alfort), pour ses manipulations acrobatiques des filtres en résine, Christine
Longin (plateforme microscopie électronique, INRA Jouy), pour mon entrée dans le monde
de l’infiniment petit et Morgane Bomsel pour ses conseils affûtés.
Un grand merci à toute ma famille, et tout particulièrement à mes parents, ma soeur et
mon grand-père pour leurs encouragements.
Et enfin, à Stéphane et à tous ceux qui m’entourent, Héloïse, Audrey, Noémie, Muriel,
Badou, Stephan, Arnaud, Célim, Hélène, Blandine, Mélanie, Christelle, Sandrine, Anne ou
m’ont accompagnée ces dernières années à l’école ou à l’université, et en particulier à tous
mes compagnons de DEA.

Table des matières
- 1 -
Table des matières
Table des figures ........................................................................................................................ 3
Liste des tableaux ....................................................................................................................... 5
Liste des abréviations ................................................................................................................. 6
Introduction ................................................................................................................................ 8
Etude bibliographique : ............................................................................................................ 10
I. Vaccination................................................................................................................... 10
I.A. Généralités....................................................................................................................... 11
I.B. Les différents types de vaccins. Avantages et limites ..................................................... 13
I.B.1 Vaccins vivants ........................................................................................................... 14
I.B.2 Vaccins inertes ............................................................................................................ 15
I.C. Place du vaccin vectorisé en médecine humaine et vétérinaire ....................................... 16
II. Vecteurs adénoviraux................................................................................................... 17
II.A. Biologie des adénovirus................................................................................................... 18
II.A.1 Structure ...................................................................................................................... 18
II.A.2 Génome ....................................................................................................................... 20
II.A.3 Cycle viral ................................................................................................................... 21
II.B. Historique du développement des vecteurs adénoviraux. Potentialités, limites .............. 24
II.B.1 Vecteurs réplicatifs...................................................................................................... 24
II.B.2 Vecteurs défectifs pour la réplication.......................................................................... 24
II.B.3 Nouvelle génération de vecteurs ................................................................................. 25
II.C. Modification du tropisme des adénovirus pour une vectorologie ciblée ......................... 26
III. Vaccination orale par vecteur adénoviral................................................................. 27
III.A. Intérêts de l’administration orale..................................................................................... 27
III.B. Obstacles rencontrés lors d’une vaccination orale........................................................... 28
III.C. Mécanisme d’induction d’une réponse immunitaire acquise dans l’intestin ................... 30
III.D. Limites de l’administration d’adénovirus par voie orale................................................. 32
III.E. La stratégie adoptée dans ce travail : Utilisation de la variété de comportements des
sérotypes d’adénovirus humains................................................................................................... 33
III.E.1 Présentation des sérotypes d’adénovirus humains ...................................................... 33
III.E.2 Utilisation de la variété de tropisme des virus pseudotypés pour la fibre ................... 35
Etude des interactions moléculaires des adénovirus avec la muqueuse intestinale ................. 37
I. Matériels et méthodes................................................................................................... 37