Université PARIS 6 et Université PARIS 7 MASTER 2 - SPÉCIALITÉ "BIOPHYSIQUE" Proposition de Stage - Année 2011 - 2012 Sujet du stage (sous forme de titre court) : Tension membranaire et régulation du pore de fusion au cours de l’exocytose Laboratoire Nom du Responsable : DARCHEN François Affiliation administrative (CNRS, INSERM...) et n° l'Unité : Adresse précise du Laboratoire : CNRS UMR 8192 Laboratoire de Dynamique membranaire et maladies neurologiques Université Paris Descartes 45 rue des Saints-Pères 75006 Paris Équipe d'accueil des Doctorants Nom de l'équipe: Trafic intracellulaire Nom du Responsable : F. Darchen École Doctorale de rattachement : B3MI Responsable du Stage Nom : F. Darchen Numéro de téléphone : 01 70 64 99 16 Numéro de télécopie : 01 70 64 99 13 Adresse électronique : [email protected] Profil de l'étudiant(e) souhaité : Renseignements complémentaires Perspectives de poursuite de thèse : Avec une bourse spécifique : X oui Non oui X Non si oui précisez : Laboratoire d'accueil (Unité CNRS, INSERM, etc..) : CNRS Nombre de chercheurs : 6 (dont Nombre d'enseignants- chercheurs : 2 dans l'équipe d'accueil) 1 (dont 1 dans l'équipe d'accueil) Nombre de "HDR" : 3 (dont 2 dans l'équipe d'accueil) Nombre d'ITA : 5 (dont 2 dans l'équipe d'accueil) Nombre de "post-docs" : 1 (dont 0 dans l'équipe d'accueil) Nombre de visiteurs étrangers : 1 (dont 1 dans l'équipe d'accueil) http://www.master.phys.upmc.fr/S_biophysique/ [email protected] Sujet de stage (et principales techniques) : Membrane tension and regulation of fusion pore dynamics during exocytosis Fusion between membranes is a key reaction that is required for multiple biological processes such as fecundation, secretion of hormones or neurotransmitters, virus entry and immunity. Fusion starts with the opening of a narrow pore, referred to as the “fusion pore”, which eventually dilates to allow the passage of large molecules. We have recently provided the first experimental evidence that membrane tension is the driving force for fusion pore enlargement and found that the GTPase Cdc42 regulates this force and thereby controls hormone secretion. We now want to determine how Cdc42 impacts on membrane tension and fusion pore dynamics in neuroendocrine cells. Actin and myosins are good candidates. We will: (i) characterize actin dynamics locally, at the vesicle/membrane interface using dual-colour TIRF microscopy, photoactivation and ultraresolutive STED microscopy and (ii) test the effect of myosins I and VI on fusion pore dilation by means of RNA interference, TIRF microscopy, electrochemical detection of monoamine release (amperometry) and image analysis.