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Etude fonctionnelle de la cellule par
Cytométrie en Flux
par Frédéric Larbret
Hôpital L’Archet
- Nice -

Introduction à la cytométrie en flux
Origine de la cytométrie en flux :
1934: applicable aux cellules hématologiques (comptage)
1941: développement des techniques d’anticorps couplés
1960: développement des premiers cytomètres
Définition :
La cytométrie en flux permet l’étude précise de cellules isolées entraînées dans un flux
liquide. Les cellules, alignées les unes derrière les autres, sont analysées une par une
en défilant à grande vitesse (plus de 30Km/h) devant une source lumineuse (un laser).
Intérêt :
C’est une technique rapide qui permet une caractérisation :
-individuelle de chaque cellule
-quantitative (intérêt statistique)
-qualitative (morphologie de la cellule et phénotypage)

Composition d’un cytomètre

Composition d’un cytomètre
1) Système fluidique :
Flux laminaire qui permet aux
cellules en suspension de
passer une à une devant le
laser
2) Système optique :
Rayon laser et différents filtres qui
permettent de sélectionner les
longueurs d’ondes appropriées
3) Système électronique :
-PMT qui capte la lumière émise,
- Digitaliseur qui la transforme en
signal électrique puis en signal
numérique,
- Ordinateur qui gère et
entrepose les données
Un cytomètre est une combinaison de 3 différents systèmes :
1
2
3

La fluidique
Système basé sur le principe
de Focalisation hydrodynamique