07_I7_B_Obs_01 I7 - Immunologie Fiche sujet - candidat LES LYMPHOCYTES, ACTEURS DE LA RÉPONSE IMMUNITAIRE Un des aspects de la réponse immunitaire est la sécrétion d’anticorps. Ces anticorps sont des protéines circulantes produites par les plasmocytes, issus de la différenciation des lymphocytes B. On recherche, par deux observations complémentaires, l’une en microscopie photonique et l’autre en microscopie électronique, quelles modifications des lymphocytes B conduisent à une cellule productrice d’anticorps, le plasmocyte. Matériel - sang de petit mammifère (le sang remplit toutes les conditions d’innocuité), un compte-goutte, sèche-cheveux - un fixateur, deux colorants spécifiques, 2 lames, papier absorbant, eau distillée, gants, pinces, marqueur - un microscope avec l’éclairage adapté - des microphotographies de leucocytes - des électronographies de leucocytes Activités et déroulement des activités 1- Justifier l’intérêt de compléter l’observation en microscopie photonique par une observation en microscopie électronique. Capacités Comprendre la manipulation Barème 2 Réaliser une manipulation d’après un protocole 3 Utiliser le microscope 4 4- Représenter par un dessin d’observation le lymphocyte observé. Préciser dans la légende les critères qui vous ont permis de l’identifier par rapport aux hématies. Appeler l'examinateur pour vérification Représenter une observation par un dessin 4 5- Représenter par un dessin simplifié le plasmocyte de la fiche document 2/2 de façon à mettre en évidence ses particularités. Représenter une observation par un dessin simplifié 3 6- Comparer les deux cellules observées au microscope électronique afin de répondre à la problématique initiale. Appliquer une démarche explicative 3 7- Remettre le microscope dans l’état « prêt à l’emploi » et ranger le poste de Gérer et organiser le poste de travail travail. 1 2- Réaliser un frottis sanguin et le colorer selon le protocole fourni. Appeler l'examinateur pour vérification 3- Utiliser le microscope et la fiche document 1/2 pour identifier un lymphocyte. Appeler l'examinateur pour vérification 07_I7_B_Obs_01 I7 - Immunologie Fiche technique - candidat LES LYMPHOCYTES, ACTEURS DE LA RÉPONSE IMMUNITAIRE Réalisation d’un frottis sanguin - Prélever, une goutte de sang à l’aide du compte-goutte Déposer la goutte de sang à l’extrémité d’une lame Appliquer une autre lame en avant de la goutte de sang inclinée à 45° de façon à ce que le sang s’étale sous la lame par capillarité. Faire glisser la lame inclinée à 45° pour étaler uniform ément la goutte. Sécher le frottis avec le sèche-cheveux. Repérer au marqueur, avec une lettre F, la face où se trouve le sang. Coloration variante de la coloration de MAY- GRÜNWALD - GIEMSA - Tremper la lame 5 fois de suite pendant une seconde dans le fixateur. Egoutter verticalement au contact du papier filtre. Tremper la lame 5 fois de suite pendant une seconde dans le colorant 1. Egoutter verticalement au contact du papier filtre. Tremper la lame 5 fois de suite pendant une seconde dans le colorant 2. Egoutter verticalement au contact du papier filtre. Rincer en laissant couler l’eau distillée doucement sur le frottis. Egoutter sur papier filtre puis sécher au sèche-cheveux. Observer au microscope sans lamelle (bien repérer la face F où se trouve le sang). NB : veiller à l’organisation et à la propreté du plan de travail 07_I7_B_Obs_01 I7 - Immunologie Fiche document - candidat (1/2) LES LYMPHOCYTES, ACTEURS DE LA RÉPONSE IMMUNITAIRE Document 1 : microphotographies de leucocytes Trois types de leucocytes observés au microscope optique un granulocyte = un polynucléaire un lymphocyte un monocyte x1000 x1700 x2000 Source : extrait d’un manuel scolaire de SVT (Bordas) 07_I7_B_Obs_01 I7 - Immunologie Fiche document - candidat (2/2) LES LYMPHOCYTES, ACTEURS DE LA RÉPONSE IMMUNITAIRE Document 2 : électronographie d’un plasmocyte et d’un lymphocyte 8 µm 15 µm Lymphocyte (x8000) Plasmocyte (x8000) http://www.ulb.ac.be/sciences/biodic/images/cellules/plasmocyte.jpg http://www.indigo.com/software/gphpcd/em1.jpg 07_I7_B_Obs_01 I7 - Immunologie Fiche réponse - candidat LES LYMPHOCYTES, ACTEURS DE LA RÉPONSE IMMUNITAIRE ETABLISSEMENT : Classe : Nom : Prénom : A rendre à l’issue de l’épreuve – Utiliser le verso si nécessaire 07_I7_B_Obs_01 I7 - Immunologie Fiche barème d'évaluation LES LYMPHOCYTES, ACTEURS DE LA RÉPONSE IMMUNITAIRE Nom des candidats Capacités et critères d’évaluation (en gras, évaluation pendant la séance) 1- Comprendre la manipulation La microscopie photonique ne suffit pas pour observer les organites ce que permet par contre la microscopie électronique 2- Réaliser une manipulation d’après un protocole - respect des différentes étapes du protocole - utilisation maîtrisée du matériel 3- Utiliser un microscope réalisation des réglages (éclairage, diaphragme, condenseur…) - utilisation des objectifs (ordre croissant des grossissements, choix adapté, mise au point) - recherche puis centrage raisonné sur le lymphocyte 4- Représenter une observation par un dessin - représentation fidèle à l’observation - netteté et finesse du tracé, mise en page - rédaction d’un titre adapté et indication du mode d’observation et grossissement - critères ayant permis la reconnaissance (légendes) 5- Représenter une observation par un dessin simplifié : - représentation fidèle au modèle - mise en évidence des structures cytoplasmiques sécrétant des anticorps 6- Appliquer une démarche explicative : - la différenciation du lymphocyte en plasmocyte se traduit par une augmentation de taille et un développement du réticulum endoplasmique 7- Gérer et organiser le poste de travail - Pendant la séance - Rangement final NOTE Barème 2 3 4 2 2 1 2 3 1 /20 07_I7_B_Obs_01 I7 - Immunologie Fiche laboratoire et évaluateurs LES LYMPHOCYTES, ACTEURS DE LA RÉPONSE IMMUNITAIRE Matériel - sang de petit mammifère (le sang remplit toutes les conditions d’innocuité), un compte-goutte, sèche-cheveux - un fixateur, deux colorants spécifiques, 2 lames, papier absorbant, eau distillée, gants, pinces, marqueur - un microscope et l’éclairage adapté - des microphotographies de leucocytes - des électronographies de leucocytes Matériel par poste - Du sang de petit mammifère (acheté chez un fournisseur spécialisé ou prélevé sur des abats, par exemple cœur frais de lapin acheté chez le boucher). - Lames fournies pour la réalisation du frottis nettoyées à l’alcool faces et tranches. - Les colorants peuvent être obtenus chez des fournisseurs spécialisés (ex : BIOLAB ou autre). - Fiche technique – candidat - Fiche document – candidat 1/2 : microphotographies de leucocytes (ou planche à l’écran : utiliser 07_I7_B_Obs_01_planche1). - Fiche document – candidat 2/2 : électronographies de leucocytes (ou planche à l’écran : utiliser 07_I7_B_Obs_01_planche2) - Fiches réponse – candidat 1/2 et 2/2. À vérifier : - le bon état de marche du microscope et des lampes, - la qualité d’impression des documents. Réaliser au préalable un frottis avec le sang récupéré pour vérifier la richesse suffisante en lymphocytes A l’attention de l’évaluateur - Prévoir une lame de frottis sanguin du commerce à fournir au candidat en cas d’échec dans la réalisation du frottis. En tenir compte dans l’évaluation de la question 2 (évaluer la prestation réellement réalisée). Prescriptions Autorisations Blouse Gants Lunettes de protection Calculette Papier brouillon oui oui oui non Fourni par l’établissement