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B. Manipulation
Pour effectuer les prélèvements, retirer le bulleur, prélever à la seringue puis remettre le
bulleur en place. A des temps conformes au tableau suivant, prélever à l’aide d’une seringue
de 1ml, 0,3ml de V1 et placer chaque prélèvement dans une cuve à spectrophotométrie.
Rajouter précisément à l’aide d’une seringue de 2ml, 1,5ml d’eau distillée dans chaque cuve.
Le facteur de dilution correspondant à cette opération est donc : (1,5+0,3) / 0,3= 6.
Dates des différents prélèvements à faire :
- Compartiment 1 (boudin)
t (mn) :0 (solution mère), 8, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60
- Compartiment 2 (bêcher)
t (mn), 40,50,60
Faire un tableau (1) avec à chacune de ces dates la densité optique D de chaque échantillon
(voir méthode ci-dessous).
C. Mesure des concentrations : réalisation d’une courbe d’étalonnage
Définitions :
Une intensité lumineuse I0 arrive sur un milieu absorbant. Une partie est absorbée et en sortie
l'intensité vaut I < I0. On défini la transmission t et la densité optique D par :
La loi de Beer-Lambert indique que D est proportionnelle à la concentration C :
À partir de la solution A (0,5g/l), préparer les solutions suivantes dans les cuves à
spectrophotométrie (ED signifie eau distillée) :
Réglage du spectrophotomètre :
Régler la longueur d’onde à 586 nm.
Sur une cuve contenant de l’eau distillée régler le facteur de transmission à 100% : D =0.
Agiter les 4 solutions et mesurer leur densité optique.
Remplir le tableau 2 et tracer la courbe d’étalonnage C = f(D).
D. Résultats
1. À l’aide de la courbe d’étalonnage, reporter dans le tableau 1 les valeurs exactes des
concentrations C1 et C2 en ayant tenu compte du facteur de dilution.