Laboratoire : AFMB (Architecture et Fonction des Macromolécules Biologiques) Equipe "Immunologie Structurale " (Alain ROUSSEL) http://www.afmb.univ-mrs.fr/immunologie-structurale Directeur de Stage : Alain ROUSSEL [email protected] PROPOSITION DE STAGE de MASTER2 année universitaire 2013/2014 "Bases moléculaires et structurales de la réponse immunitaire innée chez la Drosophile" L'immunité innée est la première barrière de défense de tous les organismes vivants contre les agressions microbiennes. Elle est apparue chez les invertébrés et chez les plantes bien avant l'apparition de l'immunité adaptative chez les vertébrés. Elle a pour base la reconnaissance de motifs spécifiques comme les peptidoglycanes, les lipopolysaccharide ou les 1-3 glucanes qui se trouvent à la surface des microorganismes. Chez la Drosophile, l'induction de la synthèse de peptides antimicrobiens après infection est sous le contrôle des voies Toll et Imd. La détection des bactéries conduisant à l'activation de ces voies est réalisée par des protéines de reconnaissance du peptidoglycane ou PGRP (peptidoglycan recognition protein). La Drosophile possède 13 gènes codant pour 17 PGRP. La caractérisation au niveau moléculaire et fonctionnel de ces protéines permettra une meilleure compréhension de la réponse immunitaire innée chez la Drosophile et servira de modèle à la compréhension de certains mécanismes homologues chez l'Homme. Le projet du stage porte plus particulièrement sur la protéine PGRP-LE qui est responsable de la reconnaissance des bactéries à Gram négatif en amont de la voie Imd. Le but est d'étudier les mécanismes de signalisation intracellulaire induits par le domaine N-terminal de PGRP-LE. Les techniques utilisées seront la cristallographie aux rayons X, la microscopie électronique et la microscopie confocale. Des études fonctionnelles sur PGRP-LE seront menées en parallèle dans l'équipe du Pr Royet à l'IBDML (Institut de Biologie du Développement de Marseille-Luminy). Publications récentes de l'équipe sur le sujet: Neyen C., Poidevin M., Roussel A. and Lemaitre B. (2012) Tissue- and LigandSpecific Sensing of Gram-Negative Infection in Drosophila by PGRP-LC Isoforms and PGRP-LE. Journal of Immunology 189, 1886-97. Basbous N., Coste F., Leone P., Vincentelli R., Royet J., Kellenberger C. and Roussel A. (2011) The Drosophila peptidoglycan-recognition protein LF interacts with peptidoglycan-recognition protein LC to downregulate the Imd pathway. EMBO Reports 12, 327-33. Leone P., Bischoff V., Kellenberger C., Hetru C., Royet J. and Roussel A. (2008) Crystal structure of Drosophila PGRP-SD suggests binding to DAP-type but not lysine-type peptidoglycan. Molecular Immunology 45, 2521-30.