Stage proposé par Violette THERMES
CR1, INRA
INRA - SCRIBE, Campus de Beaulieu, Avenue du Général Leclerc, 35042 Rennes cedex
Téléphone : 02.23.48.57.30
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Patrick Prunet
Equipe stress et adaptation
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Patrick Prunet
Résumé du thème de recherche de l’équipe
La vie en milieu aquatique est associée à des échanges permanents d'eau, d'ions et de gaz entre le
milieu intérieur du poisson et le milieu extérieur, échanges qui sont largement sollicités dès que les
conditions environnementales fluctuent au point parfois de générer des situations de stress. Une
meilleure connaissance des réponses au stress devrait permettre d’identifier des indicateurs de l’état
de santé du poisson (biomarqueurs) qui seront utiles pour le choix d'espèces à domestiquer ou pour
l’amélioration des méthodes d’élevage en aquaculture. C’est dans ce contexte que le projet de l’équipe
se développe autour des 3 thèmes suivants : le premier, animé par Patrick Prunet (DR1, animateur
d’équipe), concerne l’étude du contrôle endocrinien de l’osmorégulation chez les poissons, le second,
développé par Isabelle Leguen (CR1), concerne l’étude du fonctionnement de l’épithélium branchial,
en particulier les mécanismes d'échanges ioniques impliqués dans l’osmorégulation chez la Truite. Le
troisième thème est développé par Violette Thermes (CR1, recrutée en 2007) et concerne la
recherche de gènes impliqués dans l’ontogenèse des branchies chez le Médaka.
Caractérisation in vivo de la fonction de gènes candidats impliqués dans la
prolifération/spécification des progéniteurs de ionocytes au cours du développement
embryonnaire chez le poisson Médaka.
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage:
Violette Thermes
02.23.48.57.30
violette.thermes@rennes.inra.fr
Projet de stage :
Les petits poissons téléostéens euryhalins, tel que le médaka (Oryzias latipes), sont capables de
s’acclimater à des variations importantes de salinité (i.e. lors d’un passage d’eau douce en eau de
mer). Ce phénomène repose en parti sur un renouvellement des cellules branchiales grâce à la
prolifération et la spécification de cellules progénitrices à partir d’un stock de cellules. Or, au cours du
développement embryonnaire, ces processus cellulaires de prolifération, spécification et différenciation
sont aussi impliqués dans l’organogenèse. Par conséquent, la dissection fine des mécanismes
génétiques de contrôle de la prolifération/spécification des cellules progénitrices des branchies au
cours de l’embryogenèse permettra de mieux comprendre les mécanismes génétiques de remodelage
des branchies adultes lors d’un stress osmotique. Dans ce contexte, le projet proposé ici a pour
objectif d’étudier in vivo la fonction de gènes candidats potentiellement impliqués dans la
prolifération/spécification des progéniteurs des cellules branchiales, au cours du développement
embryonnaire chez le médaka. L’étudiant réalisera des expériences de perte et de gain de fonction
grâce à la microinjection dans l’embryon de Morpholinos ou d’ARNm. Les conséquences sur la
prolifération/spécification des cellules et sur la fonction d’osmorégulation de l’embryon seront ensuite
étudiées.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
Microinjection dans l’embryon au stade 1-2 cellules, immuno-histochimie, hybridation in situ à
l’aide d’un automate d’hybridation (utilisé en routine au laboratoire), mesure de survie des
embryons/larves après transfert en eau de mer, contenus en ion…