UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Le tissu circulant Les différentes cellules sanguines Cellules sanguines Globules rouges = hématie = érythrocyte Anucléées Plaquettes = thrombocyte Lymphocytes Mononucléés Monocytes Nucléées Globules blancs = leucocytes Basophiles Polynucléaires Eosinophiles Neutrophiles Frottis sanguin : Étude de la morphologie : Coloration au May-Grunwald et Giemsa (MGG): - Bleu de méthylène • Définit le caractère basophile, • Colore en bleu les acides nucléiques (ADN et ARN). • Colore le cytoplasme et le noyau des cellules actives (jeunes ou cancéreuses par-ex) - Bleu azur • Définit le caractère azurophile • Colore en rouge pourpre les lysosomes - Eosine • Définit le caractère éosinophile ou acidophile • Colore en rose orangé ▪ Dans les polynucléaires éosinophiles ▪ Les granulations cytoplasmiques ▪ Cellules plus âgées ou moins actives - Autres • Caractère neutrophile pour la teinte beige Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny 1 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER NFS NUMERATION Numération Diminution Augmentation Globules rouges 4 – 6 x 1012 / L (4 à 6 millions / mm3) Anémie Diminution de [Hb] Polyglobulie Augmentation de [Hb] Plaquettes 150 – 400 x 109 / L (150 000 à 400 000 / mm3) Thrombopénie Thrombocytose Globules blancs 4 – 10 x 109 / L (4 000 à 10 000 / mm3) Leucopénie Hyperleucocytose Adulte Enfant : Formule inversée Diminution Augmentation 20 à 40 % = 2 à 4.109 / L 50 à 70 % Lymphopénie Lymphocytose 2 à 10 % = 0,2 à 1.109 / L 2 à 10 % Monocytopénie Monocytose 25 à 75 % = 2,5 à 7,5. 109 / L 20 à 40 % Neutropénie Eosinophiles 1à3%= 0,1 à 0,3.109 / L 0à3% Leucocytose à polynucléaires (infection à parasites) Basophiles 0à1%= < 0,1.109 / L 0% 0à1% FORMULE Leucocytes mononucléés Lymphocytes Monocytes Polynucléaires ou leucocytes granuleux Neutrophiles Cellules anormales 0% Hématocrite = 45% [Hb] = 12 à 17 g / 100mL Classification des anémies : Anémie régénérative Anémie arégénérative Augmentation des réticulocytes Pas d’augmentation des réticulocytes La cause est périphérique La cause est centrale (MO). Anémie microcytaire VGM < 80 μm3 Anémie macrocytaire VGM > 100 μm3 Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny Anémie normocytaire 80 < VGM < 100 μm3 2 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Sérologie = étude du sérum = sans anticoagulant Énumération des éléments = études des cellules = avec anticoagulants Groupes sanguins Groupe Ac présent dans le sérum A B AB O Anti-B Anti-A aucun Anti-A et Anti-B Ag présent sur Agglutination avec les les hématies sérum-test (test de Beth-Vincent) A Anti-A B Anti-B A et B Anti-A et Anti-B aucun pas d’agglutination Peut donner à (compatibilité) A et AB B et AB AB A, B, AB et O Contrôle ultime de compatibilité Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny 3 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Hématopoïèse - production continue et régulée des cellules sanguines. - myélopoïèse + lymphopoïèse Myélopoïèse Lymphopoïèse Erythropoïèse Hématies Lymphopoïèse B primaire Lymphopoïèse B secondaire LB naïfs Thrombopoïèse Plaquettes Granulopoïèse neutrophile PN neutrophiles Monocytes Lymphopoïèse T primaire LT naïfs Granulopoïèse éosinophile PN éosinophiles Lymphopoïèse T secondaire LT mémoire LTC Granulopoïèse basophile PN basophiles Mastocytes Lymphopoïèse NK L NK LB mémoire Plasmocytes Localisation de la 3ème semaine au 3ème mois du 2-3ème mois à la naissance du 5ème au 7ème mois à partir du 3ème mois Mésenchyme Hépatique splénique médullaire Organisation de la moelle rouge Dans espace interosseux de l’os spongieux (avec la moelle adipeuse) Composée du stroma et de cellules hématopoïétiques Stroma TC lâche et réticulé Capillaires sanguins sinusoïdes Cellules du stroma Cellules d’accompagnement = transitoires - Adipocytes uniloculaires - Macrophages - fibroblastes qui produisent les éléments de la - Lymphocytes, plasmocytes substance fondamentale (MEC), - ostéoblastes (construction osseuse) et ostéoclastes (résorption osseuse) Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny 4 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Méthodes d’étude Myélogramme Examen cytologique MO sous forme liquide Biopsie ostéo-médullaire Examen histologique MO sous forme solide Indications : - Thrombopénies - Éléments anormaux à la NFS - infections lors de la tuberculose, Leishmanioses Indications : - Aplasies - Myélofibrose - Lymphomes - Recherche de métastases Contre-indications : - sternotomie - irradiation - malformation Contre-indications : - Troubles de l’hémostase - Thrombopénie - Médicaments : antiagrégants plaquettaires … Pas de risque hémorragique Risque hémorragique ++ Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny 5 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Erythropoïèse Nb Ȼ Taille Basophilie Division Cellules souches multipotentes PROGENITEURS érythroblastiques BFU-E peut se développer sans EPO CFU-E : nécessite l’EPO Auto-renouvelables Peu nombreux non identifiables CD34+ PRECURSEURS érythroblastiques Pas d’auto-renouvèlement Nombreux : 8 à 30% des cellules médullaires Identifiables morphologiquement CD34 – Proérythroblaste 1 Erythroblaste basophile I et II 2 Erythroblaste polychromatophile I et II 8 Erythroblaste acidophile 16 Réticulocyte Perte du noyau 16 Hématie Perte des organites 16 SANG Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny 6 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Thrombopoïèse Cellules souches myéloïdes multipotentes Progéniteurs CFU-MK Mégacaryoblaste Mégacaryocyte basophile Précurseurs Endomitoses Granulations Mégacaryocyte granuleux Mégacaryocyte thrombocytogène Fragmentation Plaquettes Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny 1 à 3 µm 7 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Granulopoïèse Ȼ souche pluripotente CFU-GM Monoblaste Myéloblaste Promonocyte Promyélocyte CFU-Eo Myéloblaste Précurseur mastocytaire Myéloblaste Promyélocyte Promyélocyte Myélocyte Eo Myélocyte B Métamyélocyte N Métamyélocyte Eo Métamyélocyte B PNN PNE Myélocyte N Monocyte CFU-B Progéniteurs CFU Précurseurs Myéloblaste Mastocyte PNB - Taille - Rapport nucléocytoplasmique Différenciés Granulations Iaires Promyélocyte Divisions Myélocyte Granulations IIaires Métamyélocyte Maturation Cellule mature Polynucléaire Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny 8 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Lymphocytes LB 10 à 20 % LT 70 à 80 % NK 10 à 15 % Récepteur Ig de surface = BCR Ag de surface CD19, CD20, CD21 TCR - αβ (95%) - γδ (5%) CD2, CD3, CD5, CD7 Pas de récepteur à l’Ag spécifique car cytotoxiques naturellement Récepteur KAR, KIR CD2 (comme les LT), CD7+, CD56+ CD3-, CD4-, CD8- Sous catégories : - CD4+ : LT auxiliaire - CD8+ : LT cytotoxique Structure des immunoglobulines En surf - région variable V (extrémité N-terminale) qui est le site de liaison à l’antigène, - région constante C (extrémité Cterminale) insérée dans la membrane plasmique 2 types de chaines légères : - chaine légère λ (lambda) codée par un gène présent sur le chromosome 22 - chaine légère κ (kappa) codé par un gène situé sur le chromosome 2 Le gène codant la chaine lourde H est situé sur le chromosome 14 Réarrangement des gènes des immunoglobulines Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny 9 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Lymphopoïèse primaire B, T et NK Lymphopoïèse primaire T. Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny 10 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Réarrangement des gènes des TCR Lymphopoïèse primaire NK Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny 11 UE2 HISTOLOGIE Christine BOISSIER Lymphopoïèse B Lymphopoïèse Iaire Indépendante de l’Ag MO Cellule souche lymphoïde Lymphoblaste pro-B CD34+ CD38+ CD10+ Lymphoblaste pré-B CD34- CD38+ CD10+ réarrangement VDJ (H) LB immature CD34- CD38- CD10CD19+ CD20+ CD21+ réarrangement VJ (L) LB naïf R = IgM SANG Lymphopoïèse IIaire Dépendante de l’Ag Organes lymphoïdes IIaires follicules Iaires Pré-plasmocyte Organes lymphoïdes IIaires follicules IIaires Immunoblaste Centroblaste Hypermutation somatique Centrocyte Commutation isotypique Lymphoplasmocyte Plasmocyte à IgM plasmocyte à IgM, IgA ou IgE LB mémoire zone marginale Ac Réponse Iaire Médical Rennes 83 bd Maréchal de Lattre de Tassigny Réponse IIaire 12
