Assessment of ova collection with or without centrifugation after ovarian fr

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É valuation de la collecte d'ovules avec ou sans centrifugation apr è s le d é coupage
des ovaires pour la f é condation in vitro de sp é cimens d'abattoir de brebis Awassi
irakiennes.
Article dans Iraqi Journal of Veterinary Sciences - Octobre 2022
DOI: 10.33899/IJVS.2022.132707.2122
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2 auteurs, dont :
U. D. Université
Naoman de Mossoul
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Revue irakienne des sciences vétérinaires, Vol. 36, No. 4, 2022
(967-972)
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Évaluation de la collecte d'ovules avec ou sans centrifugation après le
découpage des ovaires pour la fécondation in vitro de spécimens d'abattoir
de brebis Awassi irakiennes.
F.F. Mustafa et U.T. Naoman
Département de chirurgie et de thériogénologie, Collège de médecine vétérinaire, Université de Mossoul, Mossoul, Irak
Informations sur l'article Résumé
Historique de l'article :
Reçu le 10 janvier 2022
Accepté le 26 juin 2022
Disponible en ligne le 4 septembre
2022
Cette étude vise à déterminer la méthode la plus appropriée pour la collecte d'ovocytes
en fonction de leur qualité et de leur quantité par tranchage avec ou sans centrifugation et
à tester sa capacité à produire des embryons in vitro (IVP). L'ovule a été prélevé dans la
salle d'insémination artificielle.
Laboratoire, Collège de médecine vétérinaire, Université de Mossoul, ville de Mossoul entre
Mots-clés :
Tranch
er les
ORC
Oocyte
Awassi
Correspondance :
F.F. Mustafa
[e-mail]
1/9/2020 au 1/11/2020. Au total, vingt femelles dont les organes génitaux ont été abattus
dans un abattoir local ont été collectées. La fécondation in vitro a été réalisée selon les
protocoles d'un laboratoire privé (laboratoire Soran lié à l'hôpital privé Soran pour les
maladies de la fertilité et le transfert d'embryons) dans la ville d'Irbil/Irak. Les résultats de
l'étude ne montrent pas de changements significatifs entre les deux méthodes dans
l'extraction des ovocytes de grade A. Cependant, la méthode de tranchage, qui était
33,60% de la récupération des ovules que la centrifugation techniques ORC 22,73%, la
méthode ORCs en présence de Grade C ovocyte plus élevé que la méthode ORCs qui
étaient 29,09 et 20,00%, respectivement aussi les résultats de la fécondation in vitro
montrent que la méthode de tranchage produit embryon en pourcentage élevé 45,4% que
la méthode ORCs 25,0%. Nous pouvons conclure que la meilleure méthode de collecte
d'ovocytes était la méthode de tranchage et que cette méthode aboutit à la meilleure
production d'embryons lors de la fécondation in vitro par rapport à la méthode ORCs.
DOI : 10.33899/IJVS.2022.132707.2122, ©Auteurs, 2022, Collège de médecine vétérinaire, Université de Mossoul.
Il s'agit d'un article en libre accès sous licence CC BY 4.0 (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).
Introduction
L'insémination artificielle a été la première grande
biotechnologie utilisée pour améliorer la reproduction et la
génétique des animaux d'élevage, et elle a ouvert la voie à
des innovations ultérieures telles que la cryoconservation,
le sexage des spermatozoïdes, la gestion du cycle œstral et
la synchronisation des ovules, la récolte d'embryons et le
clonage (1,2). Les ovocytes générés à partir d'ovaires
d'abattoirs constituent une source peu coûteuse de gamètes
animaux qui peuvent être utilisés pour développer des
embryons à grande échelle (3). Lorsque les gamètes
animaux ne sont pas disponibles, par exemple lorsque des
animaux d'élevage génétiquement importants ou des
espèces sauvages menacées meurent soudainement, il est vital
d'avoir recours à l'utilisation post mortem des ovocytes (4).
Revue irakienne des sciences
vétérinaires
www.vetmedmosul.com

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des perturbations physiologiques telles que des
anomalies de la voie génitale (5), le moment de
l'ovulation (6), des questions de santé publique (7), qui
représentent un autre type de défis en matière de
collecte de gamètes (8,9). Le prélèvement d'ovules
(OPU) ou la collecte d'ovules chez les ovins a été
réalisé de différentes manières, bien que le tranchage
soit l'approche la plus efficace pour la collecte
d'ovocytes à partir d'échantillons d'abattoir (10).
Plusieurs facteurs influencent l'estimation des ovules
collectés, notamment les quantités d'ovocytes, leur
qualité, le temps écoulé après l'abattage, la présence du
corps jaune CL et l'indice de maturation in vitro (IVI).
Des recherches antérieures ont montré que la procédure
de tranchage produit plus d'ovocytes de meilleure
qualité que les autres méthodes (11). État de fertilité de
l'animal, stimulation par des gonadotrophines
exogènes, matériel de collecte, milieux de culture pour
la collecte et la maturation pendant la manipulation in
vitro, et additifs aux milieux de manipulation.

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En conséquence, certains chercheurs pensent que la
centrifugation après le tranchage permet d'obtenir des
ovules de meilleure qualité avec un taux efficace de clivage
et de développement des blastocystes, alors qu'aucune
différence n'a été enregistrée en ce qui concerne le taux de
reprise méiotique (14). Un autre chercheur qui a soutenu
cette notion suggère que la centrifugation après le tranchage
lors de la collecte d'ovules de brebis en contre-saison donne
les meilleurs résultats pour la collecte d'ovules (15).
L'objectif de cette étude est de déterminer la méthode la
plus appropriée pour la collecte d'ovocytes en fonction de
leur qualité et de leur quantité par la méthode du tranchage
avec ou sans centrifugation et de tester son aptitude à la
production d'embryons in vitro (PIV).
Matériels et méthodes
Lieu de l'étude
L'ovule a été collecté et traité dans le laboratoire
d'insémination artificielle, Collège de médecine vétérinaire,
Université de Mossoul, ville de Mossoul (les coordonnées
de la ville s'étendent entre 2°36′ de longitude et 43°7′ de
latitude) entre le 1/9/2020 et le 1/11/2020, Les organes
génitaux des brebis abattues dans un abattoir local ont été
collectés dans les deux heures suivant l'abattage, les
échantillons ont été lavés avec une solution saline normale
et des antibiotiques et transférés dans une boîte réfrigérée.
La fécondation in vitro a été réalisée dans la ville
d'Irbil/Irak, conformément aux directives d'un laboratoire
privé (laboratoire Soran de l'hôpital privé Soran pour les
maladies de la fertilité et le transfert d'embryons).
Prélèvement d'ovocytes
Des ciseaux propres ayant été rincés plusieurs fois avec
de l'eau distillée puis de la solution saline normale ont été
utilisés pour retirer fermement et doucement les
échantillons ovariens des tissus environnants, comme décrit
dans Abdul hafedh (15). Water puis avec une solution
saline normale ont été utilisés pour retirer fermement et en
douceur les échantillons ovariens des tissus environnants,
comme décrit dans Abdul hafedh (15). Avant le traitement,
les échantillons ont été séparés en deux séries de 20 ovaires,
avec un processus de collecte d'ovocytes effectué dans des
circonstances aseptiques dans un Becker contenant une
solution saline de tampon phosphate (PBS) avec une
solution antibiotique pendant 5-10 minutes à température
ambiante (RT). L'opération a été réalisée dans des
conditions aseptiques, sous une hotte bien stérilisée, afin
d'éviter la pollution de l'air ou d'autres environnements
pollués qui auraient pu influencer les résultats finaux. La
procédure suivante a été utilisée pour récupérer les
ovocytes.
Tranchage des ovaires pour le prélèvement d'ovocytes
L'échantillon d'ovaire a été nettoyé avec de l'eau
distillée et une solution saline normale avant d'être
suspendu dans un milieu de Becker contenant du PBS avec des
traitements antifongiques et antibiotiques à température
ambiante. Chaque ovaire a été saisi ou arraché avec une pince
artérielle légèrement au-dessus de la préparation de la solution
de Becker. Les ovaires enlevés sont coupés plusieurs fois,
principalement au-dessus des follicules, pour inclure les
ovocytes dans le liquide folliculaire,