OUTILS DE GENIE GENETIQUE - 5

1-2- Endonucléases
A clivages non spécifiques
Ces enzymes sont capables de rompre des
liaisons phosphodiesters internes
- La DNase extraite du pancréas
Coupe préférentiellement après une base
pyrimidique
-La nucléase S1
Isolée d’un champignon, Aspergillus oryzae
Dégrade seulement les acides nucléiques
monocaténaires

A clivages non spécifiques
Enzymes de restriction
Molécules extraites à partir de microorganismes
(généralement des bactéries) et qui coupent les
liaisons phosphodiesters au niveau des acides
nucléiques

Enzymes de restriction
–Fabriquées par les bactéries
–Protègent les bactéries contre l’invasion par de l’ADN
étranger qu’elles coupent en petits morceaux
–Reconnaissent des séquences spécifiques de 4 à 8
nucléotides
–Coupent l’ADN sur ces sites définis (sites de restriction)
–Créent des bouts qui sont complémentaires
–La taille des fragments d’ADN produits dépend de la
distribution des sites de restriction

Sites de restrictions ?
Sites spécifiques de nature palindromique
La lecture des deux brins complémentaires
dans des sens opposés donne la même
séquence
5’ ATGCTAGCTAGCAT 3’
3’ TACGATCGATCGTA 5’

Les enzymes de restriction peuvent couper en faisant des
extrémités franches (même taille d'ADN sur chaque brin), ou
des extrémités cohésives (5' sortantes, ou 3' sortantes)