Amborella trichopoda - Graines Conference 2017

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Amborella trichopoda
La plus
vieille plante à fleurs de la
planète est néo-calédonienne
Evolution de familles de protéines de
graines chez Amborella trichopoda:
globulines 11S et protéases vacuolaires
(VPE)
Dominique Job
UMR CNRS/ Bayer CropScience - Lyon
Collaborations
Université de la Nouvelle-Calédonie
IJPB – INRA Versailles
IRD – Montpellier
RDP – CNRS/INRA/ENSL - Lyon
Pen State University - USA
Eudicots
Monocots
Amborella
Gymnosperms
Ferns
Mosses
Réseau'français'de'biologie'des'graines'–'28'octobre'2015'
Evolution de familles de protéines de
graines chez Amborella trichopoda:
globulines 11S et protéases vacuolaires
(VPE)
Dominique Job
UMR CNRS/ Bayer CropScience - Lyon
5 mm
Amborella trichopoda
Collaborations
Université de la Nouvelle-Calédonie
IJPB – INRA Versailles
IRD – Montpellier
RDP – CNRS/INRA/ENSL - Lyon
Pen State University - USA
Eudicots
Monocots
Amborella
Gymnosperms
Ferns
Mosses
Réseau'français'de'biologie'des'graines'–'28'octobre'2015'
Amborella trichopoda :
caractères ancestraux
• 
• 
• 
• 
• 
• 
• 
• 
Amborellaceae : famille sœur de toutes les
angiospermes
1 seule genre, 1 seule espèce: Amborella
trichopoda
Absence de vaisseaux du xylème (trachéides)
Fleurs unisexuées
Pas de distinction entre sépales et pétales
Grain de pollen à un seul pore
Pollinisation insectes
Graine à petit embryon rudimentaire
Découverte en 1969 par
Henri Ernest BAILLON
du Muséum d’Histoire Naturel de Paris
Evolution des plantes à fleurs
Amborella Genome Project, 2013
Monocots
Basal
Angiosperms
140 MYA
Eudicots
L’ a n a l y s e d u g é n o m e
d’Amborella révèle
l’existence d’un événement
de duplication ancien. Ce
phénomène a été le moteur
de l’acquisition de
nouveaux gènes (fleurs,
réserves nutritives des
graines)
l'émergence et
l'immense succès
des angiospermes :
l’abominable
mystère de Darwin
Protéomique “shotgun” de l’embryon et de
Projets – Autres familles de protéines
l’albumen isolés de la graine d’Amborella
415 415
69 69
Protein
destination
andand
storage
Protein
destination
storage
Energy
& Metabolism
Energy
& Metabolism
CellCell
Sructure
Sructure
Embryon
EmbryonAlbumen
Albumen
Amborella Genome Project, 2013
Villegente et al., résultats non publiés
Villegente et al., résultats non publiés
Les globulines 11S de la graine d’Amborella
•  Protéines de réserve très
abondantes dans les graines
•  Présentes chez toutes les plantes
•  Structure très conservée
•  Très utilisées pour les études
phylogénétiques
proglobuline
A"
B"
-S-S-
globuline
VPE
A"
B"
-S-S-
NGLEET
assemblage dans les
corps protéiques
Amborella Genome Project, 2013
angiosperms
Trois
O u t protéines
o f 1 2 caractérisées
0 a n a l y z epar
d
as e
nq
au
l yesnec epsr, o tt éh oe m ti h
q rueee,
correspondant
trois globulins
gènes chez
Amborella à11S
Amborella.
position in between the
Parmi plus de 120 séquences
gymnosperms and the
analysées, l’étude phylogénétique
angiosperms, in excellent
révèle que les trois globulines 11S
a g r e e m e n t w i t h
d’Amborella se situent entre les
phylogenetic analyses at
gymnospermes et les
whole genome level
angiospermes, en excellent accord
avec des études précédentes
gymnosperms
Analyse
P
hylogenetic
aphylogénétique
nalysis of
A
m bglobulines
o r e l l a 11 S
des
globulins
11S d’Amborella
AAA68981.1_Pseudotsuga_menziesii
S30142_Pseudotsuga_menziesii
CAA44874.1_Picea_glauca
0.8 CAA77568.1_Pinus_strobus
CAA77569.1_Pinus_strobus
0.74CAA64786.1_Calocedrus_decurrens
0.2 CAA64787.1_Calocedrus_decurrens
0.91
0.98
CAA64790.1_Cryptomeria_japonica
CAA64791.1_Metasequoia_glyptostroboides
0.29
CAA64793.1_Metasequoia_glyptostroboides
0.9
0.99
0.8CAA64792.1_Metasequoia_glyptostroboides
0.51
CAA64789.1_Cryptomeria_japonica
0.31
CAA64788.1_Calocedrus_decurrens
CAA90641.1_Ginkgo_biloba
0.99
0.6
CAA53177.1_Ginkgo_biloba
CAA90642.1_Gnetum_gnemon
0.97
CAA90643.1_Welwitschia_mirabilis
CAA90640.1_Ephedra_gerardiana
0.89
XP_006857275.1_00067.7_Amborella_trichopoda
0.98
0.99
XP_006857279.1_00067.11_Amborella_trichopoda
XP_006857280.1_0067.12_Amborella_trichopoda
0.97
0.68
CAA64763.1_Dioscorea_caucasica
0.11
CAA64761.1_Asarum_europaeum
0.42
0.95
CAA57848.1_Magnolia_salicifolia
CAA64762.1_Asarum_europaeum
0.88
Q9XFM4.1_Fagopyrum_esculentum
AAL16994.1_Zea_mays
archaic
0.46
P14812.1_Avena_sativa
0.38
1
angiosperms
AAB27108.2_Triticum_aestivum
0.79
CAA33838.1_Oryza_sativa
0.94
AAF69015.1_Elaeis_guineensis
NP_199225.1_Arabidopsis_thaliana
0.74
0.99
AAA32988.1_Brassica_napus
0.89
P15456.2_Arabidopsis_thaliana
Q02498.1_Raphanus_sativus
1
0.95
AAX77383.1_Sinapis_alba
Q9ZWA9.1_Arabidopsis_thaliana
ABB77213.1_Actinidia_chinensis
0.98
AAO38859.1_Bertholletia_excelsa
0.88
0.91 AAS67036.1_Chenopodium_quinoa
AAS67037.1_Chenopodium_quinoa
0.026 0.92
CAA57633.1_Amaranthus_hypochondriacus
P19084.1_Helianthus_annuus
CAA55977.1_Glycine_max
1
CAA60533.1_Glycine_max
0.99
0.94
P16078.1_Vicia_faba
0.95
0.86
0.76 P05693.1_Pisum_sativum
CAA83674.1_Vicia_sativa
AAK15087.1_Sesamum_indicum
0.54
CAA57846.1_Magnolia_salicifolia
XP_002329472.1_Populus_trichocarpa
0.92
AFJ04523.1_Vernicia_fordii
0.820.077
AAB52963.1_Citrus_sinensis
P13744.1_Cucurbita_maxima
0.42
AAC61983.1_Coffea_arabica
0.86
ABK80755.1_Ficus_pumila
0.77
CAA55009.1_Prunus_dulcis
0.93
AAA33072.1_Gossypium_hirsutum
0.72 ABW86979.1_Carya_illinoinensis
0.31
AAW29810.1_Juglans_regia
AAL73404.1_Corylus_avellana
0.82 0.19 0.49
AAM93194.1_Castanea_crenata
0.99
CAA67879.1_Quercus_robur
CAR78996.1_Lotus_japonicus
0.44
Q9SMJ4.1_Cicer_arietinum
0.79
0.96
0.77 CAA38758.1_Vicia_faba
0.87
0.78 CAA10722.1_Pisum_sativum
0.85
0.74CAA83677.1_Vicia_sativa
CAA86824.1_Vicia_narbonensis
1
CAI83773.2_Lupinus_albus
AAG01363.1_Arachis_hypogaea
AAN76862.1_Anacardium_occidentale
0.9
XP_002524198.1_Ricinus_communis
1
0.08
0.98
0.3
Maturation of
des
proglobulines
d’Amborella
Processing
the
Amborella 11S
proglobulins
Amborella Genome Project, 2013
proglobulin
•  The
consensus
cutting (NG)
site est
is
Le
site coupure
consensus
c o n s e rpour
v e d deux
f o r des
t w oglobulines
of the
conservé
proteins
11SAmborella
d’Amborella
A"
globulin
VPE
B"
B"
-S-S-
-S-SNGLEET
assembly into PSV
VPE
Ambo 67.11!
Ambo 67.12!
Soybean!
Arabidopsis!
A"
A
Q
-
S
T
-
V
R
-
N
N
N
N
G
G
G
G
L
Y
V
L
E
E
E
E
E
E
E
E
L
R
N
T
Y
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I
I
C
C
C
C
N
N
T
S
V
A
M
A
K
R
K
R
!
!
!
!
Maturation of
des
proglobulines
d’Amborella
Processing
the
Amborella 11S
proglobulins
Amborella Genome Project, 2013
proglobulin
•  The
consensus
cutting (NG)
site est
is
Le
site coupure
consensus
c o n s e rpour
v e d deux
f o r des
t w oglobulines
of the
conservé
proteins
11SAmborella
d’Amborella
L•  a The
t r othird
i s i èAmborella
m e g l o bprotein
u l i n e does
11 S
not contain
the canonical
d’Amborella
ne contient
pas le NG
site
cutting site, but exhibits features
de coupure canoniqueAmbo
NG, mais
seen in 11S globulins 67.11!
from
montre
des variations
retrouvées
Ambo
67.12!
gymnosperms,
raising
question
cha
e zb o u
Gti n p
kg
bg
a Soybean!
e tf d
r ooc ebsi sl oi n
o
t hees
Arabidopsis!
proglobulin
by the VPE
globulines
11Sprecursor
de gymnospermes
Ginkgo!
Ambo 67.7!
Metasequoia
A"
globulin
B"
VPE
-S-S-
A"
B"
-S-S-
NGLEET
assembly into PSV
VPE
A i n s i l e s g l o b u l i n e s 11 S
A S V N G L E E L Y C N
-d ’ - bNo rGe lYl a E m
E oRn tEr eCn tN
Am
Q T R N G V E E N I C T
-caractéristiques
- - N G L E Eretrouvées
T I C S
V K
dA eRs
M K
R
àA la
!
!
!
!
-fois
- chez
- N Nles
V E
E F Y C S M et
R !
gymnospermes
A N V I G V G E R Y C N A K !
lesNangiospermes
P G? G L H Q F Y C N M R
Arabidopsis contient quatre formes de VPE
Amborella seulement deux
o 
o  Une
Une forme
forme spécifiquement
spécifiquement exprimée
exprimée dans
dans les
les graines
graines et
et
seulement
seulement responsable
responsable de
de la
la mobilisation
mobilisation des
des globulines
globulines 11S
11S
(forme
(forme beta)
beta)
o 
o  Deux
Deux formes
formes exprimées
exprimées dans
dans les
les tissus
tissus végétatifs
végétatifs en
en réponse
réponse
notamment
notamment aux
aux stress
stress biotiques
biotiques et
et abiotiques
abiotiques (formes
(formes alpha,
alpha,
gamma)
gamma) et
et une
une quatrième
quatrième forme
forme impliquée
impliquée dans
dans la
la mise
mise en
en place
place
de
de l’enveloppe
l’enveloppe de
de la
la graine
graine au
au cours
cours du
du développement
développement (forme
(forme
delta)
delta)
o  Notre analyse protéomique met en évidence la forme beta dans
les graines d’Amborella
o  L’analyse du génome d’Amborella montre l’existence d’une autre
forme de VPE, précurseur des formes alpha/gamma/delta
Poncet et al., 2015
Evolution des gènes codant les VPE
chez les plantes
Poncet et al., 2015
Conclusions
o  L’analyse de familles de protéines montre
qu’Amborella trichopoda présente des
caractéristiques moléculaires retrouvées chez les
gymnospermes et les angiospermes
o  Nos résultats suggèrent que l’apparition des
angiospermes est plus un évènement progressif
que soudain.
Projets
Projets––Autres
Autresfamilles
famillesde
deprotéines
protéines
Maturité vs immaturité de l’embryon
415
415
6969
Protein
Proteindestination
destinationand
andstorage
storage
Energy
Energy&&Metabolism
Metabolism
Cell
CellSructure
Sructure
Tolérance àà la
la dessiccation
dessiccation
Tolérance
de l’embryon
l’embryon ??
de
Embryon
Embryon Albumen
Albumen
Amborella Genome Project, 2013
Villegente et
et al.,
al., résultats
résultats non
non publiés
publiés
Villegente
Projets – Germination
Elle est très lente. Il faut attendre au moins 30 jours après
imbibition pour voir apparaître la plantule
Villegente et al., résultats non publiés
Levée de dormance ?
Poursuite de la maturation de l’embryon immature ?
Germination interne ?
Remerciements
Université de la Nouvelle-Calédonie
Matthieu Villegente
Bruno Fogliani
Valérie Sarramégna
IRD-Montpellier – UMR DIADE
Valérie Poncet
Alexandre de Kochko
Rémi Tournebize
CNRS/INRA/UCBL/ENSL – UMR RDP Charlie Scutt
Lyon
INRA/AgroParisTech – IJPB, Versailles Loïc Rajjou
Gwendal Cueff
Penn State University – USA
Joshua Der
Claude de Pamphilis
UMR CNRS/Bayer CropScience, Lyon
Claudette Job
Merci de votre attention
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