RAPPORT DE MISSION IFRG MEETING AND PDP WORKSHOP Date : du 01/09/15 au 04/09/2015 Lieu : Université Humboldt de Berlin IFRG and PDP Workshop - (Berlin- Allemagne) Rapport de mission: CONTEXTE Le congrès combiné IFRG-PDP (Incubation and Fertility research Group – Fundamental Physiology and Perinatal development in Poultry) a été organisé à Berlin cette année 2015 pour son 40e anniversaire. Ce workshop a été organisé dans le but d’apporter des réponses scientifiques aux problématiques qui se posent dans l’industrie et de permettre aux étudiants ainsi qu’aux chercheurs de présenter leurs travaux de recherche. Les discussions ont porté sur les températures d’incubation optimales, le développement des embryons dans l’œuf, le développement périnatal, mais aussi la résilience et la robustesse des poulets suite à un stress environnemental (température, transport, lumière, …). OBJECTIFS La participation au congrès IFRG-PDP était une opportunité intéressante de pouvoir présenter et discuter des premiers résultats de mes travaux de thèse - « Effect of cold incubation temperature and cold ambient temperature at start on performance, body temperature and health criteria in broiler chickens » - avec des spécialistes du sujet et réaliser un état de l’art sur les derniers résultats en lien avec mon sujet. DEROULEMENT Le congrès s’est déroulé sur 4 jours, du 1er septembre 2015 au 4 septembre 2015. Après l’enregistrement et les différentes présentations de bienvenue, la journée du mercredi 02 septembre a porté sur les problématiques liées à la nutrition et à la mortalité des embryons, la fertilité et le stockage des œufs ainsi que les programmes de température d’incubation et la période d’éclosion. Au cours des journées du jeudi 03 et vendredi 04 septembre, les présentations et discussions ont porté sur les programmes thermiques et lumineux au cours de l’incubation, l’influence de ces techniques sur la formation des os, le développement des pattes et le système hormonal. RESUMES 1. A.Weissmann - In Ovo sexing of laying hen hybrids using endocrine analysis of the allantoic fluid Prédire le sexe des poussins à moindre coût ! L’élimination des poussins surnuméraires ou non valorisés suite au sexage au couvoir ainsi que les mortalités relevées suite au transport des poussins des couvoirs vers les élevages entrainent des pertes économiques importantes et posent des questions de bien-être animal. L’équipe de A. Weissman a donc travaillé sur des méthodes permettant le sexage in ovo afin de distinguer les mâles des femelles avant l’éclosion. Des prélèvements de fluide allantoïque d’œufs de poule et l’analyse du système endocrinien sont réalisés à différents jour d’incubation (E7, E8, E9 ou E10). Le fluide allantoïque est prélevé à l’aide d’une seringue (positionné avec un angle de 45°). Des différences significatives de concentrations en testostérone, Estrone Sulfate (E1S) et 17β-estradiol sont observées entre embryon mâles et femelles. L’analyse du fluide allantoïque par ELISA permet de prédire avec une certitude de 83% à E9 et 98% à E10 le sexe des poussins. Ce laboratoire propose que cette méthode soit intégrée dans les procédés d’accouvage avec un coût estimé de l’ordre de 12 centimes d’euro/œuf. En attendant son application, une phase d’étude pilote est en cours. 2. M. Bakst - Impact of broilers egg storage on relative expression of selected Blastoderm Genes Les gènes en perpétuelle activité ? Les œufs sont généralement stockés dans des salles de conservation en dessous de 22°C (zéro physiologique) mais la durée du stockage des œufs peut limiter l’éclosabilité ou le développement de l’embryon. Le stockage agit comme un facteur de stress de l’embryon en modifiant les cellules du blastoderme. Le SPIDES (Short Periods of Incubation During Storage) est un programme qui consiste à chauffer les œufs pendant un temps court avant incubation. L’analyse de l’expression différentielle des gènes en fonction du stockage met en évidence des gènes associés au stress oxydatif, à l’apoptose et au métabolisme des acides gras. Ces résultats sont également conformes aux conclusions de Hamidu et al. (2011) qui dans sa publication a démontré que le zéro physiologique correspond à la cessation du développement de l’embryon en dessous de 22°C et non à la cessation de la traduction des protéines. A plus long terme il serait intéressant de développer une méthode pour prélever le blastoderme. 3. J.A. Hamidu Effects of different storage conditions on egg components and blastodermal quality and high environmental temperatures Le blastoderme une membrane indicative de la qualité des œufs? Le blastoderme se réduit (perte en eau) lorsque la durée du stockage augmente ce qui réduit l’éclosabilité et augmente la mortalité. Deux traitements à température fraîche (18°C) et ambiante (23-26°C) des œufs sur des durées de stockage différentes (0,4,7,10 et 14 jours) montrent après analyse du blastoderme qu’il y a diminution du poids de l’œuf lorsque la durée de stockage augmente : il y a diffusion de l’eau de l’albumen vers le jaune d’œuf ce qui se traduit par une augmentation du poids du jaune d’œuf lorsque la durée du stockage augmente. La qualité de l’albumen diminue lors du stockage au froid et la taille du blastoderme augmente en condition de température ambiante. Dans un environnement chaud, le blastoderme augmente au cours du temps avec une relation linéaire forte (R2=0.98) car l’embryon se développe graduellement. En conclusion, la qualité de l’œuf diminue avec l’augmentation de la température de stockage et la durée. 4. Zehava Uni – The nutritional and physiological role of the yolk membrane during incubation La membrane du jaune d’œuf, un tissu? Une des exigences les plus importantes pour le développement normal de l'embryon est la fourniture suffisante en éléments nutritifs. Le jaune d’œuf est une réserve de protéines, d’eau et de glucides. Le processus par lequel l’embryon digère et absorbe le jaune d’œuf et les nutriments de l’œuf est encore mal connu. La fonction de la membrane du jaune d’œuf à E15 est très similaire à celle d’un tissu : on peut y distinguer des vaisseaux sanguins, des villosités et des capillaires qui lui permettent de digérer et d’absorber les nutriments. Des résultats de d’analyse protéomique montrent qu’entre E13 et E19 il y a un pic de prolifération de cellules épithéliales endothermes. Des analyses d’expressions de gènes (Clustering Analysis) ont permis d’identifier des gènes spécifiques au foie codant pour les enzymes responsables de la digestion des acides gras et des protéines. À partir d’E19, il y a une réduction de l’expression des gènes de la membrane du jaune d’œuf. Entre E13 et E17 la couleur verte souvent observée du jaune d’œuf est le signe de la digestion des acides gras par la membrane du jaune d’œuf. La membrane du jaune d’œuf joue donc le rôle de plusieurs organes au cours des derniers jours d’incubation de l’œuf. 5. I.A.M. Van Roovert-reijrink - Effects of SPIDES and slow warming profile on hatchability of long stored eggs Vers la conservation longue durée des œufs ? Il existe trois méthodes de SPIDES pour réduire l’effet du stockage qui peuvent être réalisés à 3 moments différents : - dès la collecte des œufs, - en milieu de stockage, avec 3 augmentations de température durant un temps court qui diminuent la mortalité et entraine une éclosion précoce et l’amélioration de la qualité des poussins et - en fin de stockage (14 jours) juste avant l’incubation (warming profile). La température et la durée maximale ne doivent pas excéder 32°C et 13h de préchauffage, respectivement. Ces traitements permettent de rétablir l’éclosabilité même après 16 jours de stockage. Les 2 traitements réalisés en milieu et en fin de stockage peuvent être combinés selon la durée du stockage pour améliorer les résultats d’éclosabilité. 6. Poster Barbara Tzschentke - Improvement of functional traits and performance in broiler chickens by short-term temperature training in the hatchery L’acclimatation embryonnaire, une solution pour améliorer la robustesse des poulets de chair ? Pour améliorer la robustesse et la santé des poulets de chair à croissance rapide une modification du programme de température pendant l’incubation (+1°C/2hr/jour) est opérée durant les derniers jours avant éclosion. L’expérience réalisée sur des poulets de souche Ross 308 a démontré que cette méthode permet d’améliorer l’éclosabilité, le poids des poussins à l’éclosion, la qualité des poussins. Elle améliore le sexe-ratio en faveur des mâles et entraine sur 35 jours une amélioration de l’indice de consommation. Les poussins issus du traitement d’acclimatation présentent une diminution de la température de l’embryon associée à diminution de l’expression du neuropeptide Y dans l’hypothalamus en comparaison avec les témoins. Les animaux acclimatés présentent un rapport hétérophile/lymphocyte plus bas en comparés aux témoins ce qui confirme l’hypothèse que la disponibilité en énergie due à la diminution de température de l’embryon est utilisée pour l’adaptation et la réponse immunitaire face au stress environnemental. 7. Poster Mylène Da Sylva - Investigating the role of amniotic and chorioallantoic fluids in the protection of the chicken embryo Quelles sont les protéines présentes dans les fluides chorio-allantoïque at amniotique? L’œuf contient plusieurs protéines ainsi que des anticorps maternels présent dans le jaune d’œuf qui ne sont actifs qu’au moment de l’éclosion. L’objectif ici est de caractériser les composés des fluides chorio-allantoïque et amniotique (pH, osmolarité, viscosité, ..) et leur rôle dans la protection de l’embryon contre les microorganismes et les infections microbiennes par une étude protéomique. Il s’agit d’identifier les stades critiques de l’infection et de proposer des voies d’amélioration des défenses de l’œuf au cours de l’embryogenèse. Les premiers résultats obtenus par SDS-Page montrent les profils de protéines présentes dans ces fluides au cours du développement de l’embryon. L’analyse protéomique consécutive devrait renseigner sur les protéines majeures présentes dans l’œuf au cours des différents stades de développement. Conclusions Ma participation au congrès IFRG m’a permis d’acquérir de la bibliographie sur le développement et la physiologie chez le poulet mais surtout d’acquérir des éléments essentiels sur des programmes novateurs de changement de la température de conservation des œufs lors du stockage qui pourraient avoir un effet bénéfique sur l’éclosabilité des œufs chez le poulet.