Apoptose et Nécrose : Comparaison cellulaire et moléculaire Kératinocytes humains en apoptose traitées à la fluorescéïne concanavaline A Exposé Exposé BCME BCME Apoptose Apoptose & & Nécrose Nécrose Cellules apoptotiques HL-60 traitées à la camptothécine 26 26 Avril Avril 2001 2001 2 Causes et rôles 2 Mécanismes : - cellulaires - moléculaires 2 Techniques de mise en évidence Νεκροσ = mortification Αποπτοσ = chute des feuilles Exposé Exposé BCME BCME Apoptose Apoptose & & Nécrose Nécrose 26 26 Avril Avril 2001 2001 Les Causes Nécrose : apparaît après une lésion cellulaire chimique ou physique Phénomène accidentel Apoptose : processus actif intervenant à différents moments de la vie d’un organisme Evénement nécessaire programmé Exposé Exposé BCME BCME Apoptose Apoptose & & Nécrose Nécrose 26 26 Avril Avril 2001 2001 Rôles de l’apoptose 2 Au cours du développement embryonnaire : morphogénèse •• - sculpture de l’embryon - élimination des tissus n’ayant plus de fonction dans l’espèce - différenciation sexuelle - ouverture des orifices du tube digestif •• mise en place du système nerveux •• développement du système immunitaire Exposé Exposé BCME BCME Apoptose Apoptose & & Nécrose Nécrose 26 26 Avril Avril 2001 2001 Rôles de l’apoptose 2 Chez l’adulte : •• adaptation de la taille d’une population cellulaire •• renouvellement des cellules •• élimination des cellules devenues anormales Exposé Exposé BCME BCME Apoptose Apoptose & & Nécrose Nécrose 26 26 Avril Avril 2001 2001 Mécanismes cellulaires Nécrose • Gonflement des organites • Fragmentation aléatoire de la chromatine • Eclatement des membranes plasmiques • Phénomènes inflammatoires & propagation aux cellules voisines Explosion cellulaire Exposé Exposé BCME BCME Apoptose Apoptose & & Nécrose Nécrose Apoptose • Dégradation du cytosquelette • Clivage & condensation de la chromatine • Individualisation de corps apoptotiques • Phagocytose de ces corps sans inflammation Implosion cellulaire 26 26 Avril Avril 2001 2001 Mécanismes moléculaires Nécrose : endommagement des cellules par des conditions non physiologiques ou par des lésions t Activation de protéases et de nucléases Processus dégénératif sans régulation Apoptose : mort cellulaire programmée t Activation de familles de gènes : - Bcl-2 : inhibition de la mort cellulaire - ICE (Interleukin-1 Converting Enzyme) : protéases qui activent la machinerie d’autodestruction - p53 : gène suppresseur de tumeurs (contrôle ADN et induction apoptose) t Rôle majeur des mitochondries Processus complexe contrôlé Techniques de mise en évidence de la nécrose et de l’apoptose •• Mise en évidence des altérations morphologiques par marquage nucléaire •• Fragmentation de ll’ADN ’ADN / analyse par éélectrophorèse lectrophorèse •• Dosage de ll’activité ’activité des caspases •• Immunocytochimie appliqu ée aux prot éines appliquée protéines caract éristiques de ll’apoptose ’apoptose caractéristiques Exposé Exposé BCME BCME Apoptose Apoptose & & Nécrose Nécrose 26 26 Avril Avril 2001 2001 Exposé Exposé BCME BCME Apoptose Apoptose & & Nécrose Nécrose 26 26 Avril Avril 2001 2001