TITRE DU POSTER BIOLOGIE & SANTÉ 2011 Infections invasives à pneumocoque de l'enfance: un nouveau groupe de déficits immunitaires héréditaires Investigateur: Dr Capucine PICARD, laboratoire de génétique humaine des maladies infectieuses INSERM U980, Faculté Necker, Université Paris Descartes (Programme MRAR 2007, PNEUMOIPD) L’infection invasive à pneumocoque de l’enfant est elle un déficit immunitaire héréditaire ? Le pneumocoque est une bactérie dont le portage asymptomatique est fréquent chez l’enfant. Il est parfois responsable d’infections, le plus souvent bénignes (otites et pneumonies), plus rarement, il peut être la cause d'infection graves (méningites et septicémies). Cependant, seule une minorité des infections invasives à pneumocoque (IIP) de l’enfant sont expliquées par des facteurs de risque connus (déficit immunitaire héréditaire (DIH), fistule cérébro-méningée). Nous avons formulé l’hypothèse que les IIP témoignent, au moins chez une fraction des enfants, d’une prédisposition génétique mendélienne. Notre hypothèse de travail est renforcée par notre identification chez des enfants souffrant principalement d’IIP de défauts génétiques de l’immunité innée. Ce projet de recherche visait donc à identifier les bases moléculaires de la prédisposition aux IIP chez l’enfant pour mieux comprendre la physiopathologie de ces infections. Complement deficiencies Complement Spleen Asplenia IL1-R TLRs pneumococcus antibody CRP Phagocyte TIRs signalling pathway defects IL-1β β TNFα α IL-6 B cell defects Les résultats Nous avons recruté pour cette étude 149 patients ayant présenté une ou des IIP et 356 apparentés. Parmi ces patients, nous avons pu identifier 6 DIH déjà connus et caractérisés: 2 patients avec une agammaglobulinémie liée au chromosome X (maladie de Bruton), 2 patients avec un déficit complet récessif en C3, un patient avec un déficit complet récessif en C2 et un patient avec un déficit complet récessif en IRAK-4. Ces patients sont maintenant pris en charge et reçoivent un traitement spécifique à leur déficit. Nous poursuivons actuellement l’exploration fonctionnelle d’une trentaine de patients. Concernant l’identification de nouveaux défauts génétiques prédisposant à cette infection nous utilisons deux approches complémentaires : 1) Une approche par étude de liaison génétique par ‘homozygosity mapping’ dans les familles consanguines. Nous avons identifié 6 patients issus de familles consanguines. L’analyse de liaison dans ces familles est en cours. 2) Une approche par séquençage de l’exome (ensemble des régions codantes du génome). Le séquençage de l’exome a été réalisé chez les 5 premiers patients issus de familles consanguines et il est maintenant en cours chez 8 patients supplémentaires ayant eu des IIP récurrentes ou d’évolution fatale. Les premiers résultats de l’étude conjointe de l’analyse de liaison et de l’exome ont permis d’identifier chez une famille une mutation homozygote dans un gène candidat impliqué dans l’immunité innée. Des études fonctionnelles sont en cours pour valider le rôle causal de cette mutation. B Lymphocyte Les méthodes Nous avons inclus plus de 100 enfants avec IIP pour lesquels une drépanocytose, une infection par le VIH ou une fistule cérébro-méningée ont été exclues. Ces patients ont été ensuite explorés pour tous les DIH connus pour être associés à des IIP: asplénie, déficit en complément, déficit de l’immunité humorale et innée (figure). Enfin, les enfants avec IIP sans facteurs de risque identifiés, ont été inclus pour une analyse génétique étudiant l’ensemble des gènes du génome. Des échantillons de sang ont également été recueillis auprès des parents, frères et sœurs pour l'isolement de l'ADN pour réaliser cette étude. Le but ultime de cette stratégie est l'identification de nouveaux gènes ou de voies immunologiques impliqués dans les IIP. Conclusions En conclusion, les résultats préliminaires de notre étude sont très prometteurs, ils vont permettre de démontrer, auprès de la communauté pédiatrique, la nécessité d'explorer sur le plan immunologique et génétique tout enfant ayant présenté une IIP. Sur le versant génétique, nous allons poursuivre en 2011 l’analyse des différents exomes pour tenter d’identifier de nouveaux gènes de susceptibilité aux infections invasives au pneumocoque. Publications: 1- von Bernuth H, Picard C, Jin Z, et al. Pyogenic bacterial infections in humans with MyD88 deficiency.Science. 2008 Aug 1;321(5889):691-6. 2- Picard C, von Bernuth H, Ghandil P, et al. Clinical features and outcome of patients with IRAK-4 and MyD88 deficiency. Medicine (Baltimore). 2010 Nov;89(6):403-25. CONTACT : [email protected] 176