Téléphone : Mail : Directeur du Laboratoire ou de l’Unité :

Stage proposé par
Groupe de Recherche en Fertilité Humaine
EA 3694 Université Paul Sabatier Toulouse III
Téléphone : 05.67.77.10.41
Mail : [email protected]
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Pr Louis Bujan
Intitulé de l ‘équipe d’accueil :
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Pr Louis Bujan
Résumé du thème de recherche de l’équipe (une dizaine de lignes maximum)
Etude des effets d'agents exogènes sur la fonction de reproduction masculine et féminine (cancer et
procréation, environnement et reproduction, virus et procréation) et physiopathologie de l’infertilité.
L’équipe a développé depuis de nombreuses années l’étude des facteurs de risques pour la fertilité
masculine et l’étude de l’effet de facteurs exogènes sur la spermatogenèse. Ainsi plusieurs travaux
ont été menés sur l’effet de l’augmentation de la température testiculo-épididymaire sur la
spermatogenèse et la fertilité, sur les facteurs de risques du cancer du testicule et de la cryptorchidie
ainsi que sur les effets des traitements du cancer ou des traitements antirétroviraux sur la fonction de
reproduction masculine. Cette thématique a été récemment élargie à la fonction de reproduction
féminine notamment par le responsable du stage qui a initié plusieurs programmes de recherche sur
les perturbateurs endocriniens (PE et conditions de manipulation in vitro des gamètes et embryons :
financement ABM 15 k€ ; exposition féminine au BPA, réserve ovarienne et résultats en FIV/ICSI :
financement MENERS 550 k€ ; pour le présent projet : financement ABM 20 k€ + financement privé
12k€).
Titre du projet de stage :
Bisphénol A et activation des récepteurs membranaires aux estrogènes de l’embryon
préimplantatoire de mammifères.
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage:
Roger LEANDRI
Groupe de Recherche en Fertilité Humaine
330 Avenue de Grande Bretagne
Hôpital Paule de Viguier
31059 Toulouse cedex 9
Tel : 05.67.77.10.13
[email protected]
Projet de stage : (une vingtaine de lignes maximum)
Nous avons mis en évidence que certains consommables plastiques (appelés stripper) utilisés en
routine en Assistance Médicale à la Procréation (AMP) exposent les ovocytes et embryons humains à
du bisphénol A (BPA) à de faibles concentrations (0,5 ng/ml, Gatimel et al, Hum Reprod, 2016). Ce
contact ne dure que quelques dizaines de secondes mais se répète au cours des manipulations
successives des embryons et ce, en l’absence de toute protection par l’environnement maternel.
Le BPA est un xénoestrogène connu pour pouvoir exercer des effets dit non-génomiques rapides et
puissants par contact avec les formes membranaires des récepteurs aux estrogènes. Parmi elles, le
récepteur aux estrogènes couplé aux protéines G appelé GPER semble, compte tenu des données de
la littérature, être impliqué au niveau embryonnaire.
Le but de ce projet est de comparer différentes méthodes de manipulations embryonnaires : 1°) via
des stripper plastiques exposant à du BPA à 0,5 ng/ml ; 2°) via des strippers en verre (contrôle) ; 3°)
via des strippers en verre en présence de BPA à 0,5 ng/ml et 4°) via des strippers plastiques en
présence d’un antagoniste spécifique de GPER. Les conséquences de chaque type de manipulation
sur le développement embryonnaire (cinétique de développement, taux et qualité des blastocystes,
distribution cellulaire entre masse cellulaire interne et trophectoderme), sur l’expression génique
(analyse transcriptomique via une plateforme locale) et la méthylation de gènes clés seront analysées.
Le travail, basé sur une observation réalisée dans les pratiques de routines en AMP, cherche donc à
étudier la sensibilité de l’embryon de mammifères au BPA via l’implication de récepteurs
membranaires. Si cette sensibilité est retrouvée chez la souris, une recherche sur l’embryon humain
deviendra indispensable.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
- Manipulations et culture embryonnaire chez la souris,
- analyse de la répartition cellulaire entre trophectoderme et masse cellulaire interne au stade
blastocyte par techniques d’histochimie après perméabilisation sélective du trophectoderme
- analyse du niveau de méthylation de gènes cibles après bisulfitage/clonage/séquençage
- participation à l’étude transcriptomique des blastocystes sur une plateforme toulousaine
Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années :
1. Fajau-Prevot C, Le Gac YT, Chevreau C, Cohade C, Gatimel N, Parinaud J, Leandri R. Ovarian
Mucinous Cystadenoma After Ovarian Graft. Obstet Gynecol. 2017 May 5.
2. Cohade C., Fajau C., Gladieff L., Charitansky H., Gatimel N., Parinaud J., Leandri R. Follicular
growth but absence of oocyte and cumulus maturation during ovarian stimulation in the days
following surgical abortion: a case report. Gynecol Endoc, 2017 Apr 28:1-2.
3. Vabre P, Gatimel N, Moreau J, Gayrard V, Picard-Hagen N, Parinaud J, Leandri RD.
Environmental pollutants, a possible etiology for premature ovarian insufficiency: a narrative
review of animal and human data. Environ Health. 2017 Apr 7;16(1):37.
4. Gatimel N, Ladj M, Teston C, Lesourd F, Fajau C, Cohade C, Parinaud J, Léandri RD. How many
embryos should be transferred? A validated score to predict ongoing implantation rate. Eur J
Obstet Gynecol Reprod Biol. 2017 Mar 8;212:30-36.
5. Carré J, Gatimel N, Moreau J, Parinaud J, Leandri R. Influence of air quality on the results of in
vitro fertilization attempts: A retrospective study. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2016 Dec
14;210:116-122.
6. Gatimel N, Mansoux L, Moreau J, Parinaud J, Léandri RD. The continued existence of significant
disparities in the technical practices of sperm morphology assessment and the clinical
implications: results of a French questionnaire. Fertil Steril. 2016 Nov 22. pii: S00150282(16)62961-8.
7. Gatimel N, Lacroix MZ, Chanthavisouk S, Picard-Hagen N, Gayrard V, Parinaud J, Léandri RD.
Bisphenol A in culture media and plastic consumables used for ART.Hum Reprod. 2016
Jul;31(7):1436-44.
8. Bouillon C, Léandri R, Desch L, Ernst A, Bruno C, Cerf C, Chiron A, Souchay C, Burguet A, Jimenez
C, Sagot P, Fauque P. Does Embryo Culture Medium Influence the Health and Development of
Children Born after In Vitro Fertilization? PLoS One. 2016 Mar 23;11(3):e0150857.
9. Monraisin O, Chansel-Debordeaux L, Chiron A, Floret S, Cens S, Bourrinet S, Paulhac S, Jimenez
C, Parinaud J, Leandri R. Evaluation of intrauterine insemination practices: a 1-year prospective
study in seven French assisted reproduction technology centers. Fertil Steril. 2016
Jun;105(6):1589-93.
10. Ferreira M, Sanchez ET, Gatimel N, Fajau C, Lesourd F, Bujan L, Mieusset R, Parinaud J, Leandri
R. Parenthood and separation in couples 6 years after their first infertility consultation. Eur J
Obstet Gynecol Reprod Biol. 2016 Mar;198:7-11.
11. Gatimel N, Parinaud J, Leandri RD. Intracytoplasmic morphologically selected sperm injection
(IMSI) does not improve outcome in patients with two successive IVF-ICSI failures. J Assist
Reprod Genet. 2016 Mar;33(3):349-55.
12. Montagut M, Gatimel N, Bourdet-Loubère S, Daudin M, Bujan L, Mieusset R, Isus F, Parinaud J,
Leandri R. Sperm freezing to address the risk of azoospermia on the day of ICSI. Hum Reprod.
2015 Nov;30(11):2486-92.
13. Gatimel N, Léandri RD, Marino L, Esquerre-Lamare C, Parinaud J. Sperm vacuoles cannot help to
differentiate fertile men from infertile men with normal sperm parameter values. Hum Reprod.
2014 Nov;29(11):2359-67.
14. Leandri RD, Gachet A, Pfeffer J, Celebi C, Rives N, Carre-Pigeon F, Kulski O, Mitchell V, Parinaud
J. Is intracytoplasmic morphologically selected sperm injection (IMSI) beneficial in the first ART
cycle? a multicentric randomized controlled trial. Andrology. 2013 Sep;1(5):692-7.
15. Fauque P, Audureau E, Leandri R, Delaroche L, Assouline S, Epelboin S, Jouannet P, Patrat C. Is
the nuclear status of an embryo an independent factor to predict its ability to develop to term?
Fertil Steril. 2013 Apr;99(5):1299-1304.
16. Gatimel N, Leandri R, Parinaud J. Sperm vacuoles are not modified by freezing--thawing
procedures. Reprod Biomed Online. 2013 Mar;26(3):240-6.
17. Gatimel N, Léandri RD, Foliguet B, Bujan L, Parinaud J. Sperm cephalic vacuoles: new arguments
for their non acrosomal origin in two cases of total globozoospermia. Andrology. 2013
Jan;1(1):52-6.
Autres informations:
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez
le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement
- Mohammed Abdelhamid : resp Pr Louis Bujan, ED BSB Toulouse
- Thierry Almont : resp Pr Eric Huyghe, ED BSB Toulouse
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au cours des
six dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de l’étudiant, l’année
du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le devenir de l’étudiant.
- Margaux Tymen, 2015, Master Spécialité de M2 Recherche (Pr Roulier–Fabre, Paris) Dr
Léandri, travail en cours de publication
- Obeuf Emmanuelle, 2015, master biologie de la reproduction (Pr Pr Anne Duittoz, Tours)
- Jean Noêl Baka, 2014, M2 SID université Paul Sabatier, devenir : ingénieur entreprise
- Hautbergue Thaïs, 2013, master Toxicologie Environnement Santé (Pr Baeza, Paris) Dr
Safouane Hamdi, devenir : étudiante en thèse à l’INRA
- Nicolas Gatimel :
Master Spécialité de M2 Recherche (Pr R Habert) « Reproduction et Développement » :
2011, responsable : Dr R. Leandri.
Thèse de doctorat (2015-2016, ED BSB) : responsable : Dr R. Leandri ; Pr J. Parianud
Devenir : 5 publications en 1er auteur issues de cette thématique dans des revues de rang A
ou B, nomination MCU-PH prévue en 2018.
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin
ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
Tous profils
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
Oui notamment en vue d’une étude sur l’embryon humain