`extraction de l`ADN

Protocole d’extraction de l’ADN
Principe de l’extraction :
Il s’agit d’extraire et de colorer l’ADN à partir de différents échantillons (Kiwis, bananes,
oignons, pomme, saumon, talc….).
On utilise des produits aux propriétés spécifiques :
- Les grains de sel ont un rôle abrasif : ils permettent de déchirer les tissus.
- Le liquide vaisselle désorganise les membranes.
- L’éthanol réfrigéré et le sodium du sel provoquent la précipitation des molécules
d’ADN.
- Le vert de méthyle est un colorant spécifique de l’ADN : il colore en vert la molécule
d’ADN.
Matériel :
Scalpel
N.Lepouder, Protocole du TP : Extraction de L’ADN, niveau 3ème et seconde, 8 octobre 2009
Réalisation :
 Couper l’échantillon végétal en petits morceaux à l’aide du scalpel et broyer dans un
mixeur avec une cuillère à soupe de gros sel et la même quantité de liquide vaisselle
(pour une banane ou 2 kiwis).
 Verser le broyat dans un bécher et ajouter de l’eau distillée. Mélanger en s’aidant de
l’agitateur jusqu’à ce que le mélange ait une consistance liquide.
 Placer le filtre dans l’entonnoir et poser sur le deuxième bécher.
 Verser le mélange dans le filtre puis recueillir le filtrat dans le tube à essai.
 Ajouter au filtrat deux volumes d’éthanol réfrigéré en versant le long de la paroi du
tube à essai doucement. Un précipité contenant de l’ADN se forme.
 Ajouter quelques gouttes de vert de méthyle et observer après quelques minutes.
Remarque : Ne pas oublier de laver la verrerie utilisée à la fin du TP.
N.Lepouder, Protocole du TP : Extraction de L’ADN, niveau 3ème et seconde, 8 octobre 2009