ECOLE DOCTORALE "Médicament, Toxicologie, Chimie, Imageries" UNIVERSITE SORBONNE PARIS CITE Proposition de sujet de thèse à l’appui d’une demande de contrat doctoral 2017-2018 Version word sans signature pour le site et version papier signée. Renseignements relatifs à l’Unité de Recherche : Nom et appartenance : UTCBS – Unité de Technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé Nom et prénom du Directeur : Daniel SCHERMAN Téléphone : 01 53 73 95 59 courriel : [email protected] Signature obligatoire :(et avis éventuel) : Renseignements relatifs à l’Equipe d’Accueil (EAD) : Nom de l’Equipe d’Accueil : Thérapie Génique – Pharmacologie Génétique et Moléculaire Nom et prénom du responsable : Virginie ESCRIOU Qualité du responsable : DR CNRS – Responsable d’équipe Téléphone : 01 53 73 95 75 courriel : [email protected] Signature obligatoire: Renseignements relatifs au sujet de thèse : Nom et prénom du Directeur de thèse (HDR) : Virginie ESCRIOU Qualité : DR CNRS Téléphone : 01 53 73 95 75 courriel : [email protected] Signature obligatoire : Titre du sujet proposé : Stratégies de vectorisation de petits ARN interférents pour le traitement de la fibrose hépatique Mots clés disciplinaires * : Biothérapies, Pharmacologie, Vectorisation Nombre de thèses encadrées ou co-encadrées : 1 Préciser le secteur disciplinaire (402, 510, 530)* principal et éventuellement secondaire : 530 Résumé succinct (5 lignes maximum) : Ce projet vise à développer de nouveaux nanovecteurs de siRNA pour la thérapie de la fibrose hépatique. La fibrose hépatique peut évoluer en cirrhose ou en hépatocarcinome et n’a pas de traitement standard à ce jour. Les nanovecteurs de siRNA que nous développerons cibleront spécifiquement les cellules stellaires du foie, principales responsables de l’établissement de la fibrose. Ce projet ambitieux à l'interface entre la chimie, la biologie et la médecine permettra la découverte de nouvelles cibles thérapeutiques pour la fibrose hépatique. Demande dans le cadre d’un projet ANR (donner toutes précisions utiles) : 402 : chimie organique,minérale, industrielle 510 : aspects cellulaires et moléculaires de la biologie 530 : biomolécules, pharmacologie, thérapeutique ECOLE DOCTORALE "Médicament, Toxicologie, Chimie, Imageries" - UNIVERSITE PARIS DESCARTES Proposition de sujet de thèse à l’appui d’une demande de contrat doctoral 20162017 (l'ensemble de cette fiche ne doit pas dépasser 1 page) Nom, prénom du directeur de l'unité de recherche : Daniel SCHERMAN Numéro de l'unité de recherche (et établissement de rattachement) : UMR 8258 CNRS - UMR-S 1022 Inserm – Paris 5 – Chimie ParisTech Nom, prénom du responsable de l'équipe d'accueil (EAD) : Virginie ESCRIOU Nom, prénom du directeur de thèse : Virginie ESCRIOU Titre du sujet de thèse proposé : Stratégies de vectorisation de petits ARN interférents pour le traitement de la fibrose hépatique Contenu scientifique du programme de la thèse Contexte : La stéato-hépatite non alcoolique (NASH) est une hépatopathie chronique dont la prévalence augmente dans le monde, et qui toucherait près de 2 à 5% des individus dans les pays industrialisés. Elle touche à la fois des patients présentant un syndrome métabolique associé à une obésité et des patients dont l’indice de masse corporelle est normal. Elle conduit progressivement à une fibrose hépatique, pouvant aboutir à une cirrhose voire à un carcinome hépatocellulaire. Le diagnostic est souvent tardif, et aucun traitement contre la fibrose hépatique n’existe. Il est nécessaire et urgent de proposer de nouvelles stratégies thérapeutiques. Dans cette optique les petits ARN interférents (siRNA) présentent un intérêt majeur. Depuis la découverte de l’ARN interférence en 1998, ils se sont imposés comme un outil indiscutable pour éteindre un gène à condition de les associer à un vecteur d’administration. La fibrose hépatique correspond à une accumulation excessive de protéines de la matrice extracellulaire due à un déséquilibre entre synthèse et dégradation. Les cellules stellaires sont particulièrement impliquées dans la réponse fibrogénique. En effet, les lésions et l’inflammation chroniques du foie activent ces cellules qui se dédifférencient en myofibroblastes, majoritairement responsables de la synthèse d’un tissu cicatrisant. Elles représentent donc une cible de choix pour le traitement de la fibrose hépatique. Projet : La première étape de ce projet sera de concevoir des vecteurs de siRNA capables d’atteindre et de cibler les cellules stellaires hépatiques afin d’inhiber spécifiquement les cibles protéiques choisies et exprimées par ces cellules. L’équipe d’accueil a conçu de nouvelles formulations de siRNA, très efficaces in vivo sur différents modèles de maladies. Ces nanoparticules seront modifiées par greffage d’un ligand spécifique des cellules stellaires (comme le mannose-6-phosphate). Afin d’augmenter leur temps de circulation le greffage d’un polyéthylène glycol en surface de la particule sera réalisé. Les tests de transfections seront réalisés sur des cellules primaires au laboratoire à partir de foie de souris et sur des lignées murines et humaines commerciales (HSC-T6 et LX2). Une localisation préférentielle dans les cellules stellaires in vivo sera étudiée grâce à un modèle de dissociation enzymatique in situ du foie (déjà établi au laboratoire), suivie par analyse en cytométrie. Les cibles thérapeutiques visées par les siRNA seront des protéines impliquées dans la fibrogénèse comme Col1A1 ou TGF et également les inhibiteurs d’apoptose comme bcl2. La deuxième étape du projet de thèse consistera à mettre en place un essai thérapeutique pré-clinique pour les cibles choisies. Pour cela, nous travaillerons sur le modèle murin de fibrose hépatique métabolique mis en place récemment au laboratoire. Il s’agit d’un modèle représentatif des mécanismes physiopathologiques observés chez le patient atteint de NASH. L’efficacité des vecteurs sera évaluée par suivi des marqueurs conventionnels d’inflammation et de fibrose mais d’autres méthodes sont aussi envisagées comme la caractérisation morphologique des fibres de collagène sur coupes de foie en imagerie multiphonique de s de harmonique (Collab service Imagerie Institut Pasteur) ou l’imagerie non invasive de la fibrose hépatique par Elastographie par Résonance magnétique (Collab CNRS-CREATIS UMR5220, Inserm U1206). La toxicité induite par le traitement sera également évaluée. Les compétences de l’équipe d’accueil, allant de la conception de vecteurs d’acide nucléique jusqu’à l’évaluation de ces vecteurs sur des modèles animaux, permettront la réalisation de ce projet qui s’inscrit dans le projet global du laboratoire. Ce projet permettra à terme de déboucher sur de nouveaux candidats thérapeutiques avec un possible transfert vers des essais cliniques.