Milieu de Moeller LDC

Milieu de Moeller LDC- ADH – ODC
I.
Principe
La recherche des décarboxylases (LDC, ODC) et de l’arginine-dihydrolase (ADH) est d’une grande
importance taxonomique pour la différenciation des Entérobactéries et autres bacilles Gram -.
Les deux types d’enzymes ont été rassemblés en un test parce que leurs techniques de recherche
sont identiques.
 Décarboxylases :
-Lysine-décarboxylase (LDC)
-Ornithine-décarboxylase (ODC)
 Dihydrolase :
-Arginine-dihydrolase (ADH)
II.
Composition
Pour 1 L d’eau distillée :
 Extrait de levure : 3 g.
 L-ornithine : 5 g.
 L-arginine : 5 g.
 L-lysine : 5 g.
 Glucose : 1 g.
 Bromocrésol pourpre : 0.16 mg.
 Ethanol : 1 mL.
 Chlorure de sodium : 5 g.
 pH : 6.8
Ce milieu est présenté en petits tubes fins ce qui favorise l’anaérobiose.
On utilise un milieu glucosé car les bactéries fermentent le glucose, acidifie dans un premier temps le
milieu. Celui-ci restera acide si la bactérie ne possède pas l’enzyme, ou deviendra alcalin si la bactérie
possède l’enzyme recherché.
III.
Mode opératoire
Ensemencer chacun des trois tubes avec deux gouttes d’une suspension bactérienne dense.
Recouvrir la surface des milieux avec de la paraffine liquide pour satisfaire la condition d’anaérobie.
Incuber a 37°C pendant 24 heures.
IV.
Lecture
Tube A : Si le milieu est violet et trouble, les bactéries se sont développées. Elles ont acidifié le milieu
à partir du glucose puis réalcalinisé en utilisant l’acide aminé : Résultat +.
Tube B : Si le milieu est jaune et trouble, les bactéries se sont développées. Elles ont acidifié le milieu
a partir du glucose et ne l’ont pas réalcalinisé car elles ne possèdent pas l’enzyme : Résultats -.
V.
Causes d’erreur
Culture insuffisante ou pas de culture : vérifier la présence d’un trouble.
Bactérie glucose – (rare).
Bactérie aérobie stricte.