Comment fabriquer une souris transgénique ? Spermatozoïde Ovule Prélèvement des gamètes Fécondation in vitro1 Oeuf Injection du gène Culture in vitro de l'embryon Implantation d'une dizaine d’embryons dans l'oviducte d'une souris femelle Naissance de souris transgéniques PCR2 ou Souris transgénique (T) x Southern blot3 Souris souche sauvage (+) Test des souris transgéniques (établissement du génotype) Stabilisation de la lignée de souris transgéniques Lignée de souris transgéniques stable On a ainsi transféré un gène humain chez une souris : cette technique est appelée transgenèse additionnelle. Source : D'après : F.PINET, D.BABUTY, L.CARRIER et coll., Biologie et pathologie du cœur et des vaisseaux, Médecine-Sciences Flammarion, 2002 1 Du latin verre, c'est-à-dire dans un tube à essai. La PCR est une technique permettant de repérer un segment particulier de l'ADN et de le recopier des millions de fois afin de le rendre visible. 3 Le Southern blot est une technique d'analyse de l'ADN. On découpe l'ADN en petits morceaux qu'on fait migrer dans un champ électrique (électrophorèse). Les charges électriques de chaque morceau étant différentes, ils migrent chacun à une vitesse différente. Si on fait migrer en même temps un témoin du gène recherché, on peut mettre en évidence la présence ou l'absence de ce gène dans le génôme testé. Dans notre exemple, le Southern blot permet de s'assurer que le gène transféré a bien été intégré dans le génome de l'individu. 2