Demande de photocopie
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Master de Sciences et Technologies Mention Biologie Intégrative et Physiologie Spécialité : Neurosciences Responsable : Professeur Régis LAMBERT Proposition de Stage M2 S4 NEUROSCIENCES Année Universitaire 2016-2017 1. Equipe d’Accueil de Master (EAM) : Intitulé et numéro de l’Unité : Institut de la Vision, UMR S968 Nom du Responsable de l’Unité : José-Alain SAHEL Nom du Responsable de l’Équipe : Jean Livet Intitulé de l’équipe d’accueil : Développement des circuits neuronaux Adresse : Institut de la Vision, 17 rue Moreau, 75012 Paris Nom du responsable de l’encadrement : Jean Livet et Karine Loulier Tél. : 01 53 46 25 18 Fax. : 01 53 46 26 00 E-mail : [email protected] 2. Titre du sujet : Potentialités individuelles des cellules souches neurales au cours du développement cérébral 3. Description du sujet : L’ensemble des neurones excitateurs du néocortex, appelés cellules pyramidales, est généré par des cellules souches neurales (CSN) qui forment initialement une population d’apparence homogène dans le neuroépithélium télencéphalique dorsal. Plusieurs questions restent en suspens concernant les capacités individuelles de ces CSN et le devenir de leurs cellules filles: ont-elles des capacités équivalentes à proliférer et à générer différents sous-types de neurones pyramidaux, ou bien des populations de CSN aux potentialités différentes coexistent-elles dans le cortex embryonnaire, comme suggéré récemment? Comment les clones de neurones générés par des CSN individuelles s’agencent-ils et s’intercalent-ils dans le cerveau mature ? Répondre à ces deux questions nécessite de suivre sur le long terme le lignage des CSN corticales au cours du développement, avec une résolution cellulaire. Notre équipe a récemment mis en place de nouveaux outils basés sur la stratégie de marquage multicolore Brainbow (transgènes et lignées de souris), spécifiquement adaptés à une telle analyse. Ils permettent de marquer des CSN individuelles dans le cortex embryonnaire et d’identifier leurs cellules filles dans le cerveau adulte avec des marqueurs fluorescents de couleurs différentes héritées au cours des divisions cellulaires. Cette approche d’analyse clonale multicolore offre la possibilité d’analyser simultanément de multiples clones de cellules neurales dans un même échantillon. Le stage de Master 2 consistera à appliquer cette approche dans le cortex murin pour analyser la composition et la distribution de clones de neurones pyramidaux générés par les CSN embryonnaires. Pour déclencher le marquage multicolore spécifiquement dans les CSN, les nouvelles lignées de souris Brainbow seront croisées avec des souris exprimant une recombinase inductible par administration d’un ligand sous contrôle d’un promoteur spécifique disponible dans le laboratoire. L’administration du ligand permettra de marquer des CSN à une densité adéquate à différents stades de développement. Les cerveaux marqués seront analysés grâce à de nouvelles approches d’imagerie « grand volume » récemment mises en place dans l’équipe. Ce projet donnera une formation théorique et pratique solide à l’étudiant(e) sur la problématique du développement cérébral et les approches d’ingénierie génétique et d’imagerie en plein essor utilisées pour son étude.
