TRA13 - Inra
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INRA-DRH | Concours externes 2008 TR | Technicien biologiste profil n° : TR08-MICA-2 emploi-type n°: A4A21 concours : TRA13 Lieu du concours : Tours Rennes ::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::: FICHE DE PROFIL || CONCOURS EXTERNES INRA 2008 ::::::: Le technicien biologiste met en oeuvre, dans le cadre d’un protocole établi, les techniques de la biologie pour la préparation, la caractérisation et l’étude d’échantillons. ....................................................................................................................................................................................................... n°BAP : A | Sciences du Vivant Département : Microbiologie et Chaîne Alimentaire unité n° 1253 | UMR - UMR INRA / AgroCampus Rennes : Science et Technologie du Lait et de l'Oeuf Lieu de travail (si différent) : personne(s) à contacter : Mme LORTAL 0223485321 Mme VALENCE-BERTEL 0223485323 ....................................................................................................................................................................................................... Environnement : L'activité s'exercera au sein de l'équipe CIRM-BIA (Centre de ressource Biologique 'Bactérie d'intérêt alimentaire') sous la responsabilité directe de l'ingénieur en charge de ce CRB. De nombreuses interactions techniques et scientifiques avec les membres de l'équipe microbiologie du laboratoire sont inhérantes à ce poste. La personne recrutée sera amenée à participer à la caractérisation phénotypique et moléculaire de la biodiversité des souches entrées en collection (criblages divers). Il/elle veillera au bon respect des procédures qualité mises en place dans le cadre de la certification ISO9001:2000. Activités : Réaliser à partir de protocoles définis des expériences d'analyses en microbiologie et en biologie moléculaire, des expériences relatives à l'isolement, le typage et la conservation d'une collection multiespèces de bactéries d'intérêt alimentaires. Consulter, exploiter une documentation technique, actualiser et participer à la rédaction des protocoles techniques. Tenir un cahier d'expériences, mettre les résultats en forme, les analyser et rendre compte. Se former et participer à la mise en œuvre de nouvelles techniques en collaboration avec les chercheurs et former les nouveaux utilisateurs. Gérer le planning d'utilisation des appareils. Compétences : Savoir utiliser des logiciels de bureautique et si possible, ceux dédiés à des approches spécifiques (robotique, bioinformatique). Savoir situer son intervention dans une procédure plus large et collaborer avec les autres intervenants. Connaître l'anglais technique du domaine. Capacités personnelles : http://www.inra.fr/drh/ce2008/bdd/profil.php?numprofil=TR08-MICA-2 (1 sur 2) [07/11/2008 13:54:22] INRA-DRH | Concours externes 2008 Diplôme réglementaire minimum exigé : Baccalauréat. Formation en microbiologie générale avec de bonnes notions de taxonomie et de biologie moléculaire souhaitées. Organisation méthodique et très rigoureuse du travail. Solides notions et goût affirmé pour la démarche qualité recommandés. Qualités relationnelles et autonomie. Formation et expérience souhaitées en microbiologie et biologie moléculaire. Goût pour l'apprentissage de nouvelles techniques. Maîtrise des méthodes d'isolement, de purification, et de typage des souches (phénotypiques et moléculaires) fortement souhaitée. 2008 | conception et réalisation : DRH - DSI http://www.inra.fr/drh/ce2008/bdd/profil.php?numprofil=TR08-MICA-2 (2 sur 2) [07/11/2008 13:54:22] INRA-DRH | Concours externes 2008 TR | Technicien biologiste profil n° : Tours TR08-MICA-3 emploi-type n°: A4A21 concours : TRA13 Lieu du concours : Tours ::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::: FICHE DE PROFIL || CONCOURS EXTERNES INRA 2008 ::::::: Le technicien biologiste met en oeuvre, dans le cadre d’un protocole établi, les techniques de la biologie pour la préparation, la caractérisation et l’étude d’échantillons. ....................................................................................................................................................................................................... n°BAP : A | Sciences du Vivant Département : Microbiologie et Chaîne Alimentaire unité n° 1282 | UR - Infectiologie Animale et Santé Publique Lieu de travail (si différent) : personne(s) à contacter : Mme BUZONI 0247427549 ....................................................................................................................................................................................................... Environnement : L’activité s’exercera au sein de l’Unité Infectiologie Animale et Santé Publique. Elle portera sur la mise en place puis la gestion technique d’un Centre de Ressources Biologiques de bactéries pathogènes (classe 2 et 3) dans le cadre d’un système de management de la qualité ISO9001:2000 en collaboration avec le réseau des centres INRA de Ressources Microbiologiques. Travail en laboratoires confinés niveau 2 et 3. Activités : Réaliser, à partir de protocoles définis, des expériences de préparation et d’analyse utilisant un ensemble de techniques d’un domaine : cultures, techniques microbiologiques, biochimiques, immunologiques et de biologie moléculaire, dosages biologiques et/ou biochimiques. Tenir un cahier d’expériences, rassembler les résultats, les mettre en forme et en rendre compte. Actualiser le dossier de protocoles techniques. Consulter et exploiter une documentation technique. Se former à la mise en œuvre des nouvelles techniques dans le service et initier les utilisateurs. Gérer le planning d’utilisation d’appareils et de salles d’expériences. Appliquer, en situation de travail, les règles d’hygiène et de sécurité et celles spécifiques à la manipulation de certains produits et agents pathogènes. Assurer la gestion des commandes et le bon fonctionnement des équipements. Compétences : Connaître les bases de la biologie. Maîtriser dans le cadre d’une utilisation de routine des techniques de microbiologie classique (identification phénotypique…), de biologie moléculaire (extraction d'ADN, PCR, PCR-RFLP…), et de cultures sous hotte à flux laminaire (bactéries, cellules). Savoir utiliser les appareillages dédiés nécessaires (microscope, spectrophotomètre, pH-mètre, thermocycleur, centrifugeuse, conduite d'autoclaves…). Savoir utiliser les logiciels liés aux techniques expérimentales et à la présentation des résultats (traitement de texte, tableur, base de données). Connaître les risques chimiques, biologiques liés aux produits, matériels et techniques utilisés ainsi que la réglementation concernant les produits à risque et les agents pathogènes; les transposer en situation de travail. Savoir situer son intervention dans une procédure plus large et collaborer avec les autres intervenants. http://www.inra.fr/drh/ce2008/bdd/profil.php?numprofil=TR08-MICA-3 (1 sur 2) [07/11/2008 13:55:11] INRA-DRH | Concours externes 2008 Capacités personnelles : Diplôme réglementaire minimum exigé : Baccalauréat. Formation recommandée : domaine scientifique. Expérience préalable souhaitée en microbiologie classique et en biologie moléculaire. Qualités requises : rigueur, sens organisationnel, autonomie, sens des relations humaines. La connaissance de l’anglais technique du domaine est recommandée. 2008 | conception et réalisation : DRH - DSI http://www.inra.fr/drh/ce2008/bdd/profil.php?numprofil=TR08-MICA-3 (2 sur 2) [07/11/2008 13:55:11] INRA-DRH | Concours externes 2008 TR | Technicien biologiste profil n° : TR08-PHASE-10 emploi-type n°: A4A21 concours : TRA13 Lieu du concours : Tours Tours ::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::: FICHE DE PROFIL || CONCOURS EXTERNES INRA 2008 ::::::: Le technicien biologiste met en oeuvre, dans le cadre d’un protocole établi, les techniques de la biologie pour la préparation, la caractérisation et l’étude d’échantillons. ....................................................................................................................................................................................................... n°BAP : A | Sciences du Vivant Département : Physiologie Animale et Systèmes d'Elevage unité n° 85 | UMR - UMR INRA / CNRS / Haras Nationaux / Univ. Tours : Physiologie de la Reproduction et des Comportements Lieu de travail (si différent) : personne(s) à contacter : M. Alain CARATY 0247427913 M. Benoît MALPAUX 0247427905 ....................................................................................................................................................................................................... Environnement : Le travail est effectué au sein d'une équipe de 12 personnes qui étudient les mécanismes neurobiologiques de l'ovulation. L'agent sera impliqué dans les projets individuels des chercheurs et des projets plus collectifs. Ses compétences et ses activités seront complémentaires de celles des autres ingénieurs et techniciens de l'équipe. Il/elle participera à des expérimentations in vivo et réalisera des manipulations sur les animaux (ovins, rongeurs). Il/elle sera amené(e) à avoir des interactions avec l'ensemble du personnel de l'unité de recherche et de l'unité expérimentale. L'agent peut être amené à travailler en horaires décalés, effectuer des déplacements et manipuler des produits radio-marqués et des OGM. Activités : Réaliser, à partir de protocoles définis, des expériences de préparation et d’analyse utilisant un ensemble de techniques d’un domaine : immunochimie et biologie moléculaire (immunocytochimie, ELISA, Western, cultures cellulaires, transfection, préparation et analyse d'ARN). Tenir un cahier d’expériences, rassembler les résultats, les mettre en forme et en rendre compte. Consulter et exploiter une documentation technique (fournisseurs, publications). Se former à la mise en œuvre des nouvelles techniques dans le service et initier les utilisateurs. Appliquer, en situation de travail, les règles d’hygiène et de sécurité et celles spécifiques à la manipulation de certains produits. Compétences : Connaître les bases de la biologie animale. Savoir utiliser les logiciels liés aux techniques expérimentales et à la présentation des résultats. Savoir situer son intervention dans une procédure plus large et collaborer avec les autres intervenants. Connaître l’anglais technique du domaine. Capacités personnelles : Diplôme réglementaire minimum exigé : Baccalauréat. Formation recommandée : domaine scientifique et biologie. Capacité à évoluer et à travailler dans une équipe. Soin et rigueur dans la pratique analytique de laboratoire. http://www.inra.fr/drh/ce2008/bdd/profil.php?numprofil=TR08-PHASE-10 (1 sur 2) [07/11/2008 13:56:46] INRA-DRH | Concours externes 2008 2008 | conception et réalisation : DRH - DSI http://www.inra.fr/drh/ce2008/bdd/profil.php?numprofil=TR08-PHASE-10 (2 sur 2) [07/11/2008 13:56:46] République Française Centre de TOURS CONCOURS EXTERNE TRA13 TECHNICIEN DE LA RECHERCHE Technicien Biologiste EPREUVE ECRITE : le 10 juin 2008 DUREE : 3 heures - COEFFICIENT : 3 L’épreuve étant anonyme, n’inscrivez ni votre nom, ni aucun signe distinctif sur votre copie. A la fin de l’épreuve, insérez le sujet dans la copie qui porte vos coordonnées cachetées. - Le sujet comporte 24 pages (page de garde incluse) Au cours de l’épreuve, les téléphones portables et les documents personnels sont interdits. Les calculs que le candidat pourrait avoir à réaliser sont de nature simple et peuvent être résolus de tête ou à l’aide d’une feuille de brouillon. De ce fait l’emploi d’une calculatrice n’est pas nécessaire. En conséquence, l’usage de la calculatrice est interdit pour l’ensemble de l’épreuve. Les exercices ou certaines questions demandent une réponse écrite de la part du candidat. La réponse ne doit pas prêter à confusion (notamment chiffres ou mots mal écrits…). Durant l’épreuve, seul le dictionnaire Français/Anglais, Anglais/Français est autorisé. ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------Etablissement public à caractère scientifique et technologique placé sous la tutelle conjointe des Ministres chargés de la Recherche et de l’Agriculture 1 Cette épreuve comporte : • Un questionnaire constitué de 30 questions à choix multiples. Attention : Selon les questions, une ou plusieurs réponses sont possibles. Aussi, veuillez cochez clairement sur le document la ou les réponses possibles. • Un questionnaire constitué de 30 questions à réponses courtes. Il vous est demandé de répondre directement sur la feuille d’énoncé le plus brièvement possible dans l'espace disponible entre les questions. • Les exercices 1 et 2 qui décrivent des situations de travail sont obligatoires. Vous devez répondre directement sur la feuille d’énoncé dans l’espace disponible. • Les exercices 3 et 4 sont au choix. Seul un des deux exercices doit être traité. Vous devez répondre directement sur la feuille d’énoncé dans l’espace disponible. • Une question rédactionnelle Notation : Questionnaire à choix multiple noté sur 30 points Questionnaire à réponses courtes noté sur 30 points Exercice 1 noté sur 10 points Exercice 2 noté sur 20 points Exercices 3 ou 4 notés sur 20 Question rédactionnelle notée sur 30 points 2 QUESTIONNAIRE A CHOIX MULTIPLE (30 points) (Bonne réponse 1 point. Mauvaise réponse ou absence de réponse 0 point par question). 1) L’ensemble des caractères observés chez un individu est appelé : Le caryotype Le phénotype Le génotype Le sérotype 2) Lequel de ces logiciels est un tableur ? Word Power point Blast Excel 3) Vous devez préparer précisément 2 litres de solution ? Quelle verrerie de laboratoire devezvous utiliser ? Un erlenmeyer Une fiole jaugée Un bécher Une éprouvette 4) 120 µL équivaut à : 0.120 L 0.012 L 0.120 mL 0.012 mL 5) Chez un organisme eucaryote, l’ensemble des séquences codantes sont appelées : Les exons Les codons Les introns 3 6) Lequel de ces dosages utilise un traceur radioactif ? ELISA Bradford Hybridation in situ RIA 7) On prépare 10 mL d’une solution mère à 10 g/L et on ajoute 40 mL d’eau distillée à ces 10 mL de solution mère. Quelle est la concentration de la solution obtenue ? 0.1 mg/mL 0.2 mg/mL 1 mg/mL 2 mg/mL 8) Une solution se trouve à un pH de 9. Qu’utilisez-vous pour la ramener à 6 ? NaOH Éthanol HCl NaCl 9) Quel est le rôle du β-mercaptoéthanol dans un tampon d’électrophorèse des protéines ? Rompre la liaison peptidique Neutraliser les charges électrostatiques des protéines Couper les ponts disulfures 10) Combien de gramme représente un nanogramme : 10-12 10-9 10-15 10-6 11) Pour préparer 150 mL de sucrose à 20% (poids/volume), vous devez peser : 30 grammes de sucrose 3 grammes de sucrose 10 grammes de sucrose 15 grammes de sucrose 4 12) Un cahier de laboratoire : Appartient au laboratoire Ne contient que les résultats des expériences réussies Est rempli après chaque expérience Peut contenir des ratures 13) On vous demande d’effectuer une recherche bibliographique sur Internet. Quel site choisissez-vous d’utiliser en premier ? Swiss prot PubMed BLAT Google 14) La fermentation : A lieu dans les mitochondries Ne nécessite pas d’oxygène Nécessite de l’acide lactique 15) La réaction d’amplification par PCR est : Une méthode de séquençage de l’ADN Une méthode pour transcrire de l’ARN en ADN Une méthode pour produire de grandes quantités d’ADN 16) Pour désinfecter un erlenmeyer ayant contenu une culture bactérienne : On le lave avec un détergent et on le rince précautionneusement On le met dans un lave-vaisselle de laboratoire On le traite avec une solution d’eau de Javel On le rince avec de l’eau et on pulvérise une solution d’éthanol à 70° On l’autoclave 17) Pour la stérilisation d’une solution par filtration, quel diamètre de pores doit avoir le filtre ? 0, 2 µm 1 µm 2 µm 10 µm 5 18) Parmi les espèces bactériennes suivantes, laquelle peut être pathogène chez un homme sain ? Staphylococcus epidermidis Staphylococcus aureus Bacillus subtilis Lactobacillus lactis Listeria innocua 19) Le diamètre d’une bactérie est : Inférieur au nm De quelques nanomètres D’environ 1 µm D’une centaine de microns 20) Les levures sont des microorganismes classés parmi : Les bactéries Les virus Les protozoaires Les champignons 21) La phylogénie est : L’étude de la forme des arbres L’étude de l’histoire évolutive d’une espèce vivante L’étude des gènes d’un organisme L’étude de l’expression des transcrits des gènes 22) Lors de la phase exponentielle de croissance des bactéries, le taux de croissance est : Maximal Minimal Augmente 23) Les feuillets BETA d’une protéine appartiennent à la structure : Primaire Secondaire Tertiaire 6 24) Un anticorps est : Une protéine Une cellule du système immunitaire Une immunoglobuline Un microbe 25) Pour réaliser une dilution de suspension bactérienne au 1/1000, vous utilisez : Une öse (anse) de 10 µL de suspension bactérienne dans 10 mL d'eau physiologique Une goutte de 50 µL de suspension bactérienne dans 5 mL d'eau physiologique 1 mL de suspension bactérienne dans 9 mL d'eau physiologique 26) Vous devez peser 5 g de produit ±0.01g, quelle balance utilisez-vous ? Portée 1 kg, précision 1 g Portée 150 g, précision 1 mg Portée 50 g, précision 1 dg Portée 4 kg, précision 100 mg 27) Parmi ces hormones, lesquelles sont directement impliquées dans la reproduction chez les mammifères ? Ecdysone Hormone lutéïnisante Glucagon Testostérone Cortisone Thyroxine 28) La norme ISO 9001 est une norme : A caractère organisationnel A caractère technique Les deux 7 29) Qu'est-ce qu'un manuel qualité? Un protocole permettant de réaliser une technique sous assurance qualité La notice de bonne utilisation d'un appareil de mesure Un document décrivant un système de management de la qualité 30) Parmi ces types cellulaires, lesquels sont trouvés dans le système nerveux central : Les neurones Les adipocytes Les cellules gliales Les myocytes Les hépatocytes 8 QUESTIONNAIRE A REPONSES COURTES (1 point par bonne réponse. Total sur 30 points) Répondre directement sur la feuille d’énoncé à l’emplacement prévu 1) Que signifie le sigle I.N.R.A ? __________________________________________________________________________ 2) Quelle est la différence entre un produit bactériostatique et un produit bactéricide ? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ 3) On désire diluer une solution mère au 1/100ème pour obtenir 10 mL de solution fille diluée. Quel est le volume de solution mère à prélever ? ___________________________________________________________________________ 4) Comment procède-t-on pour vérifier le volume distribué par une pipette automatique de 1 mL ? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ 5) La masse moléculaire du Tris est de 121,1. Quelle masse de ce composé doit-on peser pour préparer 100 mL de solution molaire ? ___________________________________________________________________________ 6) A quoi sert un autoclave ? ____________________________________ ______________________________________ ___________________________________________________________________________ 7) Lors d’un Western blot, à quoi sert la solution de blocage ? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ 9 8) Convertir : 100 cm3 d’eau = ______g 20 µL d’eau = _______ mg 10 g/L = ______ mg/mL 0.35 mL =______ µL 9) Reliez d’un trait chaque molécule à la technique qui permet de la détecter : Northern Protéines Western ADN Southern ARN 10) Après extraction des ARN et mesures au spectrophotomètre, vous obtenez les résultats suivants : Absorbance à 260 nm = 0.1, Ratio 260/230=1.2 et Ratio 260/280=1.5. Calculer la concentration en ARN de l’échantillon en µg/mL ? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ Quel qualificatif donneriez-vous à la pureté de votre échantillon ? Excellente Bonne Médiocre 11) Vous devez manipuler un produit toxique, irritant et volatil. Quelles précautions devezvous prendre pour le manipuler ? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 10 12) Que signifie le sigle suivant qui apparaît sur le flacon d'un produit que vous devez manipuler ? ____________________________________________________________ Quelles précautions devez-vous prendre pour manipuler ce produit ? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ 13) Quelle est la nature des constituants que l’on peut séparer par électrophorèse SDSPAGE ? Quel est le principe de cette technique ? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ 14) Qu’est ce qu’une galerie API ? Sur quel principe repose t-elle ? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ 15) Définir en quelques mots la culture primaire de cellules ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ 16) Donner la signification des acronymes suivants : RFLP : ______________________________________________________________ RT-PCR : ____________________________________________________________ PFGE : ______________________________________________________________ TTGE : ______________________________________________________________ 11 17) Pourquoi l’hybridation in situ et l’immunohistochimie sont-elles des techniques complémentaires ? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ 18) Pouvez vous citer 3 modes de conservations à long terme des bactéries ? Quel est le mode le plus simple et le plus adapté à une conservation à long terme ? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ 19) Vous faites migrer des produits d’amplification d’une PCR sur un gel d’agarose en présence de bromure d’éthidium. A quoi sert le bromure d’éthydium (BET) ? ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ 20) Donner les définitions de : ADN : ______________________________________________________________ ARN : ______________________________________________________________ 21) Citez une modification post-traductionnelle d’une protéine. __________________________________________________________________________ 22) Que signifie le sigle PCR ? Quelles sont les principales étapes de la technique ? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 12 23) Dans quel liquide baigne le système nerveux central ? __________________________________________________________________________ 24) De quoi sont composés les nucléotides ? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 25) Quelles sont les principales étapes de la coloration de Gram ? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 26) Le principe de la coloration de Gram repose sur une différence de composition des enveloppes bactériennes des bactéries dites à Gram positif et des bactéries dites à Gram négatifs. De quelle différence s’agit-il ? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 27) Quelles sont les couleurs prises par ces deux classes de bactéries après coloration ? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 28) Quel type de rayons est émis par le 35S ? __________________________________________________________________________ 29) Citez les 4 phases de la mitose ? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 13 30) Que signifie PSM? Quelle est la fonction d'un PSM de type II ? _________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________ 14 Exercices Exercice 1 (10 points): (Répondre dans les cadres aux questions posées. Développer votre réponse lorsque vous le jugerez nécessaire) Un dosage des protéines doit être conduit sur 20 extraits de tissus différents. Chaque tissu est mesuré à 2 stades physiologiques différents. Vous devrez ajouter une gamme étalon comprenant 5 points et un témoin négatif avec de l’eau. La réaction se fait dans des plaques contenant 96 puits. Chaque réaction devra être mesurée en triple et la gamme être présente sur chacune des plaques. Combien de puits doit-on utiliser pour faire le dosage ? Combien de plaques seront nécessaires ? Développer votre réponse. 15 Exercice 2 (20 points): (Répondre dans les cadres aux questions posées. Développer votre réponse lorsque vous le jugerez nécessaire) Vous trouverez ci-dessous la notice d’utilisation d’un kit permettant d’effectuer une réaction de RT utilisée pour des marquages fluorescents. Veuillez la lire attentivement. Vous devez effectuer l’expérimentation décrite ci-dessus à partir d’échantillons d’ARN totaux à la concentration de 2 µg/µL. Veuillez répondre aux questions suivantes en développant votre réponse. a.) Quel est le volume d’ARN totaux à prélever pour effectuer la réaction sur 20 µg d’ARN ? 16 b.) Quel type et quel volume d’amorce seront utilisés ? Quel sera le volume d’eau pour chaque réaction ? c.) Vous avez 5 échantillons sur lesquels doit être effectuée la réaction de RT en suivant le protocole donné. Quels volumes de tampon et de Superscript devrez-vous utiliser pour ces 5 échantillons ? Sachant que le kit contient au départ 8000 unités d’enzymes Superscript, combien d’unités d’enzymes vous restera-t-il ? Combien d’échantillons estil possible de traiter avec le reste ? d.) A quelle température doit être effectuée la réaction de RT ? Pendant combien de temps ? Quelle(s) précaution(s) est (sont) à prendre durant l'incubation de l'échantillon ? 17 Exercice 3 (20 points): Exercice au choix avec l’exercice 4. Seulement 1 des 2 doit être traité. (Répondre dans les cadres aux questions posées. Développer votre réponse lorsque vous le jugerez nécessaire) Vous souhaitez déterminer si une protéine X est présente dans deux échantillons de tissu disséqué et conservé à -80°C. Vous disposez d’un anticorps spécifique dirigé contre cette protéine X et d’un anticorps dirigé contre une protéine de référence. Vous décidez d’utiliser une technique de Western Blot et commencez par préparer les protéines totales. 1) Quelles précautions prenez-vous pour éviter une dégradation des protéines ? Quel type de dosage mettez-vous en jeu pour évaluer la concentration de l’extrait de protéines totales? Vous trouvez une concentration de 4 mg/mL dans 150 µL d’échantillon A et une concentration de 8 mg/mL dans 100 µL d’échantillon B. Vous souhaitez ramener ces échantillons à une concentration de 2mg/mL. 2) quel volume de tampon ajouter à vos échantillons A et B ? 3) Décrivez les différentes étapes des méthodes utilisées de la séparation des protéines au Western blot (immunobuvardage). Sur quels principes reposentelles ? 18 4) Qu’est ce qu’une protéine de référence ? Quelle est son utilité ? 19 Exercice 4 (20 points): Exercice au choix avec l’exercice 3. Seulement 1 des 2 doit être traité. (Répondre dans les cadres aux questions posées. Développer votre réponse lorsque vous le jugerez nécessaire) Vous souhaitez réaliser l’ensemencement d’un lait par Streptococcus thermophilus. (Levain technologique couramment utilisé dans la fabrication des yaourts). L’inoculum bactérien est constitué par une culture de la souche de S. thermophilus dans du bouillon M17 à un niveau de 1.109 UFC/mL. 1) Décrivez brièvement votre poste de travail et les protections individuelles justes et suffisantes qu’il convient d’utiliser : 2) Quel volume d’inoculum devrez-vous ensemencer dans 100 mL de lait pour atteindre un niveau de population initial de 106 UFC/mL ? 20 Vous devez dénombrer les bactéries présentes dans le lait après 4 h d’incubation à 43°C. Pour cela, vous réalisez une dilution en cascade de votre échantillon (dilution au 1/10ème) et vous ensemencez dans la masse, un milieu gélosé approprié en boîtes de Petri à raison d’1 mL d’échantillon par boîte de Petri. Sachant que des essais préliminaires ont montré que la population théorique est d’environ 2.108 UFC/mL au bout de 4h : 3) De combien de tubes de diluant de 9 mL aurez-vous besoin pour réaliser votre dénombrement? 4) Quels sont les tubes de dilutions que vous allez utiliser pour ensemencer vos boîtes de milieux gélosés ? Argumentez. 5) Combien de boîtes ensemencez-vous pour chaque dilution (répétition) ? 21 6) Combien de colonies vous attendez-vous à dénombrer sur les boîtes de Petri que vous avez ensemencées ? 7) Suite à une erreur de manipulation le contenu d'un des tubes de dilution est renversé sur le sol. Quelles dispositions prenez-vous ? 22 QUESTION RÉDACTIONNELLE (30 points) (Vous veillerez à développer et à argumenter vos réponses) Première question : Que signifie pour vous de travailler sous démarche qualité ? Quels en sont les contraintes et les bénéfices ? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 23 Deuxième question : Vous arrivez dans un laboratoire de recherche où la démarche qualité est en train de se mettre en place. Dans ce cadre, vous êtes nommé responsable des appareillages et équipements. Quelles dispositions et mesures prenez vous ? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ 24 AUDITIONS CONCOURS TRA13 COEFFICIENT 3 Préparation : 15 minutes Durée : 25 minutes Sujet : En 5 minutes maximum, vous vous présenterez en nous expliquant en quoi votre formation et votre parcours professionnel sont en adéquation avec le (les) poste(s) pour lequel (lesquels) vous postulez ?
