Nb. zygotes en culture

Culture et transfert de
blastocystes
Françoise Urner
Centre de Procréation Médicalement Assistée & Fondation F.A.B.E.R.
Lausanne, Suisse
Colloque des Chevreuils, 19.11.09
dimanche, 27 décembre 2009
Contexte helvétique
• Limite de 3 embryons en culture
• Congélation d’embryons interdite
• Conséquences sur les traitements par FIV:
• Sélection d’ embryons aptes à donner une grossesse:
difficilement réalisable
• Diminution du nombre de grossesses gémellaires:
difficilement réalisable
• Nombreux transferts d’embryons successifs
• Coût émotionnel, psychologique et financier pour les
patients
Colloque des Chevreuils, 19.11.09
dimanche, 27 décembre 2009
Comment améliorer la situation ?
• Sélection au stade ovocytaire et/ou du zygote:
pas très efficace
• Transfert de 3 embryons systématiquement:
inacceptable, grossesses triples
• Sélection du ou des meilleurs embryons
parmi trois en culture, sur la base du
développement à J5
Colloque des Chevreuils, 19.11.09
dimanche, 27 décembre 2009
Objectif du transfert de
blastocystes
Améliorer les taux de grossesse par
transfert, sans augmenter les
grossesses multiples, en transférant 1
ou 2 blastocystes obtenus après la
culture prolongée de 3 embryons.
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dimanche, 27 décembre 2009
Protocole
•
•
•
•
•
•
•
2007-2008-2009
241 cycles de décongélation
741 zygotes décongelés
Age: 35.5 ± 3.8 years
Décongélation et mise en culture de 1 à 4
zygotes selon le profil des patientes
Transfert de 1,2 ou 3 embryons selon le
profil des patientes
Transfert annulé en cas d’absence de
blastocystes ou morula au J5/6
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Développement embryonnaire
Jour 1
zygote
Jour 2
2-4 cellules
Jour 3
6-10 cellules
Jour 4
morula
Jour 5
blastocyste
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dimanche, 27 décembre 2009
Développement embryonnaire à J5
2PN-zygotes
N = 741
Blastocystes
N=198, 27%
Jeune blasto
N=100, 13%
Morulae
N=240, 32%
dimanche, 27 décembre 2009
Blasto
N=70, 9%
Blasto expansé
N=28, 4%
Arrêt développement
N= 303, 41%
Culture prolongée: 4 scénarios possibles
Arrêt de développement
10%
1-2 blastocystes
1 embryon bloqué
75%
3 embryons à des stades
avancés mais différents
15%
3 blastocystes identiques
1 cas
dimanche, 27 décembre 2009
Taux de grossesse (%)
Taux de grossesse en fonction du
développement embryonnaire à J5
P<0.005
50
38
25
13
0
Morulae Jeune blasto
Transferts:
Age:
Blasto Blasto expansé
N=66
N=54
N=74
N=44
36.1 ± 3.5
34.7 ±.4
35.4 ±4.0
35.9 ± 4.0
Colloque des Chevreuils, 19.11.09
dimanche, 27 décembre 2009
40
40
30
30
Blastocystes
Grossesses
20
%
%
Blastocystes à J5: effet de l’âge et
de la réponse ovarienne
20
10
10
0
0
<35
35-38
age
>38
<10
>20
Nb. zygotes congelés
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10-20
Résultats des transferts à J5/J6
Nb. de cycles
Nb. de zygotes décongelés
Nb. de transferts
Nb. d’embryons transférés
Nb. de transferts annulés (%)
Nb. de grossesses cliniques
% par cycle initié
% par transfert
Taux d’implantation
Grossesses gémellaires
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267
741
239
1.54 ± 0.78
28 (10%)
71
27%
30%
18%
4 (6%)
p = 0.015
50
38
25
13
0
30
J5/J6
21
J3
p = 0.119
50
43
35
28
20
27
21
J5/J6
J3
Implantation par zygote en culture
(%) par embryon transféré (%)
Implantation
Grossesses par cycle (%)Grossesses par transfert (%)
Grossesse et implantation en
fonction du transfert à J5/6 ou J3
50
40
31
21
11
18
J5/J6
12
J3
p = 0.07
50
40
30
19
9
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p = 0.021
10
13
J5/J6
J3
Grossesses (%)
p = 0.118
50
38
25
13
0
J5
Implantation (%)
Grossesse et implantation en
fonction du transfert à J5 ou J6
p = 0.251
50
41
32
22
13
J5
J6
Transferts
Age
Jour 5
Jour 6
N=171
N=68
35.4 ± 4.1
37.7 ± 3.7
Colloque des Chevreuils, 19.11.09
dimanche, 27 décembre 2009
J6
Implantation (%)
Grossesses (%)
Grossesse et implantation en fonction
du nombre de zygotes en culture
50.0
37.5
25.0
12.5
0
1
2
3
4
50.0
37.5
25.0
12.5
0
1
Nb. zygotes en culture
Transferts
Age
3
4
Nb. zygotes en culture
n=1
n=2
n=3
n=4
N=4
N=82
N=116
N=37
35.2±1.9
35.8±3.8
35.2±3.9
35.9± 4.1
Colloque des Chevreuils, 19.11.09
dimanche, 27 décembre 2009
2
Grossesse et implantation en fonction
du nombre de zygotes congelés
40
30
20
10
0
<10
10-20
>20
p = 0.011
Implantation (%)
Grossesses (%)
p = 0.022
50
38
25
13
0
Nb. zygotes congelés
Transferts
Age
<10
>20
Nb. zygotes congelés
< 10
10-20
>20
N=87
N=100
N=52
35.9±3.9
35.5±3.7
34.9±4.7
Colloque Chevreuils, 19.11..2009
dimanche, 27 décembre 2009
10-20
A qui proposer une culture prolongée ?
Situation 1:
Diminuer le nombre de transferts et augmenter la probabilité
de grossesse par transfert
>10 zygotes congelés
Consigne: transférer 1 ou 2 embryons parmi 3 en culture
Situation 2:
Exclure une grossesse gémellaire
Consigne transférer 1 embryon parmi 2 en culture
Situation 3:
Eviter un transfert d’embryons voués à s’arrêter
Colloque Chevreuils, 19.11..2009
dimanche, 27 décembre 2009
Mais encore….
•
Les patientes doivent être averties d’une
possible annulation du transfert
• Les patientes doivent pouvoir accepter de
« perdre » un embryon si tous les embryons en
culture se développent bien
Colloque Chevreuils, 19.11..2009
dimanche, 27 décembre 2009
Conclusions
• Les zygotes décongelés peuvent être
facilement cultivés jusqu’au stade du
blastocyste in vitro
• La culture prolongée permet le transfert de
morula et/ou blastocystes dans 90% des cas
• Le transfert de morula/blastocyste permet
d’augmenter le taux de grossesse par
transfert chez les patientes qui ont 10-20
zygotes congelés
Colloque Chevreuils, 19.11..2009
dimanche, 27 décembre 2009
dimanche, 27 décembre 2009
50
p=0.0
38
25
13
0
Transfer day
Transfers
Zygotes In culture
Age
dimanche, 27 décembre 2009
Implantation rate (%)
Pregnancy rate (%)
Day 5/6 vs. Day 3 transfers
10-20 frozen zygotes
50
p=0.000
42
35
27
19
Transfer day
Day 5/6
Day 3
N=100
N=134
2.75 ± 0.6*
1.95 ± 0.47*
35.5 ± 3.4
34.3 ± 4.1
dimanche, 27 décembre 2009
Day 5/6 vs. Day 3 cycles
Day 5/6
Day 3
P-values
35.5 ± 3.8
35.4 ± 4.3
0.291
No. of cycles
267
447
-
No. of transfers
239
447
-
28 (10%)
0
-
No. of thawed zygotes (intact)
741
840
-
Mean No. of zygotes in culture
2.8 ± 0.7
1.9 ± 0.52
0.000
1.72 ± 0.64
1.76 ± 0.5
0.227
Pregnancy rate per cycle
27%
21%
0.119
Pregnancy rate per transfer
30%
21%
0.015
Implantation rate
18%
12%
0.021
Age
No. of cancelled cycles (%)
Mean No. of transferred embryos
dimanche, 27 décembre 2009