Diagnostic de l’enfant à naître dans le sang maternel : du rêve à la réalité Jean-Marc COSTA Génétique Moléculaire Laboratoire Cerba Paris le 13 avril 2013 Madame ABD, conductrice d’hémophilie A sévère 2001 10 semaines de grossesse • Détermination du sexe du futur enfant X • Echographie Madame ABD, conductrice d’hémophilie A sévère 2001 10 semaines de grossesse • Détermination du sexe du futur enfant X • Echographie • Caryotype fœtal pour détermination du sexe fœtal Madame ABD, conductrice d’hémophilie A sévère 2001 10 semaines de grossesse • Détermination du sexe du futur enfant X • Echographie • Caryotype fœtal pour détermination du sexe fœtal • Biopsie de villosités choriales Prélèvement de villosités choriales: choriocentèse Prélèvement de liquide amniotique: amniocentèse Madame ABD, conductrice d’hémophilie A sévère 2001 10 semaines de grossesse • Détermination du sexe du futur enfant X • Echographie • Caryotype fœtal pour détermination du sexe fœtal • Biopsie de villosités choriales Fausse-couche 0.5-1% Prématurité Hémorragie Infection Madame ABD, conductrice d’hémophilie A sévère 2001 10 semaines de grossesse • Biopsie de villosités choriales • Caryotype fœtal pour détermination du sexe fœtal • Résultat: 46,XX • Fausse-couche 832.799 naissances vivantes (données INSEE) Estimation théorique des pertes fœtales: 64.519 fœtus étudiés 323-645 En 1969, l'équipe américaine de Janina Walknowska à l'université de Californie identifie dans le sang de 19 femmes enceintes de garçons des chromosomes Y, caractéristiques de cellules masculines Sang maternel placenta J. Walknowska et al., Lancet, 1119, 1969 En 1969, l'équipe américaine de Janina Walknowska à l'université de Californie identifie dans le sang de 19 femmes enceintes de garçons des chromosomes Y, caractéristiques de cellules masculines Sang maternel 25.000.000 cellules de la mère 5 cellules du foetus 0,0005% J. Walknowska et al., Lancet, 1119, 1969 En 1997, l'équipe de Dennis Lo à l'université d’Oxford identifie dans le sang de 24 femmes enceintes de garçons des fragments d’ADN provenant du chromosomes Y, caractéristiques de cellules masculines Sang maternel placenta Y.M.D. Lo et al., Lancet, 350, 485, 1997 En 1997, l'équipe de Dennis Lo à l'université d’Oxford identifie dans le sang de 24 femmes enceintes de garçons des fragments d’ADN provenant du chromosomes Y, caractéristiques de cellules masculines Sang maternel 1.000 molécules ADN de la mère 100 molécules ADN du foetus placenta 10% Y.M.D. Lo et al., Lancet, 350, 485, 1997 Y X Détermination du sexe fœtal : Recherche de séquences dérivées du chromosome Y (gèneSRY) – Maladies génétiques liées à l’X – – Hyperplasie congénitales des surrénales hydroxylase) – – Eviter un geste invasif (CVS) chez les patientes conductrices qui portent un fœtus de sexe féminin (ne présentant aucun risque) (déficit en 21- Eviter le recours à un traitement corticoïde chez les patientes qui portent un foetus de sexe masculin (traitement inutile) Ambiguïtés sexuelles échographiques, discordances caryotypes/échographie Madame ABD, conductrice d’hémophilie A sévère 2001 10 semaines de grossesse • Biopsie de villosités choriales • Caryotype fœtal pour détermination du sexe fœtal • Résultat: 46,XX • Fausse-couche 2013 Prise de sang 10 semaines de grossesse • Prise de sang pour détermination du sexe fœtal (ADN fœtal circulant) • Résultat: fœtus de sexe féminin • Contrôle échographique au 2ème trimestre de la grossesse • Naissance d’une petite fille Allo-immunisation foeto-maternelle rhésus D Rhésus D positif Rhésus D négatif Anticorps dirigés contre les globules rouges Foetus Rhésus D positif RHD+ RHDGénotypage RHD fœtal : Recherche de séquences dérivées du gène RHD • Plus de recours à l’amniocentèse chez les patientes alloimmunisées pour évaluation fœtale • Plus d’injection systématique d’immunoglobulines anti-D chez les patientes RhD-négatives après un geste invasif (villosités choriales ou amniocentèse) • Plus de prophylaxie systématique chez toutes les patientes RhD-négatives Intérêt: environ 35% des fœtus sont RhD-négatifs Perspective à court terme De la maladie mono-génique à l’étude complète du génome fœtal Encadrement réglementaire du diagnostic prénatal en France Loi n°2011-814 du 7 juillet 2011 relative à la bioéthique Laboratoire autorisé par l’Agence Régionale de Soins Evaluation de la compétence du biologiste Déclaration annuelle d’activité à l’Agence de la Biomédecine Prescription médicale obligatoire Consentement de la patiente pour la réalisation des analyses Le prescripteur communique les résultats à la patiente ADN fœtal circulant et grossesse Salive Liquide céphalo-rachidien Sang Urine