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Chloé, Lucas, Martial, Emmy, Emma Les Macrophages dans le système immunitaire Observation Observation au microscope confocal d’une coupe de peau après blessure. Les lymphocytes T sont « colorés » en vert et les macrophages en rouge. D’après Reynders A. Observation Coupe de peau contrôle Coupe échantillon Epiderme Epiderme Derme Derme D’après Reynders A. Problématique Comment nous défendent les macrophages contre les bactéries ? Hypothèses 1 – Les Macrophages sécrètent naturellement du lysozyme. 2 – Les lysozymes sécrétés par les macrophages possèdent une activité antibactérienne. 1. Les macrophages sécrètent du lysozyme (si oui, en quelle quantité?) Expérience : Boite avec gel d’agarose + peptidoglycane Matériel : milieu de culture Milieu des macrophages Milieu I.E.C.6 Milieu témoin 1. Les macrophages sécrètent du lysozyme (si oui, en quelle quantité?) Expérience : Lysoplate assay Elle permet de mesurer la dégradation du peptidoglycane en gel d’agarose. Matériel : le milieu de culture Boîte 1 Boîte 2 Boîte 3 Boîte 4 [Lysozyme] en µg/mL 0 0,39 0,78 1,56 3,125 6,25 12,5 Gamme étalon 0 1,35 1,45 1,8 2,1 2,3 0 0,6 1,1 1,4 1,6 2 2,2 0 1,2 1,35 1,6 1,95 0 0,4 0,95 1,35 1,75 2 Moyenne 0,00 0,50 1,15 1,39 1,69 2,01 2,25 Diamètre mesure en centimètre 7.0 6.0 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 0.0 0 2 4 [Lysozyme] en microgramme par millilitre Les 2 types de bactéries GRAM + Membrane plasmique GRAM - Peptidoglycane Peptidoglycane Lipopolysaccharide ( LPS) 2. Le lysozyme sécrété par les macrophages est anti-bactérien Matériel : Spectrophotomètre connecté à un ordinateur – suivre les mesures en direct de la turbicité d’un liquide. Courbe de l’Abs en fonction du temps spectrophotomètre Solution bactérienne Solution bactérienne + lysozyme 2. Le lysozyme sécrété par les macrophages est anti-bactérien Expérience : Avec le Micrococcus Lysodeikticus ( Gram+) = Bactérie vivante Conclusion Macrophage Micrococcus Lysodeikticus (Gram + ) Peptidoglycane Molécules de lysozymes
