Enzymes recopiant les acides nucléiques Enzymes recopiant l’ADN ou l’ARN DNA polymérase DNA dépendante DNA polymérase RNA dépendante RNA polymérase DNA dépendante RNA polymérase RNA dépendante Ces enzymes synthétisent le nouveau brin dans le sens 5’ -> 3’ La synthèse se fait de manière complémentaire et antiparallèle. L’enzyme fonctionne en présence de nucléosides triphosphates (XTP) ou de désoxynucléosides (dXTP) Dr. Jacques PAOLETTI Les DNA polymérases Propriétés DNA polymérase DNA dépendante DNA polymérase I : Activités exonucléasiques Fragment de Klenow Dr. Jacques PAOLETTI LES ADN POLYMÉRASES - Un brin d'ADN matrice - Une amorce oligonucléotidique - Une synthèse du brin nouveau 5'è 3' 3'(OH) 5' 5' 3' Dr. Jacques PAOLETTI DNA polymérase DNA dépendante Ces enzymes recopient l’ADN en ADN. Elles nécessitent une amorce d’acide nucléique. La réaction catalysée est: (dXMP)n + dXTP à (dNMP)n+1 + PPi Amorce avec une extrémité 3’-OH libre La nouvelle chaîne est synthétisée dans le sens 5’ à 3’ Règle de complémentarité et de polarité inverse Dr. Jacques PAOLETTI La DNA polymérase 1 Dr. Jacques PAOLETTI Fragment de KLENOW Le fragment de Klenow est préparé à partir de la DNA polymérse 1 d’E.coli. Ce fragment ne possède plus d’activité exonucléasique 5’à 3’ mais garde l’activité polymérasique et l’activité exonucléasique 3’ à 5’. Cette enzyme est utilisée au laboratoire car elle permet de contrôler si la base qui vient d’être ajoutée obéit à la règle de complémentarité. (fonction d’édition) Dr. Jacques PAOLETTI LES ARN POLYMÉRASES - Synthèse d'ARN sans amorce préalable. - Présence de nucléotides : NTPs et d'ions magnésium (Mg2+ ). Dr. Jacques PAOLETTI - Une synthèse du brin nouveau dans le sens 5'è 3'. - Absence de fonction d'édition. - Nécessité de reconnaître le promoteur spécifique correspondant. Dr. Jacques PAOLETTI Dr. Jacques PAOLETTI