Diapositive 1
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Lymphomatogenese Amiens 2013 Plan • Rappels – Apoptose – Réarrangements des genes des Igs – Cycle cellulaire et LNH • Physiopathologie – Facteurs génétiques – Facteurs environnementaux • Exemples: EBV, Hélicobacter Lymphocyte B • Réarrangement des genes des immunoglobulines • Differenciation B • Centre germinatif Réarrangement des Igs Cellule souche VH Pro-B DH Pré-B JH VH DH - JH VH DH JH B immature Différenciation B chez l'Homme cellule Pro-B souche Pré-B µ/CL B IgM Plasmocyte IgM IgD Tdt Les hémopathies lymphoïdes B peuvent toucher le lymphocyte B à toute étape de sa différenciation Organes Lymphoïdes et Centre Germinatif Zone Marginale Light Zone (Zone claire) Centrocytes Switch, Mutations Zone du manteau B Mémoires Plasmocytes B Mature Naïf Centroblastes Zone Sombre (Dark Zone) Dérégulation du cycle cellulaire et Lymphome B • Low grade: – Altération de l’apoptose • High grade: – Altération du cycle Low grade NHL • Bcl2: t(14-18) – Famille bcl2: antiapoptose (bcl2, bclxl, Mcl1) et proapoptotique (Bax, BID, BIK, BclxS) – Bcl2 seul pas suffisant (sujet sain, souris) • NFkB: inhibition de l’apoptose ( role des IAPs et t 11-18) • Bcl10 (t 1-14) Active NFkB • Mutation de Fas (20%) • Cyclin D1 (MCL) et Pax 5 (Lymphoplasmocytaire) High grade NHL • Role de Bcl6 (3q27) – Association à la prolifération – Relation avec c-myc – Bon pronostic • Autres anomalies – – – – – Rb (perte dans MDH= diminution CR) Cyclines D3 et D4 Altération de P16 (délétion = agressivité) Anomalies de P53 et de MDM2 Altération de p27 Physiopathologie des Hémopathies Lymphoïdes B Malignes Origine cellulaire physiologique des lymphoproliférations B Bone Marrow Other origins ? Peripheral Blood SPLEEN AID activity? T- INDEPENDENT RESPONSE Other origins ? TI-antigen Marginal zone Apoptosis Plasma cell SHM ? ‘Reactive’ BCR SHM CSR ? T2 T1 Immature B T1 ‘Low tonic’ signal ‘Active’ BCR signal Transitional B FO T1 MZB IgM ‘Memory’ MZB FM Follicle Peyer’s patches or other MALTs… Mature naïve B cell Other origins ? B Perifollicular zone CD5+ Pre-plasma memory B cell Short-lived plasma cell IgG, A, or E TD-antigen Germinal Centre B Apoptosis Primary follicle cb cb cb cb cb cb Long-lived plasma cells cb cc FO FO Positive selection cc cc B B CSR B SHM Secondary follicle Bystander T cell help CD40/CD40L + Cytokines Switched memory B IgG, A, or E PERIPHERAL LYMPHOID ORGANS IgM Secondary GC Ag-independent mode AG RECALL Ag-dependent mode T- DEPENDENT RESPONSE Short-lived plasma cell Origine cellulaire physiologique des lymphoproliférations B Bone Marrow Other origins ? Peripheral Blood SPLEEN AID activity? T- INDEPENDENT RESPONSE Other origins ? TI-antigen Marginal zone Apoptosis ALL Plasma cell SHM ? ‘Reactive’ BCR CSR SHM ? T2 T1 Immature B T1 MZB MALTL ‘Low tonic’ signal ‘Active’ BCR signal Transitional B IgM ‘Memory’ MZB FM SMZL Follicle MM FO T1 SLVL DLBCL Mature naïve B cell CLL B Perifollicular zone Peyer’s patches or other MALTs… Other origins ? CD5+ MCL NMZL Pre-plasma memory B cell Short-lived plasma cell IgG, A, or E TD-antigen CLL Germinal Centre HL B Apoptosis Primary follicle cb cb cb cb cb cb Long-lived plasma cells cb cc FO FO Positive selection cc cc B B FL Secondary follicle BL Bystander T cell help CD40/CD40L + Cytokines Switched memory B IgG, A, or E B SHM CSR DLBCL PERIPHERAL LYMPHOID ORGANS IgM Secondary GC Ag-independent mode AG RECALL Ag-dependent mode T- DEPENDENT RESPONSE Short-lived plasma cell Physiopathologie des Lymphoproliférations B - Herbicides - Pesticides - Solvants organiques - Facteurs alimentaires -Immunosuppresseurs Altérations génétiques Instabilité de l'ADN Mutations ponctuelles, insertions, délétions ... Altérations chromosomiques (réarrangements …) Modifications microenvironnementales Croissance et/ou survie cellulaires Altération de la matrice Angiogénèse Cytokines Cellules inflammatoires Déficits Immunitaires Oncogènes Cyclines/Cdk/rb Gènes suppresseur de tumeur (perte d'hétérozygotie) Facteurs de transcription Transduction du signal Agents Infectieux - Mimétisme - Stimulation antigénique Sécrétion par les cellules tumorales de substances immunosuppressives Etapes de progression tumorale/pré-tumorale Lymphomagénèse associées à la dérégulation d’au moins 6 grands groupes fonctionnels 1. Différenciation 2. Cycle Dérégulation fonctionnelle peut être due à: la dérégulation d’1 seul « master » oncogene/ts (rare) 3. Apoptose 4. Prolifération 5. Auto-renouvellement La coopération de multiples dérégulations d’oncogènes et suppresseurs de tumeurs (1 ou + par fonction) 6. Instabilité génomique Acquisition du phénotype tumoral en multiples « hits » et autant d’étapes de sélection « Darwinienne » et/ou d’enchainements causatifs étape 2: dérégulation apoptose étape 1: dérégulation du cycle étape 4: instabilité génomique étape 3: acquisition capacité autorenouvellement étape 5: arrêt différenciation étape 6: prolifération étapes x y: rechute Micro-environnement tumoral Le microenvironnement dans le modèle lymphome folliculaire MSC FRC FL tardif DLBCL MSC T TFH FDC T TFH T FL précoce FRC FDC Bajénoff, 2007 Micro-environnement tumoral Le microenvironnement dans les lymphomes folliculaires – Interactions cellulaires fonctionnelles MSC FDC TFH FRC Treg T8 NKTgd Niche tumorale Rôle du compartiment de soutien Interactions avec le système immunitaire Micro-environnement tumoral CXCR5 ICOS Interactions moléculaires au sein du ganglion normal ICOSL CD40 Follicular B cell CXCR5 CXCR4 TNF LT12 LT3 IL-6 CXCL13 CXCL12 Clusterin 8D6 HGF CD54 TNF-R CD106 Follicular dendritic cell Q: Différentes cellules stromales pour différents types de lymphomes ? Facteurs impliqués dans le dialogue en fonction du type de lymphome et de son environnement? Quid du lymphome du manteau? de la zone marginale? du lymphome T? Voies de signalisation et lymphomagénèse Les voies complexes de signalisation constituent des cibles fréquentes de dérégulation dans l’oncogénèse, et donc également des cibles de choix pour le développement de nouvelles thérapie Exploitation par les signalisateurs pour le développement de molécules inhibitrices Régulateurs proximaux sérine thréonine kinase ex : PKC tyrosine kinase ex : Src M A P K M A P K P I 3 K ERK p38 Akt m T O R c a t é n i n e N F k B Facteurs transcriptionnels prolifération survie motilité réparation Signalisation intracellulaire Phospholipases et seconds messagers lipidique : DAG, PIP Physiopathologie des Lymphoproliférations B Malignes • Facteurs génétiques • Facteurs environnementaux La théorie du Multi Hit Process Cellule maligne agressivité Cellule normale Et1 Et2 Et : événement transformant Etn Etn+x Hémopathies Lymphoïdes B Malignes Facteurs Génétiques Lymphoproliférations et facteurs génétiques Formes familiales Déficits Immunitaires primitifs : - Déficit commun variable - Syndrome hyper IgM - XLP ou syndrome de Purtilo - Wiskott-Aldrich - Ataxie télangiectasie (T ++) - Chediak-Higaschi - SCID Défauts primitifs (et acquis) de l'apoptose - ALPS ( Fas, Fas ligand, caspase 10, 8…) Lymphoproliférations B et Anomalies génétiques Primitives et/ou acquises - Instabilité ADN - Mutations ponctuelles, insertion, délétion - Altérations chromosomiques (réarrangements…) Apoptose (Rappel) Ligand de Fas Type II Fas Caspase 8 ou caspase 10 Mitochondrie Caspase 3 Mort cellulaire par apoptose Syndromes Autoimmuns Lymphoprolifératifs : ALPS Type 1 - 1a : mutation du gène Fas - 1b : mutation du gène du ligand de Fas Type 2 - Mutation du gène caspase 10 Type 3 - Autres (caspases 8,….) ALPS Syndrome Lymphoprolifératifs Autoimmuns Infections dans certains cas Lymphoproliférations bénignes et/ou malignes Tumeurs solides ? Autoimmunité Vascularite Facteurs environnementaux Exposition aux toxiques : benzène, pesticides, herbicides, solvants organiques Facteurs alimentaires ? Rôles des médicaments : - Chimiothérapie - Traitements immunosuppresseurs # Diverses maladies auto-immunes et systémiques # Transplantations d'organes et greffes de tissus Agents infectieux - Virus : Epstein-Barr Virus (EBV) HHV8/KSHV HCV HIV1 (?) - Bactéries : Hélicobacter pylori, campylobacter jejuni - Plasmodium, cryptosporidium Lymphomagénèse et infection Transformation directe: rôle direct de l’agent infectieux (en général virus) dans la transformation tumorale - Expression membranaire d’oncogènes viraux mimant des récepteurs d’activation ou de survie (CD40, BCR) - Expression d’oncogènes viraux interférant avec les voies signalisation - Expression d’oncogènes viraux interférant avec les effecteurs en aval (cycle/réplication..) - Instabilité génomique - Acquisition de 2nd hits variés - Lymphomes hétérogènes (HIV, EBV..) Infection induit une ou plusieurs étapes de la lymphomagénèse Lymphomagénèse et infection Lymphoprolifération drivée par l’Ag : une nouvelle approche thérapeutique rôle indirect de l’agent infectieux Instabilité génomique intrinsèque (AID) inflammation-dépte (ROS) - pas nécessairement lymphotropique - ni transformant - ni oncogénique 2nd hits Phase Ag-indépendante (résistant antibiothérapie) Phase Ag-dépendante (sensible antibiothérapie) Infection chronique Réaction auto-immune Lymphoproliferation Réponse T-indépendante Anti auto-Ag cross-réactivité (HCV RF) inflammation (HP gastrite) type MZL/MALTL Pas spé contre agent infectieux initial Chronic gastritis Ex: H Pylori infection Gastric autoantigens Cytokines TFH MZ B cell Réponse T-indépendante ? Lymphome MALT Lymphoma Lymphomagénèse et infection Antigen-driven lymphoprolifération: Intégration des réponses TI/TD ou réponses parallèles avec cinétiques distinctes (TI>TD) Instabilité génomique intrinsèque (AID) inflammation-dépte (ROS) 2nd hits Phase Ag-dépendante (sensible antibiothérapie) Infection chronique Réaction auto-immune Phase Ag-indépendante (résistant antibiothérapie) Lymphoproliferation Réponse T-indépendante Anti auto-Ag inflammation (HP gastrite) cross-réactivité (HCV RF) Réponse prolongée « Bystander T-cell help » Réponse T-dépendante contre Ag infectieux Lymphome type MZL/MALTL Pas spé anti-agent infectieux initial Lymphoproliferation Lymphome « opportuniste » type GC (FL/DLBCL) pas nécessairement contre Ag infectieux Infection à EBV • Infection 90% de la population • Famille des herpes virus • Persistance sous forme d’épisomes exprimant EBNA1 (pas de contrôle T) et latence 0 (LMP2+, EBER+) • Nombreuses protéines. • Transformation nécessite d’autres facteurs Hémopathies Lymphoïdes B associées à l'EBV • LNH B de Burkitt • LNH B à grandes cellules (Syndrome de Richter +) • LNH T (certains) • LNH NK et TNK (Médiofaciaux) • LNH B associés à une immunodépression (acquise ou congénitale) • Maladie de Hodgkin (une fraction : selon âge, conditions socio-économiques, association à VIH1) Lymphoproliférations chez le transplanté d’organes ou de tissus • • • • • Proliférations lymphoïdes hétérogènes Début précoce : - Prolifération polyclonale polymorphique - Proliférationmonoclonale monomorphique Début tardif Sites extra-nodaux Association forte à : - immunosuppression (mismatch HLA, ATG, OKT3) - EBV (primo-infection +++) Lymphome de MALT • Isaacson (1983) • LNH indolent • Localisation extranodal – Estomac (70%) – Poumons (14%) – Œil (12%) • Lésion lympho-épithéliale • 7-8% des LNH • Association Hélicobacter Pylori Hélicobacter Pylori • Dans culture, HP permet la croissance des cellules • Processus Ag driven • Rôle des cellules T, – si déplétion T pas de prolifération – Lymphocytes T stimulent les cellules B par la voie CD40 – Existent seulement en intra-tumorale • Activation chronique par HP= anomalies génétiques et émergence de cellules B Tumorales. • Éradication par traitement antibiotique ( 75% de RC) Lymphome Gastrique de MALT IL8, IL17 Helicobacter Pylori (HP-NAP, Cag A, Vac A) Gastrite chronique : Lymphocytes T spécifiques de la souche de HP Infiltration massive par des PMN, macrophages Lymphocytes Lymphocytes B Lymphoprolifération B Inhibition des lymphocytes T (Vac A) Expansion B clonale (cellules autoréactives ?) LNH de Malt de bas grade dépendant de HP t (11;18) (q21;q21) : IAP2 - MLT1 Trisomie 3 LNH de Malt de bas grade indépendant de HP t (1;14) (p22;q32) Trisomie 3, 7, 8, 12 et 18 Mutation de P53 LNH de Malt de haut grade Antibiotiques Hémopathies Lymphoïdes B associées au SIDA • • • • • • • LNHB Burkitt et "Burkitt like" LNHB à grandes cellules LNHB immunoblastique LNHB primitif du cerveau Maladie de Castlemann (HHV8) LNHB des séreuses (HHV8 / EBV) Maladie de Hodgkin (EBV +++) Rarement : LNH de Malt, folliculaire, monocytoïde, à petites cellules Lymphoproliferations associées à HCV Lymphomes Non Hodgkiniens : - Immunocytomes - Lymphome de la zone marginale Rôle de la protéine HCV E2 E2 CD81 + ? B B HCV Activation Stat3 Activité RF Anti-E2 ? Expansion clonale B bcl2 t(14;18) LNH B Mutations (HC, bcl6, p53 Caténine) Autre mécanisme • Role de l’organisation spatiale dans la lymphomatogénese – Loci proches et au centre du noyau permet la survenue de translocation – Loci à la périphérie, pas de translocation – Spécifique des cellules B Lymphomatogénèse • Role majeur du BCR. • Différentes étapes dans des structures histologiques spécifiques. • Souvent oncogènes sous le contrôle du locus des Ig apres translocation. • Mutations hypersomatiques touchent non-Ig. (ex mutations de Fas). • Pas de mutations pour les cellules T. • Role de BCR: nécesité du Bcr pour le signal de survie. • Antigène activation: HCV, HP. • Role du microenvironnement: Cellules T, Cellules Stromales…. • Facteurs environnementaux, déficits immunitaires. • Importance pour les traitements futurs. Conclusion Lymphomes Non Hodgkiniens B Réarrangements chromosomiques - Lymphome folliculaire t (14 ; 18) (q32 ; q21) - Lymphome diffus à grandes cellules B HC* / bcl2 t (3 ; 14) (q27 ; q32) - Lymphome de Burkitt t (8 ; 14) (q24 ; q32) t (8 ; 22) (q24 ; q11) t (2 ; 8) (p11 ; q24) bcl6 / HC - Lymphome de MALT t (11 ; 18) (q21 ; q21) t (1 ; 14) (p22 ; q32) - Lymphome de la zone du manteau t (11 ; 14) (q13 ; q32 ) HC or LC** / c -myc AIP2 / MLT1 bcl10 / HC bcl1 / HC HC : Chaîne lourde Ig ; LC : Chaîne légère Ig Lymphome Folliculaire t (14 ; 18) ( q32 ; q21) Antigène del 6q, trisomie 7, 12, 18, 21 bcl6 and p53 mutations t (14 ; 18) ProB DjH PreB B Immature B Mature naïfs VH DH J H Zone claire Zone sombre Moelle osseuse Centre Germinatif Physiopathologie des Lymphoproliférations B - Herbicides - Pesticides - Solvants organiques - Facteurs alimentaires -Immunosuppresseurs Altérations génétiques Instabilité de l'ADN Mutations ponctuelles, insertions, délétions ... Altérations chromosomiques (réarrangements …) Modifications microenvironnementales Croissance et/ou survie cellulaires Altération de la matrice Angiogénèse Cytokines Cellules inflammatoires Déficits Immunitaires Oncogènes Cyclines/Cdk/rb Gènes suppresseur de tumeur (perte d'hétérozygotie) Facteurs de transcription Transduction du signal Agents Infectieux - Mimétisme - Stimulation antigénique Sécrétion par les cellules tumorales de substances immunosuppressives
