Les Virus des Hépatites A, B, C, D et E Emmanuel GORDIEN (M.D – Ph.D) Laboratoire de Bactériologie, Virologie, Hygiène Associé au CNR des Hépatites B, C et Delta CH&U Avicenne – BOBIGNY Hépatite Virale : Processus Inflammatoire du Foie lié à un Virus Le Foie L e F o i e Vascularisation du Foie Veines sus-Hépatiques FOIE Veine cave inférieure Aorte Artère hépatique Veine porte Intestin grêle Veine cave inférieure Gros intestin Fonctions du Foie (1) • Métabolisme des Glucides, Protéines, Lipides : – Homéostasie du Glucose : Glycogenèse – Néoglycogenèse - Glycolyse – Synthèse des protéines plasmatiques : • Albumine, globulines, … • Facteurs de Coagulation (Vitamine K dépendant) • Catabolisme des Acides Aminés – Synthèse des Lipoprotéines Complexes • Estérification des Acides Gras • Liaison des Triglycérides, du Cholestérol Fonctions du Foie (2) • Détoxication de nombreuses drogues • Synthèse de la Bile – Principale voie d’excrétion des métabolites toxiques, du cholestérol et des déchets lipidiques – Digestion et à l’absorption efficaces des graisses – Stockage dans la vésicule (jeûne) Le Lobule Hépatique Unité Fonctionnelle du Foie Hépatite Virale : Processus Inflammatoire du Foie lié aux Virus A, B, C, D et E Les Virus responsables d’Hépatites • Ont un tropisme pour l’Hépatocyte • Appartiennent à des familles différentes • On distingue : – 5 Virus des Hépatites A, B, C, D et E +++ • Il existe des Récepteurs Spécifiques sur l’Hépatocyte • Des facteurs spécifiques du Foie sont nécessaires à la réplication des virus (VHB, VHC,…) – Autres virus responsables d’atteintes hépatiques : • Herpès Virus (CMV, EBV, Simplex) • Adénovirus ; Dengue • Cocksakie – Virus Non A – Non E ? Les 5 Virus des Hépatites A B C D E Famille Picorna Viridae Hepadna viridae Flavi viridae Satelitte Picorna Viridae Genre Hépato virus Hepadna virus Hépaci virus Delta virus Calici virus Espèce VHA VHB VHC VHD VHE Acide Nucléique ARN(sb+) ADN (pdb) ARN(sb+) ARN(sb-) ARN(sb+) Symétrie Icosaèdre Icosaèdre Icosaèdre Sphère Icosaèdre Non Oui Oui Oui* Non Enveloppe Virus responsables d’Hépatites A Source des virus Selles Modes de Orale - fécale transmission Infection chronique Prévention non B C D E Sang / Produits dérivés du Sang Fluides corporels Selles Percutanée et per Muqueuse Orale - fécale oui oui oui non Immunisation Immunisation Dépistage DSB Immunisation Précaution des passive (Igs) passive (Igs) Comportements passive (Igs) eaux de boissons Vaccination Vaccination en zone d’endémie à risque Vaccination Comportements à risque Les Hépatites Virales : Enjeu de Santé Publique Mondial majeur 2 Milliards de sujets infectés par VHB 400 millions de porteurs chroniques du VHB 10 à 20 millions porteurs chroniques du VHD 170 millions de porteurs chroniques du VHC 2 millions de décès par an Évolution vers la cirrhose et l’hépatocarcinome x 200 Le Virus de l’Hépatite Virale B (VHB) L’Hépatite Virale B : Problème de Santé Publique Mondial Majeur >2 milliards personnes exposées 360 millions porteurs chroniques Cirrhose et Carcinome hépato-cellulaire 520.000 morts par an Prévalence de l’AgHBs ≥ 8% (Forte) = 2-7% (Moyenne) < 2% (Faible) Résistance à l’Interféron Virus résistant aux antiviraux Virus échappant à la réponse vaccinale Modes de Transmission du VHB Verticale Mère - Enfant Horizontale Enfant -Enfant Famille Personnes à Personnes Parentérale Sexuelle +++ Transfusion Activité Professionnelle Homo ou Hétéro Toxicomanie I.V ou I.N Tatouage ; Piercing Nosocomiale Accidents d’Exposition au Sang Histoire Naturelle Régions Non Endémiques Régions Endémiques Infection : âge adulte Infection périnatale Chronicité : 5% Chronicité : 80% Cirrhose : 20 - 40 % Cirrhose : 20 - 40 % ? CHC : 3 - 5% CHC : 20 - 50% Le Génome du VHB Virus à ADN de 3,2Kb partiellement double brin Régions spécifiques Enhancer 1 et 2 DR1 et DR2 TATAA 4 ORF Chevauchantes Enveloppe AgHBc, AgHBe Polymérase HBX Enhancer 2 Enhancer 1 Réplication du Génome du VHB par Rétrotranscription Polymérase du VHB (rt1) (rt344) Particules Virales Variable 17-25 nm Enveloppe Core L Protéine du Core S M Polymérase Domaine TP Lipid e Hsc 70 Génome 42 nm 1012 particules/ml de sang Immunologie Immunopathologie Élimination immune des Hépatocytes infectés Turn-over Cellulaire Hépatocyte Non infecté NK Perforine Granzyme Fas Cytokines ? Anticorps Neutralisants NKT CTL Cytokines IFN/ TNF / IL12 HBc/e Ag HBV ADNccc Hépatocyte infecté HLA I Élimination de l’AgHBs Hépatocyte Non infecté Marqueurs d’infection Résolue : Ac anti-HBs ALAT = N Foie = rémission Hépatocytes infectés xx AgHBs Oncogenèse ADNccc Mutants d’Echappement Infection Occulte Portage inactif de l’AgHBs Marqueurs d’infection ALAT = N Foie = rémission Hépatocyte Non infecté AgHBs ADNccc Hépatocyte infecté Oncogenèse Réactivation Virus Sauvage ou Mutant Pré-core Histoire Naturelle de l’infection VHB Résolue Anti-HBc Totaux Concentration Relative AgHBs Anti-HBc IgM Anti-HBs Anti-HBe AgHBe Seuil de détection 109 102 1 ADN VHB 2 3 4 5 6 7 8 Durée d’exposition (mois) 9 10 Concentration Relative Histoire Naturelle de l’infection VHB Résolue (2) Anti-HBc Totaux AgHBs Anti-HBc IgM Anti-HBs Anti-HBe AgHBe Seuil de détection 109 102 1 ADN VHB 2 3 4 5 6 7 (Mois) Années Durée d’exposition (Années) Diagnostic de l’infection VHB Diagnostic direct Mise en évidence du virus ou ses constituants – – Détection de protéines virales (ELISA +++ ) • AgHBs : marqueur de l’infection VHB • AgHBe : marqueur de la réplication du virus sauvage Détection du génome viral +++ (PCR, TMA, hybridation) marqueur de réplication des virus sauvages et mutés Diagnostic indirect Réaction immunologique de l’organisme +++ Ac anti-HBc IgM : infection aiguë Ac anti-HBc Totaux (IgG) : marqueur le plus fidèle +++ Ac anti-HBe : premier verrou immunologique Ac anti-HBs : marqueur de résolution et de protection Algorithme Diagnostique (1) D’emblée 2 marqueurs (techniques ELISA) AgHBs Ac anti HBc (IgG) Neg Neg Négatif Algorithme Diagnostique (2) AgHBs Ac anti HBc (IgG) Neg Pos Ac anti HBs Pos > 12 mUI/ml Infection Résolue Immunité assurée Pos [8, 12] mUI/ml Infection Résolue ? Immunité assurée ? Négatif Ac HBc Isolé Algorithme Diagnostique (3) AgHBs Ac anti HBc (IgG) Positif IgM anti HBc AGE ACE ADN VHB Pos Pos Neg > 2 . 105 UI/ml Hépatite Aiguë Neg Hépatite Active Hépatite Chronique Algorithme Diagnostique (4) AgHBs Ac anti HBc (IgG) Positif AGE ACE Neg Pos ADN VHB ADN VHB [< 2. 103 –2. 104 UI/ml] ADN VHB [> 2. 105 UI/ml] Portage Inactif HCA à Mutant pré core Mutants VHB Déterminant “a” Pré-S2 Pré-S1 Pol Pré-C la plus fréquente (PC) Promoteur Basal du Core (BCP) 0/3221 Brin(-) 3,2kb Brin(+) 2,4kb Mutants AgHBs Mutants Transcriptase Inverse Mutants pré-CC (Réponse anti-HBe) (Vaccin et Ig anti-HBs) C TATAA U5-like DR1 Enh1 Enh2 DR2 Pré-C X S Motifs T.I (Antiviraux) Dynamique de sélection des “Mutants de Résistance” ADN VHB (log UI/ml) 9 ALAT ( N) Pression Immunitaire /Médicaments 8 7 6 5 4 2. Rebond virologique 3. Rebond biochimique Nadir 10 8 6 1 log 4 2 1. Mutation Temps 4. Aggravation des lésions hépatiques 12 Réactivation VHB : Définition • Chez patient Immunodéprimé – Porteur inactif de l’AgHBs – Anticorps anti-HBc isolé – Infection ancienne résolue • Augmentation de la charge virale VHB – 1 log du nadir de Charge virale – Ou importante : > 2.105 UI/ml • Absence d’infection A, C, D, ou E et d’infection systémique intercurrente Tableaux Cliniques de l’infection VHB Tableaux Cliniques (1) Hépatite Résolue 1. ATCD hépatite aiguë ou Chronique 2. AgHBs Négatif 3. Présence AcHBc et 4. AcHBs 10UI/L 5. ALAT / ASAT normales Anticorps anti-HBc Isolé 1. ATCD hépatite aiguë ou Chronique 2. AgHBs Négatif 3. Présence AcHBc 4. AcHBs < 10UI/L 5. ALAT / ASAT normales Hépatite Chronique (Virus sauvage) 1. 2. 3. 4. AgHBs > 6 mois AgHBe (+) et Ac anti HBe (-) HBV DNA > 2.105 UI/ml ALAT / ASAT ou Nale 5. Anapath : > F2 ou < F2 Porteur Inactif 1. 2. 3. 4. 5. AgHBs > 6 mois AgHBe (-) et Ac anti HBe (+) HBV DNA < 2.103/4 UI/ml ALAT / ASAT normales Anapath : signes modérés <F2 Tableaux Cliniques (2) Hépatite Chronique (Mutant pré C-C) Hépatite Chronique (Mutant polymérase) 1. AgHBs > 6 mois 2. AgHBe (-) et Ac anti HBe (+) 1. AgHBs > 6 mois 2. AgHBe (-/+) et Ac anti HBe (-/+) 3. Nadir HBV DNA 1 log UI/ml ou HBVDNA> 2.104 UI/ml 3. Nadir HBV DNA 1 log UI/ml ou HBVDNA> 2.104 copies/ml 4. PCR – Séquençage pré C : Mutations spécifiques 4. PCR – Séquençage RT/ Pol : Mutations spécifiques Hépatite chronique ( Mutant AgHBs) 1. AgHBs Négatif 2. AgHBe (-) et Ac anti HBe (+) 3. HBV DNA Positif 4. PCR – Séquençage Env. : Mutations spécifiques Hépatite B Occulte 1. 2. 3. 4. ATCD hépatite aiguë ou Chronique AgHBs Négatif AgHBe (-) et Ac anti HBe (-/+) Ac anti HBc et anti HBs (-/+) 5. PCR Ultrasensible : Positive Tableaux cliniques (3) Réactivation à virus sauvage 1. 2. 3. 4. 5. 6. ATCD hépatite aiguë ou Chronique AgHBs positif AcHBc IgM positif AgHBe Positif HBV DNA Positif ALAT / ASAT Réactivation à virus mutant pré C 1. 2. 3. 4. 5. 6. ATCD hépatite aiguë ou Chronique AgHBs positif AcHBc IgM positif AgHBe Négatif et AcHBe Positif HBV DNA Positif ALAT / ASAT Thérapeutiques Anti-VHB • Immunomodulateurs – Interféron (recombinant; pégylé) – Thymosin 1 – Vaccins Thérapeutiques • Agents antiviraux (Analogues nucléos(t)ides) – – – – – – Lamivudine Adéfovir dipivoxyl Entécavir Emtricitabine Famciclovir Autres … • Combinaisons Mutants Vaccins contre l’Hépatite Virale B Protéines Produits des gènes C° (AgHBs) Vecteur Cible S 10 mg S. Cerevisiae Nourrissons, enfants Adolescents < 15 ans Adultes (1989) S + pré S 20 mg Cellules CHO Nourrissons, enfants Adultes HBVax S 5 mg 10 mg TWINRIX (VHA+VHB) S 40 mg 10 mg INFANRIX S 10 mg S. Cerevisiae Nourrissons, enfants Adolescents < 15 ans Adultes Dialysés Nourrissons, enfants Adolescents < 15 ans Adultes Nourrissons HEXAVAC (Hexavalent) S 5 mg S. Cerevisiae Nourrissons Nom Engerix B (1989) Gen Hevac B (1997) 20 mg S. Cerevisiae S. Cerevisiae Vaccination Anti VHB et S.E.P • Apparition de manifestations neurologiques et auto-immunes au décours de vaccination SEP; AR; Lupus; Diabète; … • Etudes prospectives: pas de confirmation +++ • Existe-t-il un risque ??? • Mécanismes éventuels : – Auto-immunité : mimétisme moléculaire – Complexes immuns – Contexte génétique (CMH, Hérédité, …) – … • Aucun cas décrit chez nourrisson et enfant +++ Journal of Autoimmunity, 2000 ;14 :1-10; N Engl J Med. 2001 Feb 1;344(5):319-26