partie 2 du cours de biochimie : methodes d`etude et d
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BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté PARTIE 2 DU COURS DE BIOCHIMIE : METHODES D’ETUDE ET D’ANALYSE DES BIOMOLECULES BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 2 : Le broyeur à hélice (ultra turrax) BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 3 : Le phénomène de diffusion (ex :glucose) Flux net 20 mmol/l A 0 mmol/l B Barrière perméable au glucose A B Molécule de glucose Flux net ………… 10 mmol/l 10 mmol/l A B BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 4 : principe de l’extraction solide – liquide par contre - courant Solvant Échantilon épuisé Solvant saturé Échantillon solide BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 4 : principe de l’extraction solide – liquide par contre - courant Solvant Échantilon épuisé Solvant saturé Échantillon solide BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 5 : principe de l’extraction liquide - liquide BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 5 : principe de l’extraction liquide - liquide BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 6 : centrifugation et ultracentrifugation Animation sur la centrifugation BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 7 : principe de la dialyse protéine Membrane semi- Sels minéraux perméable (boudin à dialyse) Eau distillée BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 7 : principe de la dialyse protéine Membrane semi- Sels minéraux perméable (boudin à dialyse) Eau distillée BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Animation sur la chromato d’exclusion Document 8 : chromatographie échangeuse d’ions 1. ……………………………………… Séparation de l’acide aminé ……………………………………… d’intérêt des autres acides ……………………………………… ……………………………………… aminés ……………………… Mélange d’acides aminés colonne Résine portant des charges + aa chargé + aa non chargé aa fortement chargé - 2. ………………………………… ………………………………… Elution : récupération de ………………………………… l’acide aminé d’intérêt ………………………………… ……………………… Liquide ……………………… ……………………… d’élution ……………………… ……………………… ……… -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- -+ +- BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 9 : chromatographie sur colonne BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 10 : chromatographie sur couche mince (CCM) cuve Sens de migration du solvant Plaque chromatographique dépôts solvant Animation sur la CCM BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 11 : bilan sur les chromatographies NOM PRINCIPE TYPE phase fixe / phase mobile ADSORPTION séparation grâce à des liaisons faibles qui se font entre les molécules et les différentes phases solide/liquide Colonne ou CCM ECHANGEUSE D'IONS séparation grâce à des liens entre groupements de charges opposées solide/liquide Colonne ou CCM DE PARTAGE séparation selon la solubilité des molécules entre les 2 phases liquide/liquide ou liquide/gaz Colonne ou CCM EXCLUSIONDIFFUSION séparation selon la taille des molécules (les plus petites sont retenues plus longtemps) solide/liquide Colonne AFFINITE répartition grâce à une reconnaissance spécifique entre la phase fixe et la molécule à purifier (complémentaires) solide/liquide Colonne MATERIEL BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 12 : exemple d’électrophorèse d’acides aminés + aa chargé– aa non chargé aa fortement chargé + - BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 13 : principe des dosages volumétriques Ca Va = Cb Vb On utilise souvent la formule ....................... Il existe plusieurs types de dosage volumétriques en fonction du type de réaction chimique utilisée : dosage acido-basique, dosage rédox,... (cf. cours de chimie) BP Préparateur en pharmacie - Lycée Liberté Document 14 : principe de fonctionnement d’un spectrophotomètre
