Intitulé de l’UE : ATELIER DE CYTOMETRIE EN FLUX Code de l’UE : 4V251 Responsable de l’UE : Sébastien ANDRE, Maître de Conférences Mel : [email protected] Encarnita MARIOTTI-FERRANDIZ, Maître de Conférences Mel : [email protected] Secrétariat : Célina SARRAZIN Tél. : 01 44 27 88 85 Mel : [email protected] 1. Descriptif de l’UE Volumes horaires globaux (CM, TD, TP, stage, autre) : 35 h (9 h TD + 26 h TP) Nombre de crédits de l’UE : 3 ECTS Mention de master où l’UE est proposée : Mention "Biologie Moléculaire & Cellulaire" Semestre où l’enseignement est proposé : Semestre 2 du Master Effectifs prévus : 20 2. Présentation pédagogique de l’UE a) Objectifs de l'Unité d'Enseignement Cette unité d’enseignement a pour objectif de former les étudiants à la démarche scientifique expérimentale : définir un problème, rechercher et mettre en œuvre les méthodes expérimentales, analyser, interpréter et discuter des résultats. Elle vise à familiariser les participants à différentes techniques et technologies couramment utilisées en immunologie, dont la cytométrie en flux, pour l’analyse de l’activité du système immunitaire et à présenter à travers une démarche expérimentale des notions d’immunologie fondamentale. La formation acquise par les étudiants sera évaluée au travers de leur aptitude à : - proposer des expériences pertinentes en réponse à une problématique scientifique choisie, - adapter un protocole et mettre en place une démarche expérimentale - interpréter, analyser et discuter ses résultats ; les intégrer dans un projet commun et les synthétiser sous la forme d’une présentation orale. b) Thèmes abordés La liste non exhaustive des thèmes pouvant être abordés est donnée ci-dessous à titre indicatif : - Analyse du rôle des LT CD4 dans les différents stades de la réponse cellulaire LT CD8 : • migration des LT CD8, • mécanismes effecteurs de la réponse LT CD8 (cytotoxicité, production de cytokines, …), • mécanismes de régulation de la réponse immunitaire (apoptose, établissement d’une mémoire, …). - Analyse d’antigènes cellulaires à partir de splénocytes murins (phénotypage : applications en immunologie et immunopathologie). - Mise en évidence et quantification de la prolifération et de l’expansion de lymphocytes T murins in vitro et in vivo (CFSE et BrdU). - Evaluation de l’apoptose physiologique in vivo de thymocytes murins et de l’apoptose in vitro induite par une activation polyclonale d’un thymome murin. c) Organisation pédagogique L’atelier se déroulera sur une semaine à temps plein sous la forme de courtes présentations théoriques, suivies de travaux pratiques et de démonstrations de fonctionnement d'un cytomètre en flux (analyseur). Des outils informatiques seront mis à disposition pour l’analyse et la mise en forme des résultats. L’évaluation prendra en compte la participation active de chaque étudiant, le contenu du cahier d’expérimentation individuel dans lequel sera consigné le décours des expériences réalisées, et la présentation orale des résultats obtenus qui sera réalisée le dernier jour de l’atelier. d) Pré-requis - Connaissances de base en immunologie fondamentale, en particulier les mécanismes de différenciation des répertoires lymphocytaires et d'activation des réponses immunitaires. - Initiation à la manipulation des techniques de base en biologie cellulaire et moléculaire. - Connaissances de base en cytométrie en flux. 3. Equipe pédagogique Animateur de l’équipe : Véronique Matéo et Sébastien André. Travaux Dirigés / Travaux Pratiques : Sébastien André, Jacqueline Loeper, Véronique Matéo et Sophie Sibéril.