UE Endocrino/Gynécologie – Biochimie Chapitre 2 : Mode d’Action des Hormones Mode d’Action des Hormones I. Généralité Hormone = Molécule $ par un Tissus, Secrétée (Passage ds le Sang = Voie Endocrine) Action sur un ou plusieurs ₵ d’un autre tissu 1. 2 Grands Types d’Hormones (et de Mécanismes) Ne Pénétrant pas ds la ₵ o Nécessité d’un Sst de « Transduction du Signal » = Sst « On/Off » o Liaison avec Récepteur Membranaire Spécifique o Interprétation de la Stimulation du R par des Voies de Signalisation o Effets : Cytosoliques Nucléaires (Géniques, voir exemple…) Pénètrent ds la ₵ o Action essentiellement via Récepteurs Nucléaires ± Spé o Effets Génique +++ (Mais pas que…) Rmq : Cette Distinction correspond à ↓ près (x exceptions) au caractère ± : - Hydrophile : Ne pénètrent pas ds la ₵ o Peptide : Insuline, Glucagon, Peptides Hypophysaires… o Dérivés Polaires d’Aa (Adrénaline) - Lipophile = Hydrophobe : Protéine de Transport Sg → Pénètrent ds la ₵ o Hormone Stéroïde o Hormones Thyroïdienne o Molécule assimilées à des Hormones : Vit D, Rétinoïdes… Présence d’exception … 2. Transport Plasmatique des Hormones Schématiquement Peptidique et Dérivés d’un seul Aa (Adrénaline, Na…) = Hydrophile = Libres o Sauf Exceptions (+ Hydrophobe) : GH → lié à 50% à GHBP IGFs (Insulin Like Growth Factors) → lié à > 95% à IGFBPs (1-6) Stéroïdes, Hormones Thyroïdienne, Vit D, Rétinoïdes = Hydrophobe = Liées à des Protéines de Transport o Non Spécifique : Albumine o Spécifique : Glucocorticoïde : GBP H. Sexuelles : SBPs H Thyroïdienne : TBG + Transthyrétine (Préalb.) Vit D : DBP Rétinoïde : RBP Equilibre Hormone Liée / Libre Forme Active = UNIQUEMENT la Forme Libre + Il y a de BP – il y aura de forme active Rmq : Quantité d’Hormones Libres peut donc être affecté par des Médicaments → ex : Œstrogène => Modification TBG => Modification Métabolisme Thyroïdien 1 3. Importance de la Notion de Signal « On/Off » Mécanisme de Feed Back Annulation du Signal après un délai ± Long Mécanismes Variés o Selon les voies de Transduction o Mais Impliquant (en Général) au moins une Endocytose (Internalisation) du Complexe [Hormone + Rcpt] o Rcpt ± Recyclé à la Mb o Autres Mécanismes ± complexes Rmq : Mécanismes variés selon les Hormones et les Récepteurs Rmq : Pathologies liées à des mutations affectant les mécanismes Off = Signal Permanent II. Hormones agissant via des Récepteurs Membranaires Récepteur Couplé aux Protéines G = RCPG = R7TM o Très nombreuse Hormones Peptidiques Récepteur à Activité Enzymatique Intrinsèque o RTK (dt IGF) o Rcpt à Activité Sérine / Thréonine Kinase → Voie des SMADs (AMH… ) o Rcpt à Activité Guanylate Cyclase (ANP, BNP…) Récepteurs associés à une Tyrosine Kinase o Voie « JAK/STAT » : Leptine, Prolactine, GH… 1. Hormones couplées aux RCPG (R7TM) Très nombreuses Hormones Peptidiques UE Endocrino/Gynécologie – Biochimie Chapitre 2 : Mode d’Action des Hormones a. Structure RCPG - Segments TM = Hydrophobe +++ Fragment o N Terminal = Extra ₵r o C Terminal = Intra ₵r b. Mécanisme d’Action Interaction Ligand / Rcpt Transconformation du Rcpt Association Rcpt avec Hétérotrimère α, β, γ Echange GDP / GTP Détachement SU α (lié au GTP) → Effets sur Enzymes (Rmq : Qq Cibles pr le Couple β/γ : Canaux K+, PI3 Kinase) G αs = Activation $ AMPc : o ADH → Rétention d’eau par le Rein via Phosphorylation Aquaporine o GNRH → Stimulation $ et Sécrétion GH o GHIH → Inbition $ et Sécrétion GH o CRH → Stimulation $ et Sécrétion ACTH o ACTH → Stimulation $ et Sécrétion Cortisol o TSH → Stimulation $ et Sécrétion Hormones Thyroïdienne (Majoritaire) o FSH → Stimulation Développement Folliculaire ♀ / Spermatogénèse ♂ o LH → Stimulation Maturation et Ovulation ♀ / $ Testostérone + Spermatogénèse ♂ o PTH → Hypercalcémiante o Calcitonine → Hypocalcémiante o Glucagon → Hyperglycémiante : Stimulation libération réserve en glycogène du foie o HCG → Stimulation Différenciation ₵r G αI = Inhibtion $ AMPc o Adrénaline (Rcpt α2) o PGEs G α q/11 = Stimulation Phospholipase C β Membranaire o ADH → Vasoconstriction o TRH → Stimulation $ et Sécrétion TSH o TSH → Stimulation $ et Sécrétion Hormones Thyroïdienne (Minoritaire) o Angiotensine II → Stimulation $ et Sécrétion Aldostérone o GnRH → Stimulation $ et Sécrétion FSH et LH 3 Pour Faciliter les Echanges de GTP/GMP GEF : aide le Passage de GDP → GTP = Facilite l’Activation GAP : aide le Passage de GTP → GDP = Facilite l’Inhibition Si Atteinte = Pathologie Possible o Atteinte GAP : Ø Retour à l’Etat Initiale ou Trop Lent = Signal Trop Long o Atteinte GEF : Ralenti l’Activation c. Cibles Rmq : Toxine Pertussique = Coqueluche UE Endocrino/Gynécologie – Biochimie Chapitre 2 : Mode d’Action des Hormones 1. Activation de G α ++ Fréquent Stimulation Adénylate Cyclase ↗ AMPc Activation Protéine Kinase A o ≠ Effets Possibles : Lipolyse / Glycolyse Phosphorylation Rcpt → Internalisation (Rétrocontrôle) → Dégradation ou Recyclage Phosphorylation Rcpt Ryanodine = ↗ [Ca2+] Cytosolique Activation Canaux Calciques Mb = Entré Calcium ds la ₵ => Contraction Musculaire Effets Nucléaires Exemple : Glucagon (Hormone du Jeûne) Effet Cytosolique Rapide : o Stimulation Glycogénolyse o Stimulation Lipolyse o Inhibition Glycogénogénèse Effet Nucléaire à Long Terme : o Activation / phosphorylations Facteur de Transcription : CREB-CBP → Néoglucogenèse 5 2. Activation G αi Rare Inhibition Adénylate Cyclase ↘ AMPc Récepteur α2 de l’Adrénaline (Rmq : Récepteur β = G αs) o Inhibition Contraction ML = Vasodilatation o Inhibition Contraction Cardiaque Apéline : Action sur ₵ Endocrines : Estomac, Pancréas, Cœur… o Hypotenseur : Inhibition Vasopressine o Inhibition Sécrétion Insuline o Activation Akt : Kinase favorisant la pénétration du glucose o Activation UCP (Enzymes Mitochondriales) → Perte de Poids Rmq : Possible Effet Thérapeutique ds le Diabète de Type II → Hyper insulinémie car résistance à l’Insuline → Activation AKT : Favorise la Pénétration du Glucose Certaines Prostaglandines : Assimilées à des Hormones $ par ≠ Tissus o Dont : WAT = Anti-Lipolytique (PGE1 / PGE2) 3. Activation G αq Activation Phospholipase C β Hydrolyse PIP2 → IP3 (Inositol Triphosphate) + DAG o DAG → Apolaire ++ → Diffuse ds o IP3 → Polaire → Diffuse ds Compartiment o Fixation sur Rcpt RE = Canal Ionique Calcique o ↗ [Ca2+] Cytosolique Fixation Ca2+ / PKC : Transconformation PKC (Exposition zone Hydrophobe) + Translocation sur Activation PKC / DAG + PS (Phosphatidylsérine) + Calcium (PKC = Calcium Calmoduline dépendante) Rmq : Petite Partie du PI (1-2%) = Renouvelé rapidement → Double Phosphorylation UE Endocrino/Gynécologie – Biochimie Chapitre 2 : Mode d’Action des Hormones d. Arrêt du signal des RCPG 2 Type d’Inactivation (en général concomitant) : Désensibilisation / Phosphorylation o Kinase de la Famille des GRK → Phosphorylation R7TM o β Arestine → Fixation sur Site Phosphorylé → Découpage Hétérodimère → Interruption Signal Internalisation dépendante de la Clathrine = Endocytose o 2 Devenir Possible : Dégradation (Lysosome) Recyclage e. Pathologie Associé Résultat de Mutation Activation Constitutive du R = Rcpt tjrs actif mm en l’Ø de ligand ou d’hormone o R-Rhodopsine → Dégénérescence de la Rétine o R-LH → Puberté Précoce o R-TSH → Adénome Thyroïdien (Bénin) Activation / des Auto-Ac : o R-TSH → Hyperthyroïdie Auto-Immune (Maladie de Basedow) Inactivation des Rcpt : o R-Vasopressine → Diabète Insipide o R-ACTH → Déficience en Glucocorticoïdes o R-Ca → Hyperparathyroïdisme, Hypercalcémie o R-TSH → Hypothyroïdie Ac Inactivé : o R-TSH → Hypothyroïdie 7 2. Récepteur à Activité Enzymatique Intrinsèque a. RKT → Ex : Insuline, IGF = Insuline Like Growth Factors Insuline = Hormone + Facteurs de ↗ apparenté aux IGFs + Anti-Apoptotique 1. Structure Le Rcpt à Insuline = Dimère → Formé de 2 Parties : 2 Segments TM 2 Segment EC → Fixation Insuline 2. Mécanisme d’Action Fixation Insuline – Rcpt Phosphorylation Résidus Tyrosine de chaque Site IC + Transphosphorylation (chaque élément phosphoryle son voisin) Reconnaissance Tyrosine Phosphate Accrochage autres Protéines o IRS Phosphorylation Tyrosine IRS Accrochage de Nouvelle Protéine sur Chaque Elément Phosphorylé d’IRS o I3K o Gr2B o Protéine Shc Phosphorylation Accrochage Nouvelle Protéine → GrB2 Rmq : Tyrosine = Y 3. Effets de l’Insuline - Pénétration Glucose ds certains Tissus - Stimulation $ Lipides - Stimulation $ Protéines - Stimulation Division ₵r - Facteurs de Survie de la ₵ = Anti-Apoptotique UE Endocrino/Gynécologie – Biochimie Chapitre 2 : Mode d’Action des Hormones 4. Les Différentes Voies Voie de la PI3 Kinase = PIP3K +++ o Phosphorylation PIP3K o Phosphorylation PIP2 en 3 → PI3, 4, 5 –P3 = PIP3 o Recrutement PKB et AKT o Phosphorylation AKT par PKB = Activation AKT = Stimulation Métabolisme ₵ Voie GRb2 o Phosphorylation GrB2 o Fixation SOS sur GrB2 o Activation P21 RAS o Activation Cascade Raf, MeK, Erk o Pénétration ds Noyau = ↗ Prolifération ₵r 9 5. Atténuation du Signal - PTEN : Phosphatase → Déphosphorylation PIP3 → Inactivation PI3K - PTB1B : Phosphatase → Déphosphorylation R de l’Insuline et IRS → Retour Etat Initial → Endocytose R → DégradO ou R - Mtocr1 → Phosphorylation IRS sur Sérine et Thréonine → Inactivation IRS 6. Ex de Pathologies affectant la Voie de Signalisation de l’Insuline Acquise : Diabète de Type II Innée : Mutation Rcpt à l’Insuline = Lépréchaunisme → Rare ++, Sévère o Retard Staturo Pondéral ++ o Facies caractéristique o Hirsutisme, Virilisation, Acanthosis Nigricans o Atrophie Musculaire + Lipoatrophie o Hyperinsulinémie ++ avec Résistance à l’Insuline o Tb Majeurs de la Régulation de la Glycémie → † Très Précoce (< 2ans) UE Endocrino/Gynécologie – Biochimie Chapitre 2 : Mode d’Action des Hormones b. Récepteurs à Activité Sérine / Thréonine Kinase : Voie des SMADs → AMH - Ɛ à la Superfamille des Récepteurs au TGF-β Ne concernent que de rares Hormones → Gouvernant les Processus de Différenciation : o AMH (Hormone Anti-Mullérienne) → GP $ / ₵ de Sertoli ou Granulosa → Fertilité o Activine → GP → $ / ₵ de Sertoli ou Granulosa → ↗ $ FSH / Hypophyse o Inhibine→ ↘ $ FSH / Hypophyse 2 Types de Récepteurs (qui collaborent) → 2 Dimères : Dimère de Type I : Ø Activité Enzymatique de Base Dimère de Type II : Activité Enzymatique Sérine/Thréonine Kinase Mécanisme d’Action : Fixation Ligand sur Dimère de Type II Phosphorylation Dimère de Type I (/ le Type II) Recrutement SMAD → Phosphorylation → Dimérisation → Fixation sur Co-Activateur ou Co-Récepteur (selon les cas) Modification Transcription Rmq : Les SMAD = Médiateurs d’un Signal et Facteur de Transcription 11 c. Récepteurs à Activité Guanylate Cyclase → ANP, BNP → Catégories des « Récepteurs Enzymes » → 1 Seul Cas Connu : Récepteur des Peptides Natriurétique (Récepteur Homodimérique) o ANP, BNP : Cœur o CNP : Cerveau Le GMP Cyclique Régule ≠ Processus → Dont : o Natriurèse o Vasorelaxation o Antagoniste SRAA (VC) o Protection contre la Fibrose lié à l’HTA ou Ischémie Cardiaque → Mécanismes pas Clair Interaction avec voies Prolifératives : MAPK Inhibition de la Production de MEK Voie SMAD/TGF β Voie NFkB… Cardio-Protection + Réno-Protection + Protection contre l’Athérosclérose Rmq : + Marqué avec le CNP → Mais Effet sur Natriurèse + ↓ Application Thérapeutique Perfusion d’ANP/BNP contre la Fibrose Hypertrophique (HTA) ou ap Accident Cardiaque Ischémique Dosage Pro-BNP → Rapide, Fiable => Diagnostic Différentiel pr Dyspnée Aigue : BNP +++ → Pb Cardiaque BNP Normal → Pb Respiratoire Arrêt du Signal : Processus complexe impliquant : o le Domaine Kinase (sites pour l’ATP) o une Phosphatase qui ne serait active que sur la forme liée à l’ATP (conformation) o internalisation puis recyclage partiel des récepteurs vers la membrane (Mal Connu…) UE Endocrino/Gynécologie – Biochimie Chapitre 2 : Mode d’Action des Hormones 3. Récepteurs associés à une Tyrosines Kinases (Voie JAK/STAT) → JAK = « Janus Kinase » = « Just Another Kinase » → STAT = “Signal Transducer and Activator or Transcription” Exemple: o Prolactine o Leptine o GH… Mécanismes d’Action Fixation Ligand Transconformation Rcpt → Transconformation JAK (Kinase) → Activation JAK → Phosphorylation Résidus Tyrosine Fixation STAT sur Résidus Tyrosine → Phosphorylation STAT / JAK Dimérisation STAT → Translocation ds Noyau → Modulation Expression Génique : Gène de l’Inflammation Gène de la Prolifération ₵r Plusieurs voies sont mises en jeu simultanément Activent la Production d’Energie o Entrée du Glucose o Gènes contrôlant l’Expression d’Enzymes régulant le Métabolisme Energétique → Ex : AMPK ↗ : Prolifération et Différenciation Rmq : JAK/STAT, voie stimulant la prolifération dans de nombreux types ₵ᴿ → Ex : o Obésité et Cancer (leptine) o Certaines mutations voie JAK/STAT : leucémies o Rôle GH dans les cancers ? jamais démontré Pathologies liées à la GH Σ de Laron o Autosomal récessif o GH sérique ↗ o Taux faible d’IGF o Petite taille, Hypoglycémie o Résistance au Diabète de type 2 + ↓ taux de cancer (+ Possible Longévité accrue) Pb Transport de la GH : Déficit en GHBP o Certaines populations de Pygmées, variantes du Laron. o Déficit en GHBP → car provient de la protéolyse du domaine extra-₵ᴿ du GHR, qui peut être muté o Nombreux cas intermédiaires selon mutation (> 30 connues) Arrêt du signal Désensibilisation par internalisation Désensibilisation par déphosphorylation 13 III. Hormones Agissant Essentiellement via des Récepteur Intra-₵r (Nucléaires) Récepteur Nucléaire → Hormones Hydrophobe +++ (Lipidique ++) Globalement o Les Hormones Stéroïdes (Glucocorticoïdes, Minéralocorticoïdes, Hormones Sexuelles) o Les Hormones Thyroïdiennes o Les Vitamines ou Dérivés « Assimilés » à des Hormones Pour toutes : 2 étapes Prise en charge par Protéines Cytoplasmique Transfert vers le noyau → Action sur l’Expression des Gènes 2 Possibilités : Protéine de Transport Cytosolique = le Récepteur Nucléaire (ex : Stéroïdes) Protéine de Transport Véhicule l’hormone vers le Rcpt Nucléaire Inactif →Liaison H → Activation (H. Thyroïdiennes) Un caractère commun : hydrophobicité ++ MAIS se rappeler des exceptions : PG, IGF 1. Stéroïdes Hormonaux a. Rôle Aldostérone Rétention Sodique / Excrétion K+ → échange Na/K o L’Aldostérone contrôle l’expression du gène codant pour une Na/K ATPase o Lieu : Rein ++, Intestin, Glandes Salivaires et Sudoripares Glucocorticoïdes Effets métaboliques o Hyperglycémiants : ↗ la Néoglucogenèse à partir des Protides o ↗ Catabolisme Protides (fonte musculaire, ↗ Résorption osseuse. Nombreux effets IIᴿ à long terme) o Stimulation Lipolyse (Mobilisation AG TA + Modif répartition des graisses : Aspect spé Hypercorticismes) - Effets Anti-Inflammatoires ++ o Stimulent la synthèse d’inhibiteurs de la PLA2 (lopocortine) et de la PLA2 o Inhibent la synthèse du TNF-α - Immunosuppresseurs o ↘ de la Prolifération Lymphocytaire et de la Cytotoxicité des T - Effets sur le métabolisme de l’eau et des électrolytes (Action Aldo-Like) o Rétention Sodium et Eau, Fuite de K → Hypertenseurs - ↘ de la sécrétion de la GH UE Endocrino/Gynécologie – Biochimie Chapitre 2 : Mode d’Action des Hormones Les Androgènes Différenciation sexuelle o Organogénèse, vie fœtale o Caractères sexuels IIᴿ, spermatogénèse, puberté o Comportement ♂, libido ? - Action trophique o Muscles squelettiques o Os (masse osseuse et cartilage de croissance) o Cutanée (glande sébacée, follicules pileux) → Mode d’action Action directe de la testostérone : OGI, spermatogénèse, muscle Action après conversion en Dihydrotestostérone : OGE, glandes sébacées, poils → T et DHT agissent via le récepteur des androgènes → Dans certains tissus (SNC, os) action directe et/ou après transformation en œstrogènes Les Œstrogènes → Action : Sphère Génitale, Glande Mammaire, Os, Vasculaire, Métabolisme o o o : Prolifération et Vascularisation (Phase Folliculaire) : ↗ Contractibilité Muscle Lisse : Stimulation Glandes Muqueuse cervicale → glaire propice au passage des spz : Prolifération, Maturation épithélium : Développement glande mammaire : Profil lipidique Moins Athérogène et effet sur endothélium des œstrogènes naturels → Protection maladies vasculaires chez la ♀en période d’Activité Génitale o o Masse/Densité Osseuse (ostéoporose post-ménopausique) Croissance/Soudure des Cartilages de Conjugaison b. Synthèse 1ère étape = Commune o Transformation CT en Prégnénolone o au niveau de la = 2 hydroxylations utilisant un cytochrome de type P450 puis clivage de la chaine latérale par un système enzymatique de type « desmolase » Nécessité d’un transporteur StaR 15 c. Mécanisme d’Action Stéroïdes Récepteur Cytosolique inactif Liaison avec l’hormone Translocation Dimérisation Expression des gènes (± selon les cofacteurs associés) UE Endocrino/Gynécologie – Biochimie Chapitre 2 : Mode d’Action des Hormones 2. Hormones Thyroïdiennes a. Liposolubles Noyau Aromatique + Iode Protéine de Transport Plasmatique : TBG + Transthyrétine Principaux Effets b. Modes d’Action Le Récepteur reste lié à l’élément de réponse au niveau nucléaire (Rcpt Fixé à ADN) Prise en Charge Hormone Protéine de Transport Cytosolique (Sst T) Passage Hormone ds le Noyau Fixation sur Récepteur Nucléaire = Activation En Ø d’Hormone → Le Récepteur = Répresseur 17 IV. Remarques Générales / Conclusions Grande diversité des hormones, mais quelques considérations générales 2 Grands Types Récepteurs Membranaires : Transduction, Hydrophiles Récepteurs Cytosoliques / Nucléaires : Hydrophobes Mais exceptions : Hydrophobes Lipides et type : PGD, IGF, GH Complexe encore mal connu dans certains cas : Rcpt Membranaires non identifié et type : œstrogène, vit D Souvent la même hormone active des voies multiples : insuline, GH Importance du système de transport Modulation de l’effet de l’hormone (seule « libre » efficace) Variation possibles du taux de transporteurs avec certains facteurs.