Annexe 2
Création Validation
19/04/17 19/04/17
11:31
FICHE PRATIQUE
Test d’orientation pour identification bactérienne
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Test OXYDASE
COLMAR
Destinataire :élèves de première et terminale Biotechnologies
Principe :Le test consiste à mettre en évidence la capacité que possède la bactérie à
oxyder un réactif incolore (la NN-diméthyl-paraphénylène diamine) en un dérivé rose
violacé.
NN-diméthyl-paraphénylène diamine
oxydation
incolore
Produit coloré
rose violacé
Technique :



placer un disque non imprégné sur une lame à l’aide d’une pince flambée,
déposer une goutte de réactif sur le disque non imprégné,
avec une pipette Pasteur prélever une colonie sur milieu solide (GO) et la déposer
doucement sur le disque
Réactif
oxydase
Culture sur GO
Remarques :
o Ne pas utiliser l’anse métallique pour prélever les bactéries. En effet, le métal peut
être recouvert d’un oxyde et donner un résultat faussement positif.
o Le milieu solide ne doit pas contenir d’indicateur de pH, ni de glucides
o Pas de lecture avant 30 secondes environ
A RETIRER SUR LA
FICHE EXAMEN
Lecture :
Tâche rose violette
Pas de tâche rose violette
La bactérie possède l’activité oxydase, elle La bactérie ne possède pas l’activité
est dite :
oxydase, elle est dite :
Oxydase +
Oxydase -
Création
Validation
19/04/17
19/04/17
FICHE PRATIQUE
Test d’orientation pour identification bactérienne
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Test CATALASE
COLMAR
Destinataire :élèves de première et terminale Biotechnologies
Principe : La catalase est une enzyme qui catalyse la dégradation du peroxyde
d’hydrogène
H2O2
→
produit toxique pour les
bactéries
½ O2 + H2O
formation de bulles
Le test consiste à mettre des bactéries en quantité suffisante en contact de peroxyde
d’hydrogène (H2O2). Si elles possèdent la catalase, elles dégradent le peroxyde
d’hydrogène en eau et dioxygène visible par la formation de bulle:
Technique



déposer sur une lame une goutte d’eau oxygénée (= peroxyde d’hydrogène) à l’aide
d’une pipette Pasteur
prélever une colonie à l’aide de l’anse
dissocier la colonie dans la goutte
Eau
oxygénée
(H2O2)
Remarque : l’utilisation de l’anse est possible à condition qu’elle ne possède pas d’action
catalasique, ce que l’on vérifiera facilement par un test sans bactérie.
A RETIRER SUR LA
FICHE EXAMEN
Lecture
Bulles d’oxygène
Pas de bulle
La bactérie possède la catalase, elle est La bactérie ne possède pas la catalase, elle
dite :
est dite :
Catalase +
Catalase -