Nom : Habert

Stage proposé par Aude DUPRE
CR2 CNRS
UMR-CNRS 7622 Biologie du développement, Université Pierre et Marie Curie, Boite courier 24,
Bat C, 7eme etage, 9 quai Saint Bernard 75005 Paris
Téléphone : 01 44 27 34 65
Mail : [email protected]
Site internet : http://bio-dev.snv.jussieu.fr/
Directeur du Laboratoire ou de l’Unité : Catherine JESSUS
Intitulé de l ‘équipe d’accueil : Biologie de l’ovocyte
Prénom et NOM du Responsable de l’équipe : Catherine JESSUS
Résumé du thème de recherche de l’équipe :
Notre équipe travaille sur les mécanismes permettant la reprise de la méiose de l’ovocyte de Xénope,
un sujet situé à l’interface des grandes questions posées dans les domaines de la reproduction et du
développement. Au cours de l’ovogenèse, l’ovocyte, arrêté en prophase de la première division
méiotique, accumule des molécules sources d’énergie et d’informations nécessaires à l’édification d’un
nouvel individu. Une fois cette phase de différenciation achevée, l’ovocyte reprend la méiose sous
l’influence d’un signal extracellulaire. Chez les Vertébrés, l’ovocyte subit une première division et
s’arrête à nouveau au stade de la métaphase II. La fécondation déclenche l’achèvement de la méiose,
suivie des premiers cycles mitotiques du développement. C’est l’activation du facteur MPF (M-phase
Promoting Factor) qui permet la reprise des divisions méiotiques. La maturation méiotique, un
processus-clé de la fonction de reproduction et le prélude indispensable au développement
embryonnaire, est ainsi devenue un modèle de référence pour l’étude des mécanismes assurant la
transition G2-M du cycle cellulaire. Pour en savoir plus, voir nos deux articles de revue les plus
récents :
Haccard, O. and Jessus, C. (2006) Oocyte maturation, Mos and cyclins; a matter of synthesis. Cell
Cycle, 5, 1152-1159.
Jessus, C. and Haccard, O. (2007) Calcium’s double punch. Nature, 449, 297-298.
Titre du projet de stage : Etude des mécanismes inhibiteurs de la réplication de l’ADN entre les
deux divisions méiotiques.
Prénom, NOM, téléphone et adresse e-mail du Responsable du stage:
Aude DUPRE, 01 44 27 34 65, [email protected]
Projet de stage :
La méiose consiste en deux divisions cellulaires qui réduisent le nombre de chromosomes de moitié
pour générer des cellules haploïdes à la base de la reproduction sexuée. La particularité du cycle
méiotique est l’absence de réplication de l’ADN entre les deux divisions. Ce contrôle original garantit la
stabilité du génome et est essentiel au succès de la fécondation et du développement embryonnaire.
Le projet vise à comprendre quels sont les mécanismes assurant l’inhibition de la réplication lors de la
méiose du gamète femelle, un domaine peu étudié jusqu’à présent. La machinerie de réplication
devient fonctionnelle dès la méiose I chez l’ovocyte de Xénope et est immédiatement réprimée. Nous
utiliserons ce modèle, particulièrement approprié pour des approches de biochimie et de biologie
cellulaire, in vivo (injections de la cellule) ou in vitro (extraits acellulaires dérivés d’oeufs) pour étudier
la contribution des kinases Cdc2, Cdk2 et Mos/MAPK à la mise en oeuvre de cette voie de répression
et analyser leurs effets sur la localisation, l’état de phosphorylation et la stabilité des composants
(Cdc6, Cdt1, ORC, MCM) de la machinerie de réplication. L’étude de ce mécanisme inhibiteur
représente un double enjeu, à la fois pour la connaissance fondamentale des mécanismes de la
méiose et pour la compréhension des dérèglements des divisions de l’ovocyte ou de la machinerie de
réplication des cellules somatiques qui président à d’importants problèmes de santé humaine en
matière de reproduction, de développement embryonnaire et de cancer.
Techniques mises en œuvre par le stagiaire :
Clonage et Purification d’ADN, technique de PCR
Purification de protéines recombinantes
Caractérisation d’anticorps
Techniques d’electrophorèse et de western blot
Mesure d’activités kinasiques
Microinjection d’ovocytes et préparation d’extraits
Publications du Responsable de stage au cours des 5 dernières années :
# Dupré A., Boyer-Chatenet L. and Gautier J. (2006) Two-step activation of ATM by DNA and the
Mre11-Rad50-Nbs1 complex. Nat. Struct. Mol Biol. 13, 451-457.
# Gaffre M., Dupré A., Valuckaite R., Suziedelis K., Jessus C. and Haccard O. (2006.) Deciphering the
H-Ras pathway in Xenopus oocyte. Oncogene 25, 5155-5162.
# Bhaskaran A., Dupré A., Hopkins B, Lengsfeld B., Lee JH., Zhang X., Gautier J., Zakian V. and Paull
TT. (2007) Rad50 Adenylate Kinase Activity Regulates DNA tethering activities of Mre11/Rad50
complexes. Molecular Cell 25, 647-661.
# Ben-Yehoyada M., Gautier J. and Dupré A. (2007) The DNA damage response during an
unperturbed S phase. DNA repair, 6(7):914-22.
# Dupré* A., Boyer-Chatenet* L., Lee J-H., Modi A., Nicolette M., Sattler R., Kopelovich L., Jasin M.,
Baer R. Paull TT. and Gautier J. (2008) Identification of a novel inhibitor of the Mre11-Rad50-Nbs1
complex. Nature Chem Biol, 4(2):119-25.
# Dupré A. and Gautier J. (2008) Overview of the DNA damage checkpoint. Editors : Drs. David A.
Gewirtz, Shawn Edan Holt, and Steven Grant - Title of the book : Apoptosis and Senescence in Cancer
Chemotherapy and Radiotherapy. Human Press (sous presse).
Autres informations
Etudiants actuellement en thèse ou en M2 dans l’équipe d’accueil. Pour chaque étudiant indiquez
le nom du responsable de thèse, l’année du début de la thèse et l’Ecole Doctorale de rattachement
Magali Carvalho, M2 (2007-2008), responsable : Anthi Karaiskou (maître de conférences UPMC)
Etudiants ayant préparé ou soutenu leur thèse, leur DEA ou leur M2 dans l’équipe d’accueil au
cours des cinq dernières années. Pour chaque étudiant indiquez le nom du responsable de
l’étudiant, l’année du début de la thèse et de fin de la thèse, l’Ecole Doctorale de rattachement et le
devenir de l’étudiant.
Gilliane MATON, Catherine Jessus, 2000-2004, Ecole Doctorale « Signalisations, Endocrinologie,
Reproduction ». Devenir : maître de conférences Paris VII.
Melina Gaffré, Catherine Jessus, 2003-2007, Ecole Doctorale « Logique du Vivant ». Devenir : postdoc.
Cette proposition de stage s’adresse-t-elle spécifiquement à un étudiant scientifique, médecin
ou vétérinaire ou bien est-il ouvert à tous les profils ?
étudiant scientifique de préference
Ce sujet peut-il donner lieu à une thèse ?
oui