Coprologie Parasitaire

Coprologie Parasitaire
Protozoaires
Helmintes
NOTIONS GENERALES DE PARASITOLOGIE
Parasitisme: mode d’association permanente ou temporaire de 2 êtres
vivants , l’hôte et le parasite, dont un seul, le parasite, tire bénéfice.
L’association est plus ou moins néfaste à l’hôte.
Cycle évolutif: suite inéluctable de transformations, se déroulant dans
un ordre précis, que doit subir un parasite pour passer d’une génération
à la suivante, avec ou sans passage par le milieu extérieur.
Cycle direct-parasite monoxène: évolution parasitaire chez un seul hôte
Cycle indirect-parasite hétéroxène: évolution parasitaire chez plusieurs
hôtes successifs
Ectoparasites: peau,cavités accessibles
Endoparasites: cavités profondes, tissus
Hôte définitif: héberge forme adulte et multiplication sexuée
Hôte intermédiaire: héberge forme larvaire et multiplication asexuée
Quelques maladies parasitaires humaines et leurs agents:
Helminthiases (vers)
Oxyurose: Oxyure
Ascaridiase: Ascaris
Téniase: Taenia
Distomatoses: Douves
Bilharzioses: Schistosomes
Onchocercose et Filarioses lymphatiques: Filaires
Protozooses (unicellulaires)
Paludisme: Plasmodiums
Amibiase: Amibe Entamoeba histolytica
Toxoplasmose: Toxoplasma gondii
Leishmanioses: Leishmania
Maladie du sommeil: Trypanosome
COPROLOGIE PARASITAIRE
•Interrogatoire du patient indispensable: origine géographique, voyage,
immuno-dépression, signes cliniques,…
•Prélèvement des selles:
-2 à 3 fois sur quelques jours (rareté parasitaire, émission discontinue
d’éléments parasitaires)
-éviter alimentation riches en résidus (légumes verts, secs, fruits)
-transport rapide au labo
-si examen différé, fixation du prélèvement (eau formolée, milieu de
conservation MIF)
•Examen parasitologique:
-macroscopique des selles
-microscopique direct
-microscopique après techniques de concentration classique
-microscopique après techniques spéciales selon renseignements
COPROLOGIE PARASITAIRE
•Examen macro:
-aspect selles (dures, moulées, molles, pâteuses, liquides)
-couleur, présence de sang ou glaires
-présence d’éléments nutritionnels
-présence de parasites macroscopiques (vers ou fragments de vers:
anneaux Ténia, ascaris, oxyures…)
•Examen micro (x10 et x40) :
-œufs ou larves de vers helminthes
-kystes ou forme végétative de protozoaires
-en NaCl 9g/L ou en Lugol
-coloration MIF (Merthiolate-Iode-Formol): fixation et conservation
Techniques d’étude en parasitologie :
EF-Concentrations-Colorations-Techniques spécifiques
La technique idéale qui concentrerait tous les éléments parasitaires n’existe pas.
- On utilise de nombreuses techniques pour concentrer les parasites en un petit volume, ce qui augmente les
chances de les détecter s’ils sont peu nombreux.
- Les 2 méthodes utilisées permettent de concentrer les éléments parasitaires quand ils sont trop rares pour
être décelés par examen direct.
methode BAILENGER: Cette méthode met en présence une solution fécale concentrer certains
acqueuse et un solvant de lipides (éther). Après centrifugation, on obtient un culot
débarassé de tous les débris lipophiles. Avec cette méthode, on utilise l’acide acétique
pour ajuster la solution à Ph 7,5. Ce pH est reconnu comme étant le plus favorable à la
concentration des éléments parasitaires.
methode MIF (Merthiolate - Iode – Formol): Cette technique est particulièrement efficace
pour la recherche des œufs de schistosomes, d’ascaris et des kystes d’amibes et de
flagellés. On peut également tropozoïtes d’Amibes, tels Dientamoeba fragilis qui restent
parfaitement identifiables.
EF:eau physio,lugol,B.Méthyl,etc…
Colorations:Z.NIELSEN,B.Méthylène,Encre,MIF,etc….
Scotch-test,Baerman,etc…
LES PROTOZOAIRES
LES RHIZOPODES
Entamoeba
Endolimax
Pseudolimax
Dientamoeba (?)
LES FLAGELLES
Chilomastix
Giardia
Trichomonas
Dientamoeba
Enteromonas
LES APICOMPLEXA
Cryptosporidium
Isospora
Cyclospora
Sarcocystis
LES CILIES
Balantidium
SANS
CLASSIFICATION
Blastocystis
LES MICROSPORIDIES
Enterocytozoon,
Encephalitozoon
Les Amibiases
On définit sous le nom d’amibiase les différentes
manifestations cliniques dues à Entamoeba
histolytica (E.h) qui est la seule amibe responsable
de pathologies graves.
Les Protozoaires communs
Amibes : ENTAMOEBA SP.
TAILLE MICRON
Kyste
Entamoeba histolytica
12-15
Entamoeba dispar
12-15
Entamoeba coli
15-25
Entamoeba polecki
11-15
Entamoeba hartmanni
6-8
E. histolytica
E. coli
Forme végétative histolytica
Forme végétative
Forme végétative minuta
Kystes
Kystes
Entamoeba histolytica
Forme
kystique
Forme
végétative
Entamoeba
histolytica
minuta
Non pathogène
Entamoeba
histolytica
histolytica
Pathogène
Entamoeba
histolytica ...
Entamoeba histolytica kyste 14µm
(cliché JF Pays)
Entamoeba histolytica histolytica 15 µm
(cliché JF Pays)
Entamoeba histolytica histolytica 20-40 µm (cliché JF Pays)
Forme végétative Entamoeba histolytica minuta
coloration hématoxyline ferrique
Entamoeba coli
Kyste d’Entamoeba coli
LES PROTOZOAIRES
LES RHIZOPODES
Entamoeba
Endolimax
Pseudolimax
Dientamoeba (?)
LES FLAGELLES
Chilomastix
Giardia
Trichomonas
Dientamoeba
Enteromonas
LES APICOMPLEXA
Cryptosporidium
Isospora
Cyclospora
Sarcocystis
LES CILIES
Balantidium
SANS
CLASSIFICATION
Blastocystis
LES MICROSPORIDIES
Enterocytozoon,
Encephalitozoon
Les Protozoaires
Flagellés
TAILLE MICRON
Giardia intestinalis
Chilomastix mesnilli
Trichomonas intestinalis
Enteromonas hominis
Dientamoeba fragilis
Kyste
10-12
7-9
/
6-8
/
Giardia intestinalis
Formes végétatives (face et profil)
Kyste
FLAGELLES INTESTINAUX
* NOMBREUSES
ESPECES SAPROPHYTES DU COLON
* SEUL GIARDIA INTESTINALIS PARASITE DU
DUODENUM ET DE L’INTESTIN GRELE EST
PATHOGENE
* GIARDIA INTESTINALIS EXISTE SOUS 2 FORMES :
- TROPHOZOITES (INTESTIN)
- KYSTES (SELLES)
Kystes de Giardia intestinalis
8x12µm (cliché Th. Duong)
Formes végétatives de
Giardia intestinalis 6x15 µm
(cliché M. Gari-Toussaint)
Les Protozoaires
Flagellés
Trichomonas intestinalis
TRICHOMONAS VAGINALIS (Trichomonase)
Règne des protistes, Embranchement des Sarcomastigophora, sous embranchement des
Mastigophora, Classe des Zoomastigophorasida, Ordre des Trichomonadida
Morphologie
trophozoïte: forme ovoïde à sphérique de 7 à 30 µm de long x 5 à 12 µm de
large, 1 axostyle, 3 à 5 flagelles antérieurs libres et 1 flagelle postérieur
court formant une courte membrane ondulante, 1 noyau visible après
coloration, mobile à état frais
division par scissiparité, pas de reproduction sexuée, pas de forme kystique
Les Protozoaires émergents:
Sporozoaires (Apicomplexa) :
Coccidies
Cryptosporidium parvum
Isospora belli
Cyclospora cayetanensis
Sarcocystis hominis
Cryptosporidium
parvum
Isospora belli
Coccidie
Coccidie
Réservoir :
Homme, bétail, Monoxène
Homme
Monoxène
Répartition :
Cosmopolite
Cosmopolite
Tropical +++
Localisation :
Intracellulaire
Intestin (grêle), Bronches, Vésicule
Intracellulaire
Intestin (grêle)
Cycle :
Schizogonie
Gamagonie
Oocystes mûrs
paroi mince (autoinfection)
paroi épaisse (dissémination)
Schizogonie
Gamagonie
Oocystes immatures
(maturation milieu
extérieur)
Contamination :
Ingestion d’oocystes, Risque prof.
Alimentation, Risque nosocomial, Homosexualité
Ingestion d’oocystes
alimentation
Terrain :
Tout, Enfant
Immunodépression, SIDA +++
Tout, Enfant
Immunodépression
SIDA +++
Clinique :
Diarrhée ++, Malabsorption, Cholécystite
Diarrhée ++
Malabsorption
Diagnostic bio :
Frottis selles, Ziehl-Neelsen, Ac fluo
EPS standard
Traitement :
Humatin
(paromomycine)
Bactrim
(trimethoprimesulfamethoxazol)
Oocystes de Cryptosporidium (x40) (4 à 6 µm de diamètre)
Selles colorées par le Ziehl-Neelsen
L’HyperEosinophilie
et
Helminthes
Nématodes
Cestodes
Trématodes
VERS HELMINTHES
LES NEMATODES
•ENTEROBIUS VERMICULARIS –Oxyure-(Oxyurose)
•TRICHURIS TRICHURA –Trichocéphale –(Trichocéphalose)
•ASCARIS LUMBRICOIDES-(Ascaridiase)
•STRONGYLOIDES STERCORALIS-Anguillule-(Anguillulose)
•ANKYLOSTOMA DUODENALE et NECATOR AMERICANUS- Ankylostomes-(Ankylostomose)
•TRICHINELLA SPIRALIS –Trichine- (Trichinellose)
•TOXOCARA CANIS/CATI (Toxocarose) SYNDROME DE LARVA MIGRANS VISCERALE
•LES FILAIRES EXOTIQUES (Filarioses)
VERS HELMINTHES
LES CESTODES
•TAENIA SAGINATA-(Taeniase)
•TAENIA SOLIUM (Taeniase) et CYSTICERCUS CELLULOSAE (Cysticercose)
•DIPHYLLOBOTHRIUM LATUM – Bothriocéphale-(Bothriocéphalose)
•ECHINOCOCCUS GRANULOSUS-(Hydatidose ou Echinococcose)
•ECHINOCOCCUS MULTILOCULARIS –(Echinococcose alvéolaire)
VERS HELMINTHES
LES TREMATODES
•FASCIOLA HEPATICA –Grande Douve du Foie-(Fascoliose, Distomatose)
•SCHISTOSOMA-Schistosomes ou Bilharzies (Bilharzioses ou Schistosomoses)
Parasites
Unicellulaires
=
Protozoaires
N’entraînent pas
ou quasiment pas
d’Hyperéosinophilie
Pluricellulaires
=
Vers
ENTRAINENT UNE
HYPER
EOSINOPHILIE
l’HyperEosinophilie et Helminthes
Nématodes
- OVIPARES
ANGUILLULE
ANKYLOSTOMES
ASCARIS
TRICHOCEPHALE
OXYURE
- VIVIPARES
TRICHINE
FILAIRES
Signe digestif de
l’hyperEosinophilie
Cristaux de Charcot-Leyden
STRONGYLOIDES STERCORALIS ou ANGUILLULE-(Anguillulose)
Embranchement des Némathelminthes, Classe des Nématodes, Ordre des
Rhabditidés
Morphologie:
oeuf: coque mince, claire, transparente, 50 x 30 µm, contiennent la larve L1 lors
de l'émission des selles
Stades larvaires: L1: rhabditoïde: (250 µm, double renflement oesophagien);
L2: strongyloïde (500 µm, un renflement oesophagien)
L3: strongyloïde infectieuse (600 µm, un renflement oesophagien, oesophage égal
à 1/2 du corps, extrémité postérieure discrètement bifide)
L1
Oeuf
Œuf+L1
L3
Technique de
Baermann
Eau tiède
2-3 heures
1
2
3
4
Pascal DELAUNAY – PARASITOLOGIE – CHU de NICE
NECATOR AMERICANUS
ANCYLOSTOMA DUODENALE
ASCARIS LUMBRICOIDES-(Ascaridiase)
Embranchement des Némathelminthes, Classe des Nématodes, Ordre
des Ascaridés.
Morphologie:
Vers Adulte: Ver blanc rosé, élastique, bouche avec 3 lèvres coupantes
mâle 15-20 cm, diamètre 0.3 cm, extrémité postérieure en crosse, 2
spicules brunâtres,
femelle 20-25 cm, diamètre 0.5 cm, extrémité postérieure rectiligne,
vulve ventrale au 1/3 antérieur
Oeuf: ovoïde, double coque, l'externe est brune et mamelonnée,
l'interne est lisse et jaunâtre non embryonné à la ponte,
dimensions: 50-70 µm x 45-50 µm,
Il existe aussi des oeufs non fécondés plus grands, plus ovoïdes, et des
œufs atypiques ayant perdus leur coque mamelonnée
Œuf non
fécondé
Œuf typique
fécondé
Œuf atypique
fécondé
Oeuf: forme de citron, un bouchon muqueux proéminent à chaque pôle,
double coque: externe lisse et brune, interne jaune, non embryonné à
la ponte
Trichocéphale
dimensions: 50-60 µm x 25-30 µm
Cycle évolutif monoxène:HD = homme
les vers adultes sont situés au niveau du colon et du caecum, leur
extrémité antérieure est enfoncée dans les glandes, leur extrémité
postérieure flotte dans la lumière ;
les vers sont hématophages (5 µl de sang /ver/jour)
élimination fécale des œufs.
ENTEROBIUS VERMICULARIS ou OXYURE-(Oxyurose)
Embranchement des Némathelminthes, Classe des Nématodes, Ordre
des Oxyuroidea
Morphologie:
Vers adulte: petit ver blanc très mobile avec renflement
céphalique,bouche munie de 3 lèvres coupantes
mâle: 3-5 mm, extrémité postérieure enroulée, 1 spicule,
femelle: 9-12 mm, extrémité postérieure effilée translucide,
Scotch-test
• Ponte nocturne
l’HyperEosinophilie et Helminthes
- Cestodes :
- AU STADE ADULTE :TAENIASIS du bœuf
TAENIASIS du porc
HYMENOLEPIASE
- AU STADE LARVAIRE :
CYSTICERCOSE
HYDATIDOSE
ECHINOCOCCOSE ALVEOLAIRE
Taenia saginata (bovin)
Taenia solium (porc)
Taenia
saginata
Taenia
solium
Scolex piriforme de 1 à 2 mm,
organes de fixation: 4 ventouses (ni
rostre , ni crochets) d'où "Ténia
inerne"
L'œuf: paroi très fine facilement déchirée et souvent absente, contient
un embryophore sphérique de 35 µm de diamètre à coque épaisse, brune
et radiée contenant un embryon "hexacanthe" (à 6 crochets résiduels)
Œuf de taenia
l’HyperEosinophilie
et Helminthes
-Trématodes :
- Schistosomes
- Distomatoses hépato-bilaires:
Fascioloses
Dicrocoeliose
Clonorchioses
Opisthorchioses
- Distomatoses intestinales
- Distomatoses pulmonaires: paragonimoses
BILHARZIOSES
ŒUFS
EPERON caractéristique 70 à 200 µm de long
avec EMBRYON CILIE (MIRACIDIUM) =100 µm
dans les SELLES ou les URINES
S. mansoni
S. intercalatum
S. haematobium
LA PATHOLOGIE
EST PRINCIPALEMENT LIEE AUX ŒUFS
Oeufs
Schistosoma mansoni
140-180x60µm, éperon latéral
Schistosoma haematobium
140-170x40µm, éperon terminal
Schistosoma intercalatum
140-200x70µm, éperon terminal
Schistososma japonicum,
70-100x40µm, petit éperon latéral
Oeufs
DISTOMATOSES
VERS PLATS , CLASSE DES TREMATODES
LES ADULTES:
HERMAPHRODITES
PARASITES DES ÉPITHELIUMS:
BILIAIRE=DOUVES HEPATIQUES
INTESTINAL=DOUVES INTESTINALES
BRONCHIQUE=DOUVES PULMONAIRES
TAILLE VARIABLE EN FONCTION DES ESPÉCES:
DE 1,5 MM À 3 CM
LES OEUFS: TAILLE TRÉS VARIABLE
(30 À 150 MICRONS)
DANS LES SELLES
CARACTERISTIQUE: OPERCULE
CE SONT DES ZOONOSES
DOUVES
PARASITES DE L’EPITHELIUM BILIAIRE
Fasciola hepatica: DISTOMATOSES HEPATIQUES
Clonorchis sinensis:
Dicrocoelium dentriticum
PARASITES DE L’EPITHELIUM BRONCHIQUE
Paragonimus : DISTOMATOSES PULMONAIRES
PARASITES DE L’EPITHELIUM INTESTINAL
Heterophyes heterophyes: DISTOMATOSES INTESTINALES
Fasciola hepatica
Œuf de Dicrocelium dentriticum
Œuf de Clonorchis sinensis