Activité de la banque des tissus

Thérapie Tissulaire
Activité de la Banque de Tissus
Greffe de cornée
Greffe de membrane amniotique
Dr Guilhem COUDERC
Banque régionale de tissus
CHRU de Montpellier
Les Tissus
LES ETAPES
Le
La
La
prélèvement
conservation en banque
greffe
ACTIVITE TRES REGLEMENTEE
Les tissus humains à usage
thérapeutique
Loi de Bioéthique
(loi 2011-814 du 7 juillet 2011)
Consentement du donneur
Gratuité du don
Interdiction de publicité
Anonymat
Sécurité sanitaire
Réglementation
Etablissements autorisés au prélèvement sur donneur
décédé
Dossier d’autorisation
Règles de bonnes pratiques de prélèvement (arrêté 97306 du 1er avril 1997)
Les tissus humains à usage
thérapeutique
Réglementation
Banque de Tissus autorisées
Dossier d’autorisation (décret 2015-509 du 6 mai 2015
simplifiant le décret 2008-968 du 16 septembre 2008)
Règles de bonnes pratiques de conservation et de
distribution (décision du 27 octobre 2010)
Chaque tissus doit en plus obtenir une autorisation
spécifique correspondant au procédé de préparation,
de validation et de conditionnement
LE PRELEVEMENT
Les tissus utilisés à des fins thérapeutiques
Donneur DCD en mort encéphalique
ou à cœur arrêté:
Vaisseaux
Valves cardiaques
Peau
Os massifs et articulations
Cornées
Les tissus utilisés à des fins thérapeutiques
Donneur vivant (résidus opératoires):
Têtes fémorales et dérivés viro-inactivés
Volets crâniens: traitement décompressif
Membranes amniotiques
Les artères et les valves
Artères:
Aorte thoracique, abdominale
Bifurcation aorto-iliaque
Artère fémorale et axe ilio-fémoro-poplité
Valves cardiaques (aortiques et pulmonaires)
Indications: vitales
Prothèse infectée
Sauvetage de membre
Les greffes d’artères en 2014
40 artères pour 30 patients, 67 ans (41-93) en LR
Indications:
Type de greffons:
20 infections sur prothèse
10 revascularisations du MI
10 cancers, greffes hépatiques, anévrismes
9 greffons aortiques
4 bifurcations aorto-iliaques
24 axes ilio-fémoro-(poplités)
3 artères pulmonaires
540 artères greffées en 2014 en France
La peau
Indications vitales: grand brûlé
Prévention des complications (infections, désordres
hyrdo-électriques…)
Protection des autogreffes
Prélèvement du seul épiderme sur le dos et membres
inférieurs
Lambeaux prélevés au dermatome
Environ 25 m2 greffés en 2014 en France
Les os massifs
Os massifs:
Indications : sauvetage de membre
Fémur entier ou extrémité supérieure ou inférieure
Tibia, humérus
Articulation du coude
Hémi-bassin
carcinologie
traumatologie
275 greffes en 2014 en France
Les têtes fémorales
Prélèvement:
Indications :
Sur donneur vivant
Lors de la mise en place d’une prothèse totale de
hanche
Reconstructions et comblements osseux
Chirurgie orthopédique ou rachidienne
Tissu le plus greffé
Fragments osseux viro-inactivés dérivés
de tête fémorale
• Formes géométriques standardisées
• Hémi-tête
• Bloc
• Coins d’ostéotomie
• Fragments de tailles différentes….
•
•
•
•
Trame osseuse seule
Traitement viro-inactivant
Moins bonne ostéo-conduction
Conservation à température ambiante
Source: catalogue OST Développement
La conservation
Cryopréservation avec cryoprotecteur type DMSO et
stockage en vapeur d’azote –180°C pendant 5 à 10 ans:
Cryoconservation à –80°C pendant 2 à 5 ans :
Vaisseaux et valves cardiaques
Peau
Os massifs et articulations
Têtes fémorales
Volets crâniens
Os massifs
Membranes amniotiques
Conservation à 31°C pendant 30 j:
Cornées
La congélation avec cryoprotecteur
180808b
20
0
0
-20
5
10
15
20
25
30
35
40
1 à 2 degrés/mn
45
50
Température (°C)
-40
-60
PROD:t (s)
CUVE:t (s)
-80
-100
5 degrés/mn
-120
-140
-160
Tem ps (m inutes)
La conservation
La distribution
Validation des tissus
En urgence ou programmée
Prescription nominative
Conditionnement, transport
La greffe
Réception du greffon
Déconditionnement et décongélation éventuelle
Cinétique de décongélation d'une poche tém oin
30/07/2014 m =124g
30
20
10
0
-10
30 °C/mn
-40
-50
-60
-70
-80
-90
10 °C/mn
-100
-110
t (h:m n)
Renvoi du tissu à la banque (élimination)
Traçabilité
Documents remplis et signés à renvoyer à la banque
Double des documents à classer dans le dossier patient
Suivi, vigilance
14:49
14:48
14:47
14:46
14:45
14:44
14:43
14:42
14:41
-150
-160
14:40
Greffe
14:38
-120
-130
-140
14:39
T°(°C)
-20
-30
La greffe de cornée
La cornée
Coupe sagittale de l’œil,
partie antérieure
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Conjonctive
Cornée
Iris
Cristallin
Corps vitré
Corps ciliaire
Sclérotique
Cornée
1.
2.
3.
4.
5.
Épithélium
Membrane de Bowman
Stroma
Membrane de Descemet
Endothélium
Indications des greffes de cornées en
2013
Kératocone : 16%
Décompensation endothéliale secondaire
pseudophaque : 21%
Séquelles
Séquelles
Dystrophie de Fuchs : 20%
Echec de greffe : 14%
de
de
kératites : 14%
traumatisme : 3%
Le prélèvement de cornée
Donneur:
Prélèvement:
Lors d’un prélèvement d’organes et de tissus (ME)
Donneur à cœur arrêté (dans les 8h, dans les 24h si
réfrigération dans les 4h)
Découpage de la sclère
Suspension dans le milieu de conservation
Restauration anatomique
Contre indications
Hémopathies malignes
Tumeur oculaire ou du SNC
Démence
Sérologies positives
Pathologies oculaires
Délai entre prélèvement et décès
Absence de prélèvement sanguin
Les cornées
Organoculture à 31°C pendant 30
jours au maximum
2 évaluations de l’endothélium
Tests sérologiques
Tests bactériologiques
Travail en Zone d’Atmosphère Contrôlée (cascade de
pression, renouvellement d’air filtré…)
Protocole d’entrée/sortie et d’habillage
Bio nettoyage spécifique et approfondi
Contrôle environnemental strict
Surveillance du matériel continue, locale et déportée
Evaluation
Evaluation
Evaluation
Remise en culture
Critères de conformité
Nombre de cellules >2000/mm2
Nombre de cellules mortes <2%
Aspect de la mosaïque
Absence de plis bleus
Perte cellulaire < 20%
Arbre décisionnel
Prélèvement
Sérologie et bactériologie
conformes
Non conformes
destruction
Première évaluation
conforme
Non conforme
destruction
Seconde évaluation
conforme
Non conforme
destruction
Décision de greffe
Mise en déturgescence
Greffe
Bactériologie négative
Positive
destruction
Causes de non conformité
Cornées éliminées en France en 2014: 52 %
Causes
Bactériologie
% 2014
6%
Sérologie + ou NF
11%
Evaluation
31%
Autres
4%
Les différents types de greffe de cornée
Kératoplastie transfixiante
Kératoplastie lamellaire antérieure profonde:
pathologie associant altération du stroma avec endothélium et
membrane Descemet normaux (kératocônes, séquelles de kératite,
de brûlures…)
Kératoplastie lamellaire postérieure:
pathologies de l’endothélium et membrane Descemet (dystrophie de
Fuchs et kératopathies bulleuses…)
Kératoplastie lamellaire
antérieure profonde
greffe du stroma et de l’épithélium
Melles GR, Remeijer L, Geerards AJ, Beekhuist WH
Cornea 2000;19:427-432
Kératoplastie lamellaire postérieure
greffer une lame du stroma postérieur, la
membrane de Descemet et l’endothélium
NRC Handelsblad. Wim Kohler/Roland Blokhuizen,
September 8 2001.
Résultats
Retour progressif de l’AV, corticothérapie locale pendant 1
an avec décroissance progressive et antibiothérapie locale
Résultats jugés entre 1 et 3 mois, mais la vision définitive
n’est obtenue qu’après 1 an, astigmatisme
Rejets peu fréquents (10 à 20%), généralement curables
La greffe de cornée est une des greffes les plus simples et
dotée d’un taux de succès important
50% AV > 5/10
Concerne plus de 4800 greffes en 2014
La greffe de membrane
amniotique
Membrane amniotique
Epithélium:
sera détruit par la congélation
Membrane basale:
favorise la migration, l’adhésion
et la différenciation épithéliale
sera le support de la recolonisation
Stroma :
réservoir de facteurs de croissance
NGF en grande quantité, KGF (stroma limbique),
HGF (stroma cornéen) avec suppression du
signal TGFβ
Principes et indications
L’objectif est de limiter les phénomènes
inflammatoires et fibrotiques pour permettre la
régénération de l’épithélium à partir des cellules
limbiques
Indications:
Ulcères chroniques
Brûlures
Reconstructions conjonctivales (ptérygions, symblépharons..)
Maladies bulleuses
Contre indications
Sélection de la donneuse:
Maladies infectieuses et groupes à risque
Maladies de système ou dégéneratives
Affections néoplasiques
Au moment de la césarienne:
Pathologie infectieuse génitale
Fièvre maternelle supérieure à 38°C
Évènement mettant en jeu l’enfant ou la mère
Prélèvement
Sélection clinique
de la donneuse
Césarienne
programmée
Consentement de la patiente
Absence de CI médicale
Dépistage des marqueurs
infectieux/biologiques à J0
Absence de CI médicale
au cours de la césarienne
Prélèvement
Conditionnement
pour le transport
Procédé de transformation
Transport stérile
Rinçage des membranes avec solution ATB
Séparation de la membrane du chorion
Apposition des membranes de nitrocellulose
Découpage des fragments
Contrôle bactériologique et histologique
Congélation en milieux contenant 30% de glycérol
Stockage – 80°C
Procédé de transformation
Séparation amnios-chorion
Découpage
Procédé de transformation
Conditionnement unitaire
Procédé de conservation
Réception
Contrôle microbiologique
du milieu de transport
Séparation amnios chorion
Contrôle histologique
du placenta
Découpage de l’amnios
Conditionnement des fragments
Conservation à –80°C
pendant 2 ans
Contrôle microbiologique
du milieu de rinçage
et sur fragments
Contrôle histologique
sur fragments
Greffe de membrane amniotique
Sur prescription nominative
Décongélation à température ambiante ou à 37°C
Rinçage au sérum physiologique
Greffe
Résultats
Pas alternative thérapeutique
Effet trophique et antalgique rapide
Technique chirurgicale simple
> 2 800 greffes en 2014
Usage scientifique
Passage du cadre thérapeutique au cadre
scientifique
Cadre de la loi de bioéthique identique
Notion de changement de finalité
Nécessite une déclaration de conservation et une autorisation
de cession dans le cadre d’un CRB auprès du ministère de la
recherche, de l’ARS, de l’ABM (décret 2007-1220 du 10 août 2007).
Intégration des collections de la Banque de tissus
au CRB du CHRU de Montpellier
Déclaration et autorisation de cession obtenues pour
les cornées, les membranes amniotiques et la peau
FIN
Merci de votre
attention