groupes sanguins r expression du « soi

Collège de Genève –
Laboratoire de biologie
Sang et immunité
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Introduction
Vous allez observer les différents types de cellules sanguines et déterminer votre groupe sanguin.
Matériel
Lancettes stériles, cure-dents, désinfectant, colorants pour cellules sanguines.
Préparation d!un frottis de sang
Chaque élève effectue seul un frottis coloré avec son propre sang. Il est nécessaire de travailler
proprement et rapidement en procédant comme suit:
• Nettoyez l’extrémité d’un doigt (annulaire gauche de préférence) avec un tampon imprégné de
désinfectant;
• Y pratiquer une petite incision au moyen d’une lancette stérile (ne la posez pas sur la table avant
l’emploi, et jetez-la sitôt après). Posez une goutte de sang sur la lame et désinfectez la plaie, puis faites
un frottis de la manière suivante:
• Posez la lame inclinée en avant de la goutte de sang, puis ramenez-la légèrement en arrière de manière
à ce que le sang s’étale au contact des deux lames.
• Poussez tranquillement la lame inclinée en avant, comme indiqué sur le schéma, afin d’étaler le sang
de manière uniforme
• Agitez légèrement la lame pour accélérer le séchage du sang
• Une fois le frottis bien sec, prenez la lame avec une pincette et trempez-la 5 fois 1 seconde dans le
premier bain (solution fixatrice), en laissant égoutter rapidement l’excédent chaque fois
• Après le 5 ème trempage, essuyez le bord de la lame sur du papier ménage
• Procédez de même avec le deuxième bain (éosine) puis avec le troisième bain (thiazine)
• Placez la lame dans une boîte de Pétri et rincez-la avec de l’eau de la pissette en évitant les
éclaboussures
• Séchez bien à l’air.
Observation au microscope
Placez la lame sous le microscope à 40 x, et recherchez une région où les différents globules sont bien
visibles. Puis passez à 100 x et à 400 x. Repérez les trois types de cellules sanguines: globules rouges,
globules blancs (neutrophiles, éosinophiles, basophiles, lymphocytes et monocytes), ainsi que les
plaquettes. Mettez une goutte d’huile d’immersion et l’objectif 100 x, puis observez et dessinez ces
différentes cellules, en veillant à bien observer leur noyau. Mesurez chacune de ces cellules à l’aide de
l’oculaire gradué.
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Groupes sanguins ABO et facteur rhésus
• Préparez une lame avec une goutte d’agglutinine anti-A à une extrémité et une goutte d’agglutinine
anti-B à l’autre extrémité.
anti-A
anti-B
• Si vous déterminez également le facteur rhésus, préparez une seconde lame avec une goutte
d’agglutinine anti-D.
• Incisez l’extrémité d’un doigt avec une lancette stérile.
• Déposez une goutte de sang à côté de chaque goutte d’agglutinine.
• Mélangez avec 2 cure-dents différents.
• Observez et déterminez votre groupe sanguin.
• Si vous déterminez votre facteur rhésus, déposez une goutte de sang à coté de l’anti-D, puis
mélangez les deux, à l’aide d’un nouveau cure-dents.
Laissez pendant 3 minutes sur une plaque chauffante (40°C) avant de notez votre résultat.
Rapport
Déterminez votre groupe sanguin et expliquez votre raisonnement.
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Répartition des groupes sanguins dans le monde
Répartition des populations mondiales, selon leurs fréquences des trois gènes du système ABO.
D’après A. Langaney, 1988.
Questions
Le triangle ci-dessus représente la fréquence des groupes sanguins A, B et O dans le monde.
1. Peut-on dire que la fréquence des groupes sanguins est approximativement la même dans chaque
région du globe!? Argumentez en vous référant aux valeurs de ce graphique.
2. Où peut-on situer les Suisses sur ce graphique ?
Fiche maître
et assistant
technique
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Objectifs principaux
• observer, mesurer et identifier les différentes cellules sanguines.
Durée: 90 minutes.
Conseils pratiques
Frottis et coloration
• prévoir des bacs en plastique (env. 20 x 30 cm) pour le matériel de coloration de chaque place, afin
d’éviter les salissures.
• le set des trois colorants Diff-Quick (3 x 500 ml) N° 130832 M&D coûte env. CHF 120.- Il peut être
commandé chez Dade AG, CH 3186 Düdingen, Tél. 026 49.28.111.
• une grande boîte de Pétri peut être utilisée pour le rinçage final.
• pour l’observation à 1000x, prévoir l’huile d’immersion et du xylol pour le nettoyage des objectifs.
Groupes sanguins
• les sérum anti-A, B et D (Rh+) peuvent être commandés à la même adresse que ci-dessus. Les coûts
approximatifs sont les suivants:
Anti-A, 10 ml, env. CHF 20.- ; anti B, 10 ml, env. CHF 20.- ; anti-D, 10 ml, env. CHF 70.Ces produits sont à conserver au frigo, et sont utilisables, pour usage scolaire, pendant 3 à 6 mois après la
date de péremption ! Insister auprès des élèves pour leur faire comprendre que cette détermination de
groupes sanguins n’est en aucun cas valable médicalement.
Matériel
Pour deux élèves
• lancettes stériles
• cure-dents
• désinfectant, ouate
• lames et lamelles
• série des trois colorants dans des tubes borer
• pincette
• oculaire gradué, huile à immersion
• poubelle spéciale - à disposition au SSJ.
Bibliographie
Langaney A., 1988, Les hommes, passé, présent, conditionnel, Paris, Armand Colin.
Marieb E., 1993, Anatomie et physiologie humaine, Bruxelles, De Boeck.
Schalchli L., Le système immunitaire - dossier bac to basics, In La Recherche, septembre 1997.
Le sang, numéro spécial, La Recherche, 254, mai 1993.
La vie, la mort, le système immunitaire, numéro spécial, Pour la Science, novembre 1993.
L'Aventure du vivant, 2006, Larousse.
groupes sanguins
rexpression du « soi»
La réussite d'une greffe ou d'une transfusion dépend de la compatibilité des groupes
sanguins et tissulaires du donneur et du receveur. Elle dépend de la présence ou non
de certains antigènes à la surface des cellules sanguines.
S
i l'organisme reconnaît les particules étrangères et peut les
éliminer, c'est qu'il sait identifier ce qui lui appartient en propre : il
distingue le « soi » du « non-soi ».
Chaque individu possède son identité biologique. Parmi les quelques
dizaines de milliers de gènes de l'espèce humaine, qui permettent la manifestation d'un caractère déterminé,
certains se rencontrent à l'identique
dans une population donnée (un
groupe ethnique, une famille...), mais
seuls les vrais jumeaux issus d'un
même œuf ont rigoureusement le
même programme génétique.
Le système ABO
et le système Rhésus
rassemblent deux types
de marqueurs
différents.
Les groupes sanguins sont des
marqueurs de l'identité biologique.
Certaines molécules présentes à la
surface des cellules sanguines les définissent en plusieurs catégories. Ce
sont des antigènes : introduits chez
un individu d'un autre groupe, ils suscitent une réaction de rejet. C'est
pourquoi, lors d'une transfusion sanguine, il faut que le donneur et le receveur aient des groupes sanguins
compatibles.
Le système ABO est le plus connu
des systèmes de classification. Il est
présent dans toutes les populations
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Le/acteur rhésus, qui caractérise les groupes sanguins, a été identifié chez un singe d'Asie
du Sud-Est, le macaque rhésus.
humaines. Il répartit les individus en
quatre groupes, A, B, AB et 0, en fonction de la nature des antigènes présents à la surface de leurs globules
rouges : antigène A pour le groupe A,
antigène B pour le groupe B, antigènes A et B pour le groupe AB, absence d'antigènes A et B dans le
groupe 0.
Les antigènes de ce système sont
des chaînes formées de quelques
sucres simples, pointant comme des
antennes sur la membrane des globules rouges. Ils ont tous un châssis
commun : l'antigène H.
La présence d'anticorps dans le
plasma sanguin restreint les possibilités de transfusion croisée. Chaque individu possède des anticorps actifs
contre les antigènes qui n'existent
pas à la surface de ses propres globules rouges (anticorps anti-antigène
B dans le groupe A, anti-antigène A
dans le groupe B, anti-antigène A et
anti-antigène B dans le groupe 0).
Ces anticorps ont pour effet d'agglutiner les globules rouges - ce sont des
« agglutinines ». Les sujets du groupe
0 sont des «donneurs universels»,
car l'antigène H est présent dans tous
les groupes et n'induit pas d'agglutination (il n'y a pas d'anticorps anti-H).
Ceux du groupe AB sont des « receveurs universels » : ils possèdent les
deux types d'antigène, ne possèdent
ni anticorps anti-antigène A, ni anticorps anti-antigène B, et peuvent
donc recevoir les antigènes des
autres groupes sanguins.
Un autre groupe d'antigènes sanguins constituent le système Rhésus,
qui doit son nom à un singe d'Asie du
Sud-Est, Macacus rnesus, chez lequel
il a été identifié. Il est gouverné par
trois gènes, qui existent chacun en
2 versions différentes : C ou c, D ou
m
4fc
•
sérum test
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Les tests
d'agglutination
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permettent
de vérifier
la compatibilité
r •&•••.
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i . ,..
0A
ABO.
Ci-contre, l'apparition de fines
incompatibilité
%/fï
AB
indique
une
des groupes :
le sérum utilisé pour le test
contient des anticorps qui se
dirigent contre les antigènes
•
^Bl^
W
B
A
AB
des groupes
sanguins dans le système
granulations
•
LE SAVIEZ-VOUS
^p
fife
d, E ou e. Tous ces gènes contrôlent
la fabrication d'une protéine membranaire susceptible de provoquer une ré-
Les marqueurs du soi
sont exposés
sur les membranes
des cellules.
action immunitaire lors d'une transfusion, sauf le gène d, qui est « muet».
Les sujets présentant le gène D sont
dits «Rhésus positif» (Rh+), les
autres, porteurs du gène d muet,
« Rhésus négatif » (Rh-).
Si l'on transfuse du sang d'un sujet Rh+ à un sujet Rh-, des anticorps
se forment et peuvent détruire les globules rouges du receveur. Dans de
plus rares cas, les accidents transfu-
GROS PLAN
Une première greffe de main et
avant-bras a été tentée en 1998
sur un patient néo-zélandais amputé
d'une main âgé de 48 ans.
La même équipe médicale
internationale récidivait en janvier
2000 et greffait les deux mains à
un jeune Français. Les dangers de
rejet de greffe, liés à une mauvaise
histocompatibilité, restent très
importants malgré le puissant
traitement antisuppresseur qui doit
être administré à vie aux patients.
0
0
?
La répartition géographique des
différents groupes sanguins ne
correspond pas à celle de la pigmentation de la peau ou d'autres
caractères morphologiques
externes. En effet, au sein de l'espèce humaine, aucun critère génétique ne permet de définir des
« races ».
présents à la surface
des globules rouges du
receveur.
receveur
sionnels peuvent être dus à des incompatibilités relatives aux autres antigènes, C et E.
Par ailleurs, lorsqu'une mère
R h - porte un enfant Rh-i-, le passage
accidentel de globules rouges du
sang fœtal dans le sang maternel déclenchera la formation d'anticorps
chez la mère. Lors d'une seconde
grossesse, si son enfant est encore
Rh-t-, ces anticorps pourront traverser
le placenta et détruire les globules
rouges du bébé, provoquant une anémie grave. Heureusement, des mesures préventives simples permettent
aujourd'hui de l'éviter.
D'autres groupes sanguins existent. Les plus importants constituent
les systèmes Kell, Duffy, Kidd et MNH.
Certains ne se rencontrent que dans
certaines populations. Ainsi, le facteur Diego est spécifique
des
Amérindiens et de certaines populations d'Extrême-Orient. Toutes ces
classifications reposent sur la composition de la membrane des globules
rouges. Mais les autres cellules sanguines ne sont pas pour autant
exemptes
d'antigènes
membranaires...
MOTS-CLES
• Les globules rouges d'un individu
portent des marqueurs
membranaires qui définissent son
appartenance à un groupe sanguin.
Ces marqueurs d'identité sont des
antigènes.
• Les marqueurs d'histocompatlbllité (système HLA) sont situés
à la surface des globules blancs et
des cellules des tissus.
du père, et six autres, de la mère.
Comme la nature de ces douze antigènes est extrêmement variable, une
greffe sera d'autant mieux tolérée
si le donneur est un membre de la famille proche. Les molécules HLA permettent la reconnaissance du soi
et du non-soi lors des réactions immunitaires. •
Jean Dausset (né en 1916)
Après avoir découvert les antigènes
d'histocompatibilité en 1958, ce
médecin français a mis en évidence
le rôle joué par le système HLA
dans la reconnaissance du soi et du
non-soi. Il a reçu le prix Nobel en
1980.
Le système HLA (Human Leucocyte
Antigen) repose en effet sur la classification d'antigènes identifiés tout
d'abord sur les globules blancs. Par la
suite, on s'est aperçu que ces antigènes figuraient aussi à la surface
des cellules des tissus. Les antigènes HLA sont donc très nombreux.
Chaque individu possède à la surface de ses cellules les douze antigènes principaux du système HLA. Six
sont fabriqués selon un plan hérité
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