Univsité Badji Mokhtar – Annaba Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C) TP n°01 : Observation d’un frottis sanguin par microscope optique. Objectifs : - Préparer un frottis sanguin. Observation de la morphologie des constituants du sang Observer un frottis sanguin coloré au grossissement x40, et repérer sur ce frottis les différentes cellules sanguines Principe : 1- La préparation d’un frottis sanguin : Le frottis sanguin sert à évaluer la taille et la morphologie des différents constituants du sang « la taille et la forme des érythrocytes, l’aspect et la différenciation des leucocytes 2- Observation par microscope Protocole Frottis sur lame : Déposer une goutte de sang de taille moyenne à 01 cm de l'extrémité d'une lame dégraissé. Placer sur la goutte au contact de l’arête d’une lame ou une lamelle inclinée à 45° de façon à ce que le sang s'étale par capillarité. Pousser rapidement la deuxième lame maintenue à 45° le long de la lame pour étaler uniformément la goutte (frottis) Si la taille de la goutte est convenable, le frottis doit se terminer à 01 cm environ de l’autre extrémité de la lame TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) Page 1 Univsité Badji Mokhtar – Annaba Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C) Coloration de May Grünwald- Giemsa :C’est une association de deux types de colorants : May Grünwald Giemsa Une solution d’éosine et bleu de méthylène dans le méthanol. Une solution d’éosine et de dérivé bleu de méthylène (azur de méthylène) dans le méthanol et le glycérol. Mode opératoire Etapes 1 - Coloration au May Grünwald 2 - Coloration au May – Grünwald (suite) Manipulations - Placer la lame du frottis sur les barrettes de support horizontal d’un bac de coloration. - Recouvrir le frottis de 15 gouttes de colorant. - Ajouter 15 gouttes d’eau distillée. Durées d’action 3 minutes 2 minutes - Eliminer le May – Grünwald sous un 3 - Coloration au Giemsa Séchage faible courant d’eau distillée. - Déposer 2 gouttes de Giemsa puis 20 gouttes d’eau distillée - Rincer par un faible jet d’eau distillée. - Laisser sécher la lame à l’air, en position inclinée, après avoir essuyé la face inférieure avec du papier essuie-tout. 10 minutes Au moins 5minutes Observation au microscope : On procède à l’observation microscopique du frottis avec l’objectif x40. EQUIPE MSTEV : DJEDIOUI- BOUMENDJEL -DERRADJ-BOUBIDI-BOUCHEHDANE-BOUALIZEDDAM-HACHOUF-DERBAL –ZEGAOULA. TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) Page 2 Univsité Badji Mokhtar – Annaba Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C) Compte rendu TP N°01 MSTEV OBSERVATION MICRSCOPIQUE D’UN FROTTIS SANGUIN NOM –PRENOM N°POSTE TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) GROUPE NOM DE L’ENSEIGNANT Page 3 Univsité Badji Mokhtar – Annaba Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C) La description des différentes parties du microscope à lumière : TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) Page 4 Univsité Badji Mokhtar – Annaba Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C) Les constituants du sang TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) Page 5 Univsité Badji Mokhtar – Annaba Méthodologie Scientifique et Techniques d'Etude du Vivant (2ème année T.C) Résultats Observation microscopique réelle du frottis(TP) TP OBSERVATION D’UN FROTTIS SANGUIN (2021/2022) Page 6
